Er det effektivt - urinalyse for tuberkulose?

Urinalyse er en af ​​måderne at opdage mycobacterium tuberculosis i menneskekroppen. Det bruges sammen med tuberkulinprøver, hardware diagnostiske metoder, blod og sputum test.

Undersøgelsen bruges til at identificere ekstrapulmonale former af sygdommen: nyretubberkulose, urinveje, reproduktionssystem.

Hvordan udføres urinanalyse for at identificere patogener, hvilke regler skal følges for at få et præcist resultat?

Urinalyse for tuberkulose mikrobakterier: indikationer for

Tuberkulose i nyrerne og det urogenitale system er mindre almindeligt end lungesyge af sygdommen, men på grund af fraværet af udtalt symptomer og kompliceret diagnose medfører ofte alvorlige konsekvenser.

Foto 1. Billede af nyrer modificeret ved tuberkuloseinfektion.

Hovedindikationen for urinalyse er mistænkt for ekstrapulmonal tuberkulose. Denne undersøgelse er tildelt mennesker, der længe har været behandlet med succes for patologier som blærebetændelse, betændelse i prostata og appendages, nyrer, urolithiasis. Manglen på resultater af behandling af urogenitale sygdomme kan indikere, at de er forårsaget af Mycobacterium tuberculosis.

Med en bekræftet diagnose udføres denne undersøgelse for at bestemme typen af ​​mykobakterier og vælge den rigtige behandlingsregime og i fremskredne tilfælde - for at vurdere tilstanden af ​​urinsystemet.

Hjælp. I den pulmonale form af sygdommen er den generelle analyse af urin praktisk talt uinformativ, da den patologiske proces ikke forårsager lyse ændringer i dets sammensætning.

Hvordan gør man det?

Med nederlaget af kroppen ved tuberkulose udskilles mykobakterier med alle kropsvæsker, herunder urin. De mest nøjagtige metoder til diagnosticering af en sygdom er bakterioskopi eller udsåning af en prøve af et biomateriale på næringsmedier. Morgen-urindelen bruges til at identificere mikroorganismer, og undersøgelsen anbefales at gentages 2-3 gange, da det ikke altid er muligt at bestemme infektion med den første urindel.

Det er vigtigt! Ekstrapulmonale former for tuberkulose er ofte asymptomatiske (nogle gange føler patienter lidt ubehag i lænderegionen), så urinalyse spiller en vigtig rolle ved rettidig diagnose og behandling af sygdommen.

Forberedelse til analyse

For at opnå et pålideligt resultat anbefales patienten at følge flere regler:

• for dagen ikke at bruge produkter, der kan ændre væskens farve (rødbeder, blåbær, gulerødder osv.);
• nægte at tage visse medicin: diuretika, gruppe B-vitaminer, aspirin;
• Kvinder har det bedre at samle materiale før eller efter menstruationsblødning.

Før du samler urin anbefales det at vaske kønsorganerne grundigt og derefter samle den "gennemsnitlige" urin i en steril beholder. For at undgå forurening og indkomst af bakterier ind i biomaterialet, skal beholderen straks være tæt lukket. Inden prøven tages til laboratoriet, skal den opbevares på et køligt sted.

Advarsel! Forurening af biomaterialet kan føre til hæmning af væksten af ​​mykobakterier og et falsk-negativt resultat.

Essensen og metodikken af

Mycobacterium tuberculosis tilhører de nedre svampe og sticks ikke længere end hundrede millimeter lange. I analysen af ​​urin kan de identificeres på tre måder: bakterioskopisk, bakteriologisk, ved anvendelse af en biologisk prøve.

Bakterioskopisk (ifølge Zill-Nielsen). Essensen af ​​metoden er, at mykobakterier ikke er i stand til at leve i et surt miljø, så specielle reagenser bruges til at identificere dem, hvilket pletter alle ustabile strukturer. Først de affarves med svovlsyre, hvorefter methylenblåt opløsning injiceres. På grund af dette opnår alle strukturer og celler en lyseblå farve med undtagelse af mycobacterium, som bliver crimson-rød.

Ulempen ved denne metode er, at det er ret vanskeligt at rense urinen af ​​urenheder, hvilket gør undersøgelsens nøjagtighed reduceret (for at øge undersøgelsens diagnostiske værdi, bliver urin taget ved hjælp af et kateter).

Bakteriologisk. En anden måde at identificere tuberkulose forårsagende midler på i urinalyse er bakteriologisk. For at udføre sedimentet tages urin, hvorefter det dyrkes i et næringsmedium.

Minus af metoden er ret lang ventet på resultatet. De nøjagtige datoer varierer alt efter hvilken type medium der anvendes til dyrkning af biomaterialet. Når du bruger blodmiljøet, skal resultatet vente i 7 dage, kartoffel - 30-45 dage.

Foto 2. Resultatet af bakteriologisk test: bakterier, der var i patientens urinsediment, blev dyrket i en petriskål.

Biologisk prøve. Den mest følsomme metode til påvisning af mykobakterier, som ofte anvendes i stedet for Mantoux-reaktionen.

En urinprøve injiceres i marsvinet, og dyret kan bruges til nøjagtig diagnose om nogle få måneder. For at kunne foretage en diagnose tidligere kan du tage en tuberkulinprøve fra humle.

Nøjagtigheden af ​​bakterioskopisk og bakteriologisk analyse er ca. 80%, nøjagtigheden af ​​en biologisk prøve er 100%.

At detektere tuberkulose i det urogenitale system anvendes ikke kun bakteriologisk, men også en generel urinalyse. Indikatorer for sygdommen er ikke kun mykobakterier, men også karakteristiske sømlignende leukocytter, protein (proteinuri), ikke-specifikke bakterier, en stigning i koncentrationen af ​​røde blodlegemer. Syrereaktionen af ​​biomaterialeprøven observeres i ca. 60% af tilfældene, så det kan ikke betragtes som et nøjagtigt diagnostisk kriterium.

Hjælp. Den mest informative indikator for tuberkulose, ifølge de fleste eksperter, er en klassisk triade: pyuria (tilstedeværelse af pus i prøven), albuminuri (eller spor af protein), og sur reaktion.

Hvad er PCR for tuberkulose og hvordan man laver en test?

PCR til tuberkulose er ordineret, når det er umuligt at foretage en diagnose, eller det er umuligt at foretage andre undersøgelser. Analysen gør det muligt at identificere Kochstaven i de tidligste stadier og starte behandlingen i tide.

Beskrivelse af PCR for tuberkulose

Indikationer for PCR-diagnostik

Typer af PCR til tuberkulose

Forberedelse til analysen

Hvordan er PCR for tuberkulose

Fortolkning af undersøgelsesresultater

Særlige egenskaber ved PCR for tuberkulose hos børn

Hvor meget koster PCR for tuberkulose?

Kommentarer og anmeldelser

Beskrivelse af PCR for tuberkulose

PCR (polymerasekædereaktion) for tuberkulose er en nøjagtig analyse, som kan opdage en Koch-stav om nogle få timer. Diagnostik er baseret på gentekniske metoder. Læger isolerer DNA-cellen ved hjælp af genmolekylære test for at bestemme typen af ​​patogener.

Fordele ved fremgangsmåden

• giver dig mulighed for at identificere patogenet i de tidlige stadier uden manifestation af synlige symptomer;
• diagnostik har ingen kontraindikationer og er tilladt for børn
• forskning kan udføres ved at tage den mindste mængde materiale.
• universel forskning af biomaterialer;
• Undersøgelsen er effektiv til bestemmelse af sygdommens gentagelse.

Ulemper ved metoden

Sammen med fordelene har PCR-undersøgelser også ulemper.

De vigtigste er:

1. Undersøgelsen er ikke overalt, du kan passere. Da udstyret til en sådan diagnose er dyrt, installeres den i betalt laboratorier.
2. PCR for tuberkulose kan give et positivt svar, hvis det detekterer døde mykobakterier, for eksempel efter behandling.
3. Mutationer af patogener reducerer signifikant effektiviteten af ​​PCR-metoden, da DNA-tråde ikke er i stand til sekventiel syntetisering.
4. Behovet for omhyggeligt at vælge biomateriale til analyse.

Indikationer for PCR-diagnostik

Send til undersøgelsen for følgende indikationer:

1. Hvis der var mindst en enkelt kontakt med en patient med tuberkulose, og det er svært at identificere sygdommen ved hjælp af standardprøver.
2. Der er situationer, hvor det ikke er muligt at bringe en person til røntgenstråler eller andre undersøgelser. I sådanne tilfælde er det meget lettere at levere sputummet.
3. Analysen er udpeget på tærsklen til den kommende operation, når det er nødvendigt at afgøre, om en person er syg eller ej.
4. Hvis patienten har et tvivlsomt resultat af Mantoux-reaktionen.
5. Tildel til gravide og børn for at undgå udsættelse for røntgenstråler.

Typer af PCR til tuberkulose

Valget af biomateriale til screening for tuberkulose bør udpeges individuelt.

For diagnosticering af PCR for tuberkulose kan der tages prøver:

Blodprøve

Funktioner af blodprøven for tuberkulose:

1. Udført i tilfælde, hvor anden diagnostik ikke er egnet eller kontraindiceret. For at foretage en korrekt diagnose skal du tage mere end et røntgenbillede. Overdreven eksponering er ikke sikker for kroppen, så det er meget lettere at tage blod fra en patient.
2. Lægen kan også give retning til blodet, når de modtager kontroversielle resultater efter fluorografi.

Spyt analyse

1. Analysen af ​​spyt er mindre populær og informativ end andre undersøgelser, da tuberkulose ikke påvirker spytkirtlerne. Derfor vil resultatet i de fleste tilfælde være negativt.
2. Metoden sigter mod at identificere pulmonale og ekstrapulmonale former.
3. Hvis prøvenes farve ikke ændres under reagensens virkemåde, betyder det, at der ikke er patogener. Hvis der opstår en mistanke om en sygdom, udføres der et yderligere kompleks af analyser.

Sputumanalyse

Sputumanalyse er den mest informative til detektion af tuberkulosepatogener. Prøver tages flere gange, som regel er tre gange tilstrækkeligt. Dette eliminerer muligheden for fejl ved at opnå materiale af dårlig kvalitet.

Hvis en person er inficeret med tuberkulose, frigøres sputum i små mængder sammen med hosten. Hos patienter i sygdommens avancerede stadium udskilles mucus med blodige pletter.

Det anbefales ikke at tage sputum til undersøgelse, hvis patienten har mistanke om knogler eller nerves tuberkulose.

Urinanalyse

Urinalyse er en af ​​måderne til at opdage ekstrapulmonale former for sygdommen: nyretuberkulose og urinveje.

I tilfælde af sygdomens pulmonale form er den generelle analyse af urin praktisk talt uinformativ, da der ikke observeres nogen udpræget patologiske ændringer.

Fra videoen finder du ud af hvilken læge diagnosen tuberkulose er. Filmet af kanal tuberkulum. ru.

Forberedelse til analysen

Når du tager en blodprøve, skal PCR følge nogle regler for at opnå et pålideligt resultat:

• Det anbefales at tage en analyse på en tom mave;
• bør udelukke alkohol på tærsklen til undersøgelsen
• du skal afslutte at tage antibiotika 15-20 dage før analysen;
• Det anbefales at afstå fra at ryge i en time før blodindsamling.

Når du tager en sputum til eksamen, anbefales det også at følge nogle regler:

• Materialet opsamles om morgenen, og derfor børler de deres tænder og skyller mundhulen grundigt.
• hvis sputum ikke bevæger sig godt, anbefales det at tage en ekspektorant om aftenen eller indånde;
• Det er nødvendigt at holde op med at tage antibiotika 15 dage før undersøgelsen.

For at opnå et pålideligt resultat af urinanalyse anbefales patienten at overholde følgende regler:

• Materialet skal indsamles om morgenen
• på tærsklen anbefales det ikke at spise mad, der kan ændre farven på væsken (rødbeder, blåbær og andre);
• Stop med at tage antibiotika i 15 dage før undersøgelsen.

Hvordan er PCR for tuberkulose

Egenskaber ved materialeindtaget:

1. En blodprøve tages fra en patient om morgenen fra en vene i laboratoriet.
2. Til levering af sputum på slim er det nødvendigt at nødvendigvis fra strubehovedet, og fortrinsvis uden en stor mængde spyt. Hendes patient skal spytte i en speciel steril beholder og derefter overlevere til studiet.
3. Læger tager et skrab med et specielt værktøj fra kindens slimhinder.
4. Urin lejes i en speciel beholder. Tag midtdelen af ​​morgendelen.

Molekylærgenetisk reaktion ved PCR udføres under anvendelse af en særlig anordning kaldet en forstærker. At studere de nødvendige DNA-segmenter, som begynder syntesen af ​​molekyler.

Teknikken består af fire faser:

1. Indledningsvis opsamles det krævede biomateriale til forskning (blod, sputum og spyt).
2. Derefter opvarmes prøven ved en temperatur på op til 98 grader og ikke mere end to minutter. Således ødelægges den primære form af DNA-genetik og to kæder dannes.
3. Herefter kommer annealing eller sænkning af temperaturen, som grunden binder til DNA-strengen.
4. Det sidste stadium kaldes forlængelse. Dette er syntesen af ​​molekyler, hvilket fører til det endelige resultat.

Du skal bruge 25-30 sådanne cyklusser for at få et bestemt antal kopier af virusets DNA. Sygdomsfremkaldende midler bestemmes af dem.

Informationsindholdet og pålideligheden af ​​PCR-diagnostik er 100%.

Fortolkning af undersøgelsesresultater

Produktionstiden for analysen er ca. 5-6 timer.

Diagnostik ved PCR-metoden giver 2 varianter af resultater:

1. Fundet. I det materiale, der blev undersøgt, blev DNA'en af ​​det tuberkuløse middel detekteret. Sandsynligheden for infektion er 97%. Sådanne patienter sendes hurtigt til en TB dispensary, hvor behandling vil blive udført.
2. Ikke fundet. Et negativt svar indikerer fraværet af det forårsagende middel.

Hvis resultatet er positivt, udfører lægen en detaljeret afkodning, som bestemmer sygdommens stadium og fokus.

Fotogalleri

Særlige egenskaber ved PCR for tuberkulose hos børn

PCR er foreskrevet, hvis resultatet af en Mantoux-test er usikkert eller i det mindste mistanke om infektion. At give proceduren er sikker for børn.

Muligheden for urinalyse for tuberkulose ved hjælp af PCR

Hvis Mantu har givet et dårligt resultat, anvendes yderligere diagnostiske metoder. Det vigtigste er at identificere sygdommen, og spørgsmålet om, hvor meget en diagnostisk undersøgelsesomkostninger er tilbagegang i baggrunden. En af de mest nøjagtige og løst i enhver alder er PCR. Urinalyse for tuberkulose på denne måde afslører ICD umiddelbart efter at de kommer ind i kroppen. Hvad er metoden, og hvad er dens fordele?

Hvad er urinanalyse ved PCR?

Polymerasekædereaktion styres af molekylærbiologi. At udforske urinen (eller andet biomateriale) bruger specielle enzymer. De kan kopiere DNA fra mikroorganismer. Eksperter sammenligner materialet med den eksisterende base og bestemmer om der er en infektion. Hvis svaret er positivt, bestemmes infektionsgraden og typen af ​​patogen.

Nøjagtighed er vigtig her, så laboratoriearbejdere skal have passende viden og færdigheder.

Ud over tuberkulose diagnostiserer PCR andre infektionssygdomme (hepatitis, STI'er, HIV, candidiasis, borreliose osv.).

Nogle forældre mener, at denne metode kan bruges i stedet for Mantoux, men det er det ikke. Selv dets høj ydeevne kan ikke erstatte prøven, som er godkendt og obligatorisk i alle førskole- og skoleinstitutioner. At give et PCR-resultat til en børnehave eller skole er måske ikke nok til at lade et barn komme ind i børneholdet.

Er denne metode effektiv til diagnosticering af tuberkulose?

Urin-PCR for tuberkulose er en effektiv måde at påvise patologi på, men nogle gange er der falske resultater i forhold til små børn. I dette tilfælde observeres unøjagtigheder, da der er mange urenheder i urinen. Af og til udføres yderligere undersøgelser for at validere og bekræfte diagnosen.

Hvor passende denne metode i et bestemt tilfælde vil phthisiatrician fortælle. Det er denne specialist, der først skal gennemgå en konsultation.

Kontraindikationer til metoden

Der er ingen kontraindikationer. Udfør analyse tilladt:

• hos børn;
• med ARD, ARVI, GRIPpe, mæslinger mv.
• under allergier mv.

Det er uhensigtsmæssigt at udføre aldersgruppen fra 0 til 3 år på grund af modtagelsen af ​​upålidelige resultater.

Denne undersøgelsesmetode vælges oftere på grund af manglende kontraindikationer i den og en høj procentdel af opnåelse af pålidelige resultater.

fordele

Praksis viser, at metoden retfærdiggør omkostningerne. Fordele af urin-PCR:

• For at gøre en "dom" skal der ikke introduceres stoffer i kroppen, da analysen udføres i et reagensglas i laboratoriet;
• smertefri;
• For at opnå resultater er det ikke nødvendigt at vente flere dage på blot et par timer, højst en dag (hvilket ikke kan forventes, hvis urinkulturen er færdig);
• identificerer patogenet selv når andre metoder ikke har givet resultater
• opdage sygdommen i et tidligt stadium
• analysen er meget følsom, derfor er det svært at savne tuberkulose;
• falske resultater observeres sjældent (normalt skylden i helbredsarbejderens inkompetence eller ukorrekt opsamling af urin af patienten selv);
• et infektiøst middel påvises, selvom biomaterialet indeholder mindste mængden.

til indhold ↑

mangler

• høj pris (men det varierer afhængigt af dollar og andre faktorer);
• Der er falske resultater (ca. 10%).

Falske svar vises af forskellige årsager.

1. Hvis urinopsamlingen blev udført forkert, blev anbefalingerne overtrådt.
2. Når en labarbejder ikke har den nødvendige viden til at udføre analysen eller har overtrådt den materielle forskningsmetode.
3. Hvis den opsamlede urin ikke får mykobakterier.
4. I urinen er der mange urenheder fra tredjeparter, der forvrider resultatet (normalt hos børn).

Alt ovenfor er en grund til at bruge yderligere diagnostiske foranstaltninger.

Forberedelse til analyse

Hvordan passerer urin? For at Urin ikke bliver årsagen til det forkerte svar, er det nødvendigt at udføre sin korrekte samling. Forberedelse er vigtig.

1. Hvis analysen er planlagt for en voksen, så 1-2 dage før det skal du glemme samleje.
2. Det er vigtigt at fortælle lægen om antibiotikabehandling (hvis det har været i de seneste uger). Du skal vente mindst en måned og kun derefter gå videre til undersøgelsen. Enhver medicinering påvirker resultatet af analysen.
3. Det bedste tidspunkt at samle er morgen. Foreløbigt forbrug af mad og drikkevarer er ikke tilladt.
4. Kønsorganerne er ikke forvaskede.
5. Det er vigtigt at købe et specielt vakuumsæt, hvor urin indsamles. Sæt den i en almindelig krukke, og hæld den derefter ud. Som følge heraf falder bakterier eller vira fra det ydre miljø ind i urinen, hvilket forhindrer at opnå et pålideligt resultat. Kontakt med det eksterne miljø bør undgås. Et specielt sæt består af en steril krukke med låg, reagensglas og rør.
6. I en krukke tømmer en person urinblæren. Det er vigtigt at samle den første del af urinen.
7. Efter at beholderen er lukket og indsat i røret. Det bliver fyldt med indhold alene. Berør dette negative pres.
8. Efter påfyldning af røret bortskaffes beholderen og røret.
9. Det resulterende biomateriale transporteres til laboratoriet, hvor de selv vil foretage analysen. Kun røret med urinen i det er leveret.

Hvis patienten ikke er i stand til at samle urin af en eller anden grund, vil en specialist fra klinikken komme til hans hjælp. Specielt trænet folk kommer med alt, hvad de har brug for, og gør alt uden fejl.

Hvordan er denne analyse gjort?

PCR for tuberkulose udføres i flere faser. Overvej hver især i detaljer.

1. For det første er DNA molekyler opdelt i komplementære tråde ved opvarmning til høje temperaturer.
2. Derefter introduceres primere i det resulterende materiale. En af deres typer er komplementære til DNA'et i den første streng (dets begyndelse), det andet DNA af den anden streng (dens ende). Sammensætningen af ​​de fire typer DDNTP tilsættes straks. Næste kommer tilslutning af alle komponenter.
3. Sammensætningen opvarmes, og termostabil DNA-polymerase indføres i den. Efter afprøveprøverne afkøles. Alt dette sker i termostater (termiske cyklere).
4. I slutningen evaluerer specialisten de opnåede resultater. Dette gøres ved hjælp af en speciel gel med lysende ultraviolette stråler. Det elektroforegram, der opnås, analyseres, og resultatet er fikset.

Udstyret, som analysen udføres, er dyrt og ikke til stede overalt.

Afkodningsresultater

Kun en kvalificeret specialist kan dechiffrere resultatet. Dette tager højde for patientens alder. Svaret er baseret på mængden af ​​patogener, der er til stede i prøven.

Der kan være to svar:

Positiv betyder, at der er IBC i urinen. Dette er en grund til enten at gennemgå yderligere diagnoser (om nødvendigt), eller at begynde behandling for tuberkulose. Børn har normalt falske resultater, så de foreskriver andre undersøgelsesmetoder, der bekræfter diagnosen.

Når du modtager et negativt svar, kan du være rolig, der er ingen infektion. I tilfælde af symptomer, som antyder andet, afsluttes undersøgelsen ikke.

Efter at labarbejderen har deklareret resultatet, sendes det papir, som svaret er angivet på, til den smalle specialist, den der gav retningen til analyse. TB-lægen undersøger dette dokument, på grundlag af hvilket han bestemmer hvad han skal gøre næste gang.

Omkostningsanalyse i forskellige centre

Nedenfor kan du finde oplysninger om de omtrentlige priser for urin-PCR i medicinske laboratorier. Til sammenligning præsenterer vi tre populære institutioner.

PCR diagnose af tuberkulose hos børn og voksne: indikationer for

Verdenssundhedsorganisationen anerkendte for 20 år siden, at udbredelsen af ​​tuberkulose var ude af kontrol og nåede omfanget af en epidemi. Siden da har situationen ikke forbedret sig. Mere end en million tilfælde af sygdommen diagnosticeres hvert år, hvoraf næsten en fjerdedel er dødelig. I løbet af det sidste årti er forekomsten blandt børn steget, de fleste former for sygdommen lænner ikke til standard antibiotikabehandling.

I dag er en af ​​de globale opgaver for medicin udviklingen af ​​sådanne diagnostiske metoder, som vil gøre det muligt at identificere patologi inden begyndelsen af ​​udprøvede kliniske symptomer. En af dem er polymerasekædereaktionen (PCR) til tuberkulose, som hjælper med at opdage Koch-sygdomsfremkaldende pinde i blod, sputum og andre biologiske væsker.

Diagnose af tuberkulose

Screeningstest er rettet mod at opdage patienter, bærere af tuberkulose og forebygge spredning af infektion i samfundet. For børn under 14 år er Mantoux testen massivt brugt. Dette er en immunologisk test, hvor en dosis tuberkulin injiceres subkutant - en kompleks blanding af det genetiske materiale af flere typer mycobakterier. Udseendet af en udtalt reaktion indikerer en aktivt forekommende infektiøs proces.

Til forebyggende undersøgelse hos voksne ved hjælp af fluorografi eller røntgenstråler. Disse metoder hjælper med at visualisere patologiske læsioner i lungevæv. Det forårsager imidlertid vanskeligheder med at differentiere tuberkulose fra en anden organisk patologi (maligne og godartede neoplasmer, inflammatoriske processer, parasitære invasioner, professionel lungeskader).

For at præcisere strukturen og størrelsen af ​​det patologiske fokus kan der være behov for yderligere instrumentelle undersøgelser:

• målrettet radiografi;
• computertomografi;
• magnetisk resonans billeddannelse.

Metoder til diagnose af tuberkulose

I tilfælde af tvivlsomme resultater og til udnævnelsen af ​​passende terapi er der behov for mere nøjagtige diagnostiske metoder, som gør det muligt at isolere patogenet. Mikroskopisk og bakteriologisk undersøgelse af sputum bruges til at bekræfte lungerformer af tuberkulose i lang tid.

I de seneste år er forekomsten af ​​mycobacterium i forskellige organer og systemer - nyrerne, knoglerne, tarmene, huden - blevet hyppigere. For at identificere disse former for tuberkulose kan ultralydundersøgelser, urin og fæceskultur, endoskopiske undersøgelser anvendes.

PCR-diagnostik til tuberkulose hjælper med at bekræfte tilstedeværelsen af ​​Koch-pinde i blodet samt dens følsomhed overfor visse lægemidler. Dette er en meget effektiv metode baseret på påvisning af det bakterielle genetiske materiale i forskellige biologiske væsker.

Specificitet og indikationer

Polymerasekædereaktion er en yderst følsom mikrobiologisk diagnostisk metode, der er baseret på genteknologiske principper. For at bekræfte tilstedeværelsen af ​​et patogen i et biologisk materiale er det tilstrækkeligt at detektere et unikt nukleinsyrefragment for det. PCR for tuberkulose kan detektere bakterier i blodet, sputum, urin.

I øjeblikket udviklede flere analysemetoder. De mest populære blandt dem er følgende:

• Real-time PCR;
• mikrofluidisk teknologi;
• sekventering og pyrosequencing.

Real-time PCR

Laboratorier bruger oftest realtids-polymerasekædereaktion, da det reducerer antallet af falsk-positive resultater, og analyseprocessen selv tager kort tid.

I betragtning af det store antal skjulte former for sygdommen og ineffektiviteten af ​​standarddiagnostiske metoder anvendes PCR i stigende grad. Formålet med denne analyse er vist på:

• identificere mistænkelige områder på røntgenstrålen;
• tvivlsomme resultater af tuberkulinprøve
• umuligheden af ​​at foretage mikroskopisk og bakteriologisk analyse af sputum hos personer i alvorlig tilstand
• udføre kirurgiske indgreb, når det er nødvendigt at hurtigt sikre, at der ikke er nogen infektion;
• afvisning af brugen af ​​fluorografi, røntgenstråler eller computertomografi (fx ved gravide kvinder og amning i tilfælde af overskydende strålingseksponering)
• mistanke om ekstrapulmonal tuberkulose (det anbefales at ikke kun blod, men også slim anvendes).

PCR-diagnostik af tuberkulose har vist sig i undersøgelsen af ​​børn på grund af manglende yderligere eksponering og hurtige resultater.

Forberedelses- og analyseprocedure

Særligt forberedelse til blod-PCR er ikke påkrævet. For at undgå komplikationer ved blodprøveudtagning og for at opnå materiale af høj kvalitet skal følgende generelle regler følges:

• analyse skal tages om morgenen ikke tidligere end 2 timer efter at være vågnet
• Det bør begrænse indtaget af fede og stegte fødevarer en dag før blodprøveudtagning;
• Afstå fra at spise, te og kaffe i 8-9 timer, det er tilladt at drikke rent vand
• Røg ikke i mindst 3-4 timer.

I tilfælde af permanent medicin (hormoner, antikoagulantia, antiinflammatoriske lægemidler, antibiotika, blodfortyndere), bør du underrette laboratorieassistenten om dette.

Ved levering af sputum bør du børste dine tænder godt og skylle munden flere gange. Saml materiale i en steril beholder. For bedre resultater kan der tages en slim eller mucolytisk middel om aftenen.

Diagnosen selv består af flere trin.

Hegn materiale. Det kan udføres i laboratoriet og eksternt. Nogle typer af materiale patienten indsamler uafhængigt (urin, slim).

Destruktionen af ​​strukturen af ​​nukleinsyrer (denaturering af DNA og RNA molekyler). For at gøre dette opvarmes testmaterialet til en temperatur på 98 grader og holdes i flere minutter. Som følge heraf dannes den dobbelte helix, enkeltstrengede molekyler.

Joke. Efter tilsætning af en primer (en kort del af nukleinsyre), falder temperaturen med flere grader, polymerase aktiveres.

Elognatsiya. Temperaturen bringes til det optimale niveau, enzymaktiviteten når et maksimum, og den anden kæde er afsluttet i overensstemmelse med Chargaff-komplementaritetsreglen.

For at afslutte undersøgelsen er det nødvendigt at syntetisere det krævede antal DNA-molekyler - ca. 50 cyklusser af den ovennævnte reaktion. Det tager ca. 2-3 timer. Et positivt resultat af reaktionen indikerer ikke altid det aktive stadium af sygdommen, men er en indikator for tilstedeværelsen af ​​en mikroorganisme i kroppen.

Fordele og ulemper ved fremgangsmåden

I sammenligning med andre mikrobiologiske metoder tager PCR ikke lang tid at opdage Mycobacterium tuberculosis ved hjælp af PCR, resultatet kan opnås på testdagen.

En anden fordel er analysens høje specificitet, som gør det muligt at påvise patogenens tilstedeværelse med en nøjagtighed på 90-95% i næsten ethvert biomateriale (blod, urin, afføring, cerebrospinalvæske, sputum, bronchusspyling).

Der er imidlertid flere ulemper med metoden:

• en temmelig høj procentdel falske positive resultater (op til 15%), der er forbundet med påvisning af ikke-levende mikroorganismer;
• i nogle tilfælde kan du springe over sygdommens kendsgerning, da Mycobacterium tuberculosis ofte udsættes for mutationer, og dets genetiske materiale ændres;
• lav effektivitet ved undersøgelse af personer med immundefekt
• høje omkostninger ved forskning, behovet for dyrt udstyr og reagenser.

Hvad kan erstattes?

I betragtning af de forskellige former for tuberkuloseinfektion, for en mere præcis diagnose og valg af behandling er det nødvendigt at kombinere flere diagnostiske undersøgelser:

Obligatorisk analyse for børn er Mantoux testen. Hvis indførelsen af ​​tuberkulin (genetisk materiale af mycobakterier) forekommer en udtalt reaktion, kan det antages infektion med en tuberkelbacillus.

Røntgenmetoder kan bruges til at visualisere det patologiske fokus. Ved diagnosen ekstrapulmonal tuberkulose anvendes endoskopiske metoder med samtidig biopsi:

• bronkoskopi hjælper med at identificere læsioner i strubehovedet, luftrøret, bronchi;
• koloskopi - tarm;
• cystourethroskopi - organer i urinsystemet
• hysteroskopi - kvindelige kønsorganer. Disse metoder er ikke specifikke, for at foretage en nøjagtig diagnose bør patogenet identificeres.

Generelle kliniske tests vil bidrage til mere specifikt at bestemme kroppens tilstand. En fuldstændig blodtælling med leukocytformel er påkrævet.

En stigning i antallet af neutrofiler med reduceret lymfocytniveau og en stigning i erythrocytsedimenteringshastigheden (ESR) indikerer en aktiv inflammatorisk proces med bakteriel etiologi. At udelukke skade på organerne i urinsystemet ved hjælp af en generel urinalyse og kultur for sterilitet.

PCR er i øjeblikket tilgængelig i de fleste private laboratorier. Dette kræver ikke kun højt kvalificerede specialister, men også dyrt udstyr, et stort antal reagenser. Derfor er brugen af ​​denne metode begrænset på trods af dens høje nøjagtighed og specificitet.

PCR diagnose af tuberkulose

Tuberkulose er en specifik infektion, dets fokus kan være i humane væv i årevis og spredes derefter i flere måneder. Dette er en kronisk sygdom, hvis optimale behandlingsregimer er vanskelige at vælge. En af grundene til dette er den sene diagnose, når mykobakterier, mens de er i menneskekroppen, allerede har tilpasset sig mange stoffer.

Hvilke moderne diagnosemetoder eksisterer? PCR diagnostik - hvad er det? Hvordan foregår denne forskning? I hvilke tilfælde er tuberkulose diagnosticeret af denne metode og hvad er dens essens?

Hvad er PCR-diagnostik

Dette er en af ​​de mest moderne metoder til diagnosticering af ikke kun sygdomme, men også påvisning af biologisk materiale. PCR-diagnostik blev opfundet relativt nylig. For cirka 30 år siden i 1983 foreslog en amerikansk biokemi, Carey Banks Mullis, et komplekst opsvingskema for det biologiske materiale af mikroorganismer i et kort segment. Takket være sin opdagelse blev forskeren tildelt den højeste pris - Nobelprisen.

Hvad er det - PCR diagnose af infektioner? Polymerasekædereaktion (PCR) er en diagnose af påvisning af virussygdomme, baseret på genteknologiske metoder. Det er meget udbredt inden for medicinsk mikrobiologi, immunologi og virologi. Metoden er universel og hjælper med at lave en diagnose med en lille mængde materiale. En infektion kan registreres bogstaveligt i de første timer med infektion med det, længe før de første symptomer på sygdommen optræder.

Metoden består i at opnå fra materialet fra en syg person, ikke selve patogenet, men fragmenter af genomet (DNA-partikler), dets biosyntese med efterfølgende bestemmelse til hvilken klasse af mikroorganismer det opnåede genetiske materiale tilhører ved hjælp af molekylære genetiske metoder.

På trods af at dette er en kompleks proces, tager det meget mindre tid end mange biologiske metoder til at detektere smitsomme stoffer. Inden for få timer kan en mikroorganisme detekteres ved hjælp af PCR. For at gøre dette er der ingen grund til at isolere det fra miljøet (blod, cerebrospinalvæske, sputum) og vokse det i lang tid på kunstige næringsmedier. Det er nok, at et lille fragment af DNA-strengen af ​​det infektiøse middel er til stede i det undersøgte materiale.

Reaktionsgrundlaget er muligheden under kunstige betingelser (in vitro) til at skabe syntese af nukleinsyremolekyler af det infektiøse middel.

Hvad er der brug for PCR?

1. Primers er de DNA-segmenter, hvorfra biosyntese eller skabelse begynder.
2. Nukleotider eller komplekse forbindelser, der er grundlaget for et DNA eller RNA molekyle.
3. Polymerasekædereaktion er umulig uden tilstedeværelse af polymerase, hvilket er et enzym, der accelererer PCR.

Trin af PCR-diagnostik

Hvordan udføres molekylær diagnose med PCR? Proceduren er enkel og tager kort tid under hensyntagen til indsamling af materiale.

1. Inden studiet påbegyndes, tager de det nødvendige biologiske materiale - det her er det bronkiske vaskevand, blod, maveindhold, sputum. Den type biologisk materiale afhænger af det formodede patogen.
2. Denaturering eller ødelæggelse af den primære struktur af DNA, som består af to kæder. Kernen i denne fase er at adskille de to kæder under påvirkning af høj temperatur (maksimum er 98 ºC, som ikke varer mere end to minutter).
3. Ved næste fase af PCR, kaldet annealing, reduceres temperaturen med flere grader, således at primeren vil binde til DNA-strengen.
4. Forlængelse, hvor syntesen af ​​de ønskede molekyler finder sted direkte.

Som følge heraf modtager kun 25-30 sådanne cyklusser det nødvendige antal kopier af mikroorganismer DNA, som er lette at genkende.

Kræver PCR diagnose af tuberkulose?

Det er ikke muligt for absolut alle mennesker med mistænkt tuberkulose at udføre PCR, da metoden kræver dyrt udstyr. Ikke alle offentlige klinikker har råd til at købe det. Derudover er det sket, at de sædvanlige metoder til diagnosticering af en infektion i de fleste tilfælde også retfærdiggør sig selv.

Disse omfatter:

• patientundersøgelse, historieoptagelse;
• fuld undersøgelse af personen
• en undersøgelse ved hjælp af Mantoux tuberculin testen;
• radiografi eller fluorografi;
• computerdiagnostik om nødvendigt;
• mikrobiologiske forskningsmetoder: smear mikroskopi og sputum bakteriologisk undersøgelse.

PCR til tuberkulose udføres i særlige tilfælde, når det er svært at foretage en diagnose, eller det er ikke muligt at udføre andre instrumentelle metoder.

På trods af overflod af diagnostiske metoder fortsætter forekomsten af ​​tuberkulose at vokse. I øjeblikket er der ikke kun vækst, men også andre funktioner:

• sygdommen opstår ofte i svær form;
• Antallet af dødelige tilfælde øges;
• mere modstandsdygtig over for moderne kemoterapi er diagnosticerede former for sygdommen.

Folks tilbageholdenhed med at gennemgå rutinemæssige medicinske undersøgelser årligt fører afvisningen af ​​vaccination til spredning af tuberkulose. Under sådanne forhold har vi brug for hurtige, informative og effektive forskningsmetoder, som bør være tilgængelige for børn og voksne. Alle ovennævnte diagnostiske metoder er meget ringere end PCR.

Fordele ved diagnosticering af tuberkulose med PCR

Denne forskning, men ny, har vist sig godt, især i kontroversielle tilfælde, hvor det er umuligt at foretage en diagnose af en række årsager.

Takket være PCR er det meget lettere at opdage det forårsagende middel af tuberkulose i testmaterialet.

Fordelene ved PCR-diagnostik er som følger.

1. Dette er en hurtig analyse. Et lille fragment af DNA-molekylet kan bruges til at diagnosticere om få timer (ca. fem), som med succes anvendes i nødsituationer, når for eksempel før en operation er det nødvendigt at afgøre, om en person er syg med tuberkulose.
2. PCR-analyse er tilladt i tilfælde af, at andre metoder ikke er tilgængelige eller forbudt (til påvisning af lungetuberkulose, nogle gange må du tage flere radiografiske billeder, hvilket vil være en stor dosis stråling).
3. Ved hjælp af PCR undersøges ethvert biologisk miljø for tilstedeværelsen af ​​et patogen i det. For eksempel kan du gennemføre en undersøgelse af cerebrospinalvæske, hvis der er en mistanke om tuberkuløs meningitis.
4. Tilladt PCR-diagnose af smitsomme sygdomme hos børn, fordi metoden er sikker.
5. Tillader dig at identificere patogenet på ethvert stadium af sygdommen.
6. PCR's høje følsomhed gør det muligt at opdage Mycobacterium tuberculosis, selvom der kun er få mikroorganismer i det biologiske materiale.
7. Det er godt at udføre for diagnosticering af sygdomsfornyelse.

Efter alt det læsede PCR virker næsten perfekt diagnostisk metode, som skal gøre alle mistænkt for tuberkulose. Men der er også ulemper her, de skal tages i betragtning.

Ulemper ved PCR ved diagnosen tuberkulose

I vores tid er sådan diagnostik mere sjælden end regelmæssighed. Og for dette er der grund.

1. Dette er en dyr forskningsmetode. På mange klinikker er udstyr til PCR fraværende på grund af dets høje omkostninger, men analysen kan stadig gøres i betalte laboratorier.
2. Umiddelbart efter behandling kan døde mykobakterier eller lever i små mængder stadig være til stede i kroppen (resultatet vil være positivt under PCR-diagnostik), så metoden vil være upålidelig på nuværende tidspunkt, det giver ingen mening at udføre det.
3. Mutationer af mykobakterier resulterer i ineffektiv PCR - en normal DNA-streng-sekvens kan ikke syntetiseres.
4. Det er nødvendigt at vælge det rigtige miljø for undersøgelsen. Blod er kun taget, hvis det mistænkes for at blive inficeret (sepsis). Der er ikke behov for at tage sputum, hvis der er et spørgsmål om tuberkulose i nervesystemets organer. I dette tilfælde vil PCR ikke være i stand til at detektere patogenet, og diagnosen vil være uninformativ.

Indikationer for at detektere tuberkulose ved hjælp af PCR-analyse

PCR-diagnose af tuberkulose udføres oftest i kontroversielle tilfælde. Hvornår refererer læger denne undersøgelse?

1. Hvis det er svært at foretage en diagnose ved hjælp af de sædvanlige tilgængelige metoder, men der var kontakt med en patient med tuberkulose.
2. I det tilfælde, hvor en person ikke kan leveres til en klinik for at gennemføre rutinemæssige rutinemæssige test for tuberkulose, er det lettere at undersøge ham ved anvendelse af PCR, da sputum til testen kan leveres i en krukke, og diagnosen er bekræftet inden for få timer.
3. Hvis en person skal have en nødoperation, og det er presserende at finde ud af om han er syg med tuberkulose.
4. Om nødvendigt er en gravid kvinde også bedre at undersøge for tuberkulose ved anvendelse af PCR, da metoden er sikker.
5. På en betalt basis er enhver, der ikke er blevet diagnosticeret med tuberkulose, blevet bekræftet ved hjælp af bakteriologiske metoder og fluoroskopi. Dette sker, når læsionen i lungerne er umærkelig i det direkte billede, og personen under levering af sputum til undersøgelsen kunne ikke følge anbefalingerne for korrekt samling af materiale. I dette tilfælde er personen bekymret for alle symptomer, der er karakteristiske for lungetuberkulose.
6. Når der er tvivl om resultaterne af Mantoux-testen.
7. Det er bedre at gøre PCR-diagnose af tuberkulose hos børn. Fremgangsmåden er sikker, skaber ikke yderligere strålingseksponering og er effektiv til at detektere vanskeligt at diagnosticere sygdomsformer.

Tidlig diagnose af tuberkulose er nøglen til ordentligt ordineret behandling og nedsættelse af sygdommens spredning. Ofte er velkendte sygdomsdetekteringsmetoder ikke altid effektive. Derfor er PCR i dag en af ​​de mest pålidelige og sikre måder at påvise infektion i de tidlige stadier af dens udvikling.

Hvornår og hvem ordineres en urintest for tuberkulose

Tuberkulose er smittet uanset social status, alder og bopæl. Ud over standardmetoder som tuberkulindiagnose og FLG kan phthisiatricians ordinere en urinalysetest for tuberkulose for at detektere en infektion.

Generelle oplysninger

Nyreinfektion er den næst mest almindelige sygdom efter lungesyge af sygdommen. For det meste udvikler sig hos mennesker med forsømte lungesår eller knogler som følge af infektion med blodet. Det foreskriver forekomsten af ​​bakterier i vævene i urogenitale kanaler krænkelse af urodynamik eller lokal blodcirkulation.

Normalt trænger Kochs sunde bolde ikke igennem. Tilstedeværelsen af ​​disse bakterier i urinen bliver et pålideligt tegn på tuberkulose, hvilket adskiller det fra andre infektioner, for hvilke der er lavere grænser for tilstedeværelse.

Forberedelse til analyser

Krav, der udføres før OAM (urinalyse) tages:

• brug medium urin opnået umiddelbart efter opvågnen
• materialet opsamles i en ren beholder i mængden 50-100 ml;
• vask de ydre kønsorganer før brug uden brug af vaskemidler;
• Det resulterende materiale leveres til laboratoriet senest kl. 10-11 (mindre end 2 timer efter analysen).

Indsamlingen af ​​urin til bakterioskopi og såning udføres efter de samme regler, men der stilles strengere krav til beholdere til urin. De skal være strengt sterile, så de anbefaler ikke at røre deres indre overflade og kanter, og luk straks låget efter påfyldning. Før levering til laboratoriet opbevares det opsamlede materiale i køleskab.

Før en analyse af urin anbefales det at begrænse forbruget af farvestoffer i 1-2 dage: gulerødder, rødbeder, blåbær.

Kan ændre indikatorerne for urin og dets farve: anti-tuberkulose (rifampicin), diuretika, antivirale lægemidler, acetylsalicylsyre, vitamin-mineralkomplekser mv.

Kvinder bør testes i fravær af menstruationsblødninger.

I hvilke tilfælde foreskriver analysen

Tuberkuløs nyreskade har ikke specifikke symptomer, så patienterne vil blive behandlet i lang tid, men uden varig virkning med forskellige urologiske eller gynækologiske diagnoser:

• cystitis;
• prostatitis;
• pielitah;
• pyelonefritis;
• salpingo;
• urolithiasis.

Hvis en person allerede er blevet diagnosticeret med en lungeinfektion, udføres der en urinalyse for nyre-tuberkulose tre gange i tilfælde af symptomer på skade på det urogenitale system. Tegn på sygdom, der angiver infektion med Koch-pinde, omfatter følgende klager:

• rygsmerter
• dysuri;
• udledning af blod eller pus i urinen.

En urintest for lungtubberkulose bestemmer overvejende ingen ændringer, og når vævene i det urogenitale system er involveret i processen, finder laboratoriet afvigelser i indikatorerne, der gør det muligt at mistanke om en diagnose af tuberkulose:

• pH mindre end 4,0;
• stigning i antallet af leukocytter og røde blodlegemer;
• sømlignende leukocytter i urinen;
• positiv reaktion på protein;
• pus i urinen, især uden bakteriel udskillelse.

Blodprøver afslører også ikke-specifikke ændringer: anæmi, leukocytose. Med disse ændringer kan yderligere undersøgelse af patienten være nødvendig. Hos mænd betragtes tilbagevendende symptomer på prostata læsioner som mistænkt for at have tuberkulose, når urinering er svært, bliver kirtlen forstørret eller rynket, og pus eller blod med sæd frigives i lang tid.

Påvisning af tuberkulose udelukker ikke dets samtidige udvikling på baggrund af andre patologier i urinorganerne.

Definition af tuberkelbacillus

Hvis der er mistanke om nyreinfektion med Mycobacterium, vil en specialist foreskrive et kompleks af undersøgelser, herunder generelle blod- og urintest, Mantoux-test for et barn, røntgendiagnostik, ultralyd, CT, MRI. Men den positive analyse af urin til Mycobacterium tuberculosis vil være en ubetinget bekræftelse af forekomsten af ​​infektion.

Følgende metoder anvendes til at detektere patogenet eller dets antigenmateriale:

1. Mikroskopi ifølge Ziehl-Nielsen. Efter misfarvning af materialet med svovlsyre farves farven med methylenblåt. Mycobacterium tuberculosis, når den bliver farvet, bliver crimson og skiller sig ud mod blåcellens baggrund. Dette skyldes Koch-sticks modstandsdygtighed over for syrer. For at forbedre nøjagtigheden af ​​bestemmelse anbefales det at samle urin med et kateter.
2. Fluorescerende mikroskopi - når farvet med auromin Koch sticks glød orangefarvet farve. Følsomhed er højere end når farvet af Ziehl-Nielsen.
3. Bakteriologisk undersøgelse - urinkultur på næringsmedium (bruges ofte blod eller kartoffel). En gang i gunstige forhold begynder stifterne at formere sig. Men det er en lang proces og kan tage fra 20 dage til 3 måneder. Det er muligt at bestemme resistens over for anti-tuberkulosemediciner.
4. Biologisk prøve - baseret på påvisning af mykobakterier i marsvinets væv efter subkutan injektion af den studerede urin. Denne undersøgelse tager tid: de humle er euthaniseret og dissekeret i omkring en måned, hvis det ikke er døde tidligere. Eller til en tidligere diagnose udsættes dyret for en tuberkulinprøve.
5. Polymerasekædereaktion - ved anvendelse af følsomme systemer registreres specifikke dele af Kochs DNA i urinen.

I nogle tilfælde udføres en provokerende test med en subkutan injektion af tuberkulin i en dosis på 20-100 TE eller ved bestråling af huden med en infrarød laser. I det første tilfælde udføres gentagne urintest efter 24 og 48 timer og sammenlignes med den første, i andet tilfælde - efter 10 dage. Positiv overveje resultatet, præget af en stigning i antallet af røde blodlegemer og hvide blodlegemer i urinen, sekretionen af ​​mykobakterier.

Metode effektivitet

Ved tuberkuløs nyreskade forekommer en ændring i total urinalyse hos ikke mere end 60% af patienterne. Påvisning af mykobakterier i bakterioskopi bekræfter diagnosen, men specificiteten af ​​denne metode overstiger ikke 80% (følsomhed, når den er farvet ifølge Ziehl-Nielsen, er mere end 100.000 mikrobielle celler i 1 ml og i det fluorescerende studie mere end 10.000 i 1 ml).

Mere følsom såning på miljøet, men for lang tid. PCR for tuberkulose vinder foran dem:

• resultatet opnås i 4-5 timer;
• høj følsomhed
• bestemmer mycobakteriernes DNA i urinen, selv med lungtubberkulose og fraværet af en bestemt proces i nyrerne;
• evne til at bestemme lægemiddelfølsomhed.

Kan tildele denne undersøgelse i stedet for Mantoux hos børn, hvis der er mistanke om ekstrapulmonal tuberkulose, der er en allergi mod tuberkulin, eller barnets krop producerer ikke antistoffer mod patogenet, hvis det er til stede i kroppen. Men der er en lille procentdel af både falsk-negative og falsk-positive resultater.

Sandsynligheden for et ukorrekt negativt resultat stiger hos patienter, som længe har behandlet sygdommene i urogenitalt område med antibiotika. Lægemidler som fluoroquinoloner og aminoglycosider hæmmer væksten af ​​Koch-pinde, men må ikke dræbe dem til enden. Selv hvis en metode viste et negativt resultat, forbliver diagnosen tuberkulose sandsynlig, så læger bruger et sæt tests og instrumentelle undersøgelser til verifikation.