PCR diagnose af tuberkulose hos børn og voksne: indikationer for

Hoste

Verdenssundhedsorganisationen anerkendte for 20 år siden, at udbredelsen af ​​tuberkulose var ude af kontrol og nåede omfanget af en epidemi. Siden da har situationen ikke forbedret sig. Mere end en million tilfælde af sygdommen diagnosticeres hvert år, hvoraf næsten en fjerdedel er dødelig. I løbet af det sidste årti er forekomsten blandt børn steget, de fleste former for sygdommen lænner ikke til standard antibiotikabehandling.

I dag er en af ​​de globale opgaver for medicin udviklingen af ​​sådanne diagnostiske metoder, som vil gøre det muligt at identificere patologi inden begyndelsen af ​​udprøvede kliniske symptomer. En af dem er polymerasekædereaktionen (PCR) til tuberkulose, som hjælper med at opdage Koch-sygdomsfremkaldende pinde i blod, sputum og andre biologiske væsker.

Diagnose af tuberkulose

Screeningstest er rettet mod at opdage patienter, bærere af tuberkulose og forebygge spredning af infektion i samfundet. For børn under 14 år er Mantoux testen massivt brugt. Dette er en immunologisk test, hvor en dosis tuberkulin injiceres subkutant - en kompleks blanding af det genetiske materiale af flere typer mycobakterier. Udseendet af en udtalt reaktion indikerer en aktivt forekommende infektiøs proces.

Til forebyggende undersøgelse hos voksne ved hjælp af fluorografi eller røntgenstråler. Disse metoder hjælper med at visualisere patologiske læsioner i lungevæv. Det forårsager imidlertid vanskeligheder med at differentiere tuberkulose fra en anden organisk patologi (maligne og godartede neoplasmer, inflammatoriske processer, parasitære invasioner, professionel lungeskader).

For at præcisere strukturen og størrelsen af ​​det patologiske fokus kan der være behov for yderligere instrumentelle undersøgelser:

  • målrettet radiografi;
  • computertomografi;
  • magnetisk resonans billeddannelse.

Metoder til diagnose af tuberkulose

I tilfælde af tvivlsomme resultater og til udnævnelsen af ​​passende terapi er der behov for mere nøjagtige diagnostiske metoder, som gør det muligt at isolere patogenet. Mikroskopisk og bakteriologisk undersøgelse af sputum bruges til at bekræfte lungerformer af tuberkulose i lang tid.

I de seneste år er forekomsten af ​​mycobacterium i forskellige organer og systemer - nyrerne, knoglerne, tarmene, huden - blevet hyppigere. For at identificere disse former for tuberkulose kan ultralydundersøgelser, urin og fæceskultur, endoskopiske undersøgelser anvendes.

PCR-diagnostik til tuberkulose hjælper med at bekræfte tilstedeværelsen af ​​Koch-pinde i blodet samt dens følsomhed overfor visse lægemidler. Dette er en meget effektiv metode baseret på påvisning af det bakterielle genetiske materiale i forskellige biologiske væsker.

Specificitet og indikationer

Polymerasekædereaktion er en yderst følsom mikrobiologisk diagnostisk metode, der er baseret på genteknologiske principper. For at bekræfte tilstedeværelsen af ​​et patogen i et biologisk materiale er det tilstrækkeligt at detektere et unikt nukleinsyrefragment for det. PCR for tuberkulose kan detektere bakterier i blodet, sputum, urin.

I øjeblikket udviklede flere analysemetoder. De mest populære blandt dem er følgende:

  • Real-time PCR;
  • mikrofluidisk teknologi;
  • sekventering og pyrosequencing.

Real-time PCR

Laboratorier bruger oftest realtids-polymerasekædereaktion, da det reducerer antallet af falsk-positive resultater, og analyseprocessen selv tager kort tid.

I betragtning af det store antal skjulte former for sygdommen og ineffektiviteten af ​​standarddiagnostiske metoder anvendes PCR i stigende grad. Formålet med denne analyse er vist på:

  • identificere mistænkelige områder på røntgenstrålen;
  • tvivlsomme resultater af tuberkulinprøve
  • umuligheden af ​​at foretage mikroskopisk og bakteriologisk analyse af sputum hos personer i alvorlig tilstand
  • udføre kirurgiske indgreb, når det er nødvendigt at hurtigt sikre, at der ikke er nogen infektion;
  • afvisning af brugen af ​​fluorografi, røntgenstråler eller computertomografi (fx ved gravide kvinder og amning i tilfælde af overskydende strålingseksponering)
  • mistanke om ekstrapulmonal tuberkulose (det anbefales at ikke kun blod, men også slim anvendes).

PCR-diagnostik af tuberkulose har vist sig i undersøgelsen af ​​børn på grund af manglende yderligere eksponering og hurtige resultater.

Forberedelses- og analyseprocedure

Særligt forberedelse til blod-PCR er ikke påkrævet. For at undgå komplikationer ved blodprøveudtagning og for at opnå materiale af høj kvalitet skal følgende generelle regler følges:

  • analyse skal tages om morgenen ikke tidligere end 2 timer efter at være vågnet
  • Det bør begrænse indtaget af fede og stegte fødevarer en dag før blodprøveudtagning;
  • Afstå fra at spise, te og kaffe i 8-9 timer, det er tilladt at drikke rent vand
  • Røg ikke i mindst 3-4 timer.

I tilfælde af permanent medicin (hormoner, antikoagulantia, antiinflammatoriske lægemidler, antibiotika, blodfortyndere), bør du underrette laboratorieassistenten om dette.

Ved levering af sputum bør du børste dine tænder godt og skylle munden flere gange. Saml materiale i en steril beholder. For bedre resultater kan der tages en slim eller mucolytisk middel om aftenen.

Diagnosen selv består af flere trin.

    Hegn materiale. Det kan udføres i laboratoriet og eksternt. Nogle typer af materiale patienten indsamler uafhængigt (urin, slim).

Destruktionen af ​​strukturen af ​​nukleinsyrer (denaturering af DNA og RNA molekyler). For at gøre dette opvarmes testmaterialet til en temperatur på 98 grader og holdes i flere minutter. Som følge heraf dannes den dobbelte helix, enkeltstrengede molekyler.

  • Joke. Efter tilsætning af en primer (en kort del af nukleinsyre), falder temperaturen med flere grader, polymerase aktiveres.
  • Elognatsiya. Temperaturen bringes til det optimale niveau, enzymaktiviteten når et maksimum, og den anden kæde er afsluttet i overensstemmelse med Chargaff-komplementaritetsreglen.
  • For at afslutte undersøgelsen er det nødvendigt at syntetisere det krævede antal DNA-molekyler - ca. 50 cyklusser af den ovennævnte reaktion. Det tager ca. 2-3 timer. Et positivt resultat af reaktionen indikerer ikke altid det aktive stadium af sygdommen, men er en indikator for tilstedeværelsen af ​​en mikroorganisme i kroppen.

    Fordele og ulemper ved fremgangsmåden

    I sammenligning med andre mikrobiologiske metoder tager PCR ikke lang tid at opdage Mycobacterium tuberculosis ved hjælp af PCR, resultatet kan opnås på testdagen.

    En anden fordel er analysens høje specificitet, som gør det muligt at påvise patogenens tilstedeværelse med en nøjagtighed på 90-95% i næsten ethvert biomateriale (blod, urin, afføring, cerebrospinalvæske, sputum, bronchusspyling).

    Der er imidlertid flere ulemper med metoden:

    • en temmelig høj procentdel falske positive resultater (op til 15%), der er forbundet med påvisning af ikke-levende mikroorganismer;
    • i nogle tilfælde kan du springe over sygdommens kendsgerning, da Mycobacterium tuberculosis ofte udsættes for mutationer, og dets genetiske materiale ændres;
    • lav effektivitet ved undersøgelse af personer med immundefekt
    • høje omkostninger ved forskning, behovet for dyrt udstyr og reagenser.

    Hvad kan erstattes?

    I betragtning af de forskellige former for tuberkuloseinfektion, for en mere præcis diagnose og valg af behandling er det nødvendigt at kombinere flere diagnostiske undersøgelser:

      Obligatorisk analyse for børn er Mantoux testen. Hvis indførelsen af ​​tuberkulin (genetisk materiale af mycobakterier) forekommer en udtalt reaktion, kan det antages infektion med en tuberkelbacillus.

    Røntgenmetoder kan bruges til at visualisere det patologiske fokus. Ved diagnosen ekstrapulmonal tuberkulose anvendes endoskopiske metoder med samtidig biopsi:

    • bronkoskopi hjælper med at identificere læsioner i strubehovedet, luftrøret, bronchi;
    • koloskopi - tarm;
    • cystourethroskopi - organer i urinsystemet
    • hysteroskopi - kvindelige kønsorganer. Disse metoder er ikke specifikke, for at foretage en nøjagtig diagnose bør patogenet identificeres.

    Generelle kliniske tests vil bidrage til mere specifikt at bestemme kroppens tilstand. En fuldstændig blodtælling med leukocytformel er påkrævet.

    En stigning i antallet af neutrofiler med reduceret lymfocytniveau og en stigning i erythrocytsedimenteringshastigheden (ESR) indikerer en aktiv inflammatorisk proces med bakteriel etiologi. At udelukke skade på organerne i urinsystemet ved hjælp af en generel urinalyse og kultur for sterilitet.

    PCR er i øjeblikket tilgængelig i de fleste private laboratorier. Dette kræver ikke kun højt kvalificerede specialister, men også dyrt udstyr, et stort antal reagenser. Derfor er brugen af ​​denne metode begrænset på trods af dens høje nøjagtighed og specificitet.

    PCR analyse for tuberkulose

    I tilfælde af formodet sygdom er det bedre at straks passere PCR-analysen for tuberkulose. I løbet af denne undersøgelse tages blod, som kontrolleres under et mikroskop. Polymerkædereaktion begyndte i stigende grad at erstatte Mantoux-testen for at detektere tuberkulose.

    Fordele ved fremgangsmåden

    Denne analyse efter nogle få timer bestemmer tilstedeværelsen af ​​patogenet. Desuden vil denne metode stadig være i stand til at identificere dem, hvis en lille mængde bakterier er til stede i kroppen.

    De vigtigste fordele ved PCR-testen er følgende positive punkter:

    1. Sygdommen opdages i 100% af tilfældene.
    2. Kontorets DNA-specificitet er høj.
    3. Analysen afslører kausionsmiddelet i 4-4,5 timer.
    4. Pulmonal tuberkulose er vellykket diagnosticeret, som andre metoder ikke kan klare.
    5. Evnen til at detektere et specifikt fragment, som er indeholdt i dette patogen.

    Polymerkædereaktionen gør det muligt ikke blot at identificere det forårsagende middel i tide og for at begynde behandlingen af ​​patienten, det tillader også tid til at isolere en person fra samfundet i tilfælde af infektion. Kochs snor - den forårsagende middel til tuberkulose - kan findes overalt i kroppen. Og kun PCR-analyse gør det muligt at identificere det på stedet.

    PCR-undersøgelsen giver også mulighed for at vælge et lægemiddel afhængigt af mikroorganismernes følsomhed.

    Sygdomsbeskrivelse

    I det nittende århundrede blev tuberkulose kaldt forbrug. Sygdommen er en infektion i de indre organer, hovedsagelig lungerne. Tuberkulose overføres gennem luftbåren nysen og hoste. Infektionsmålet kan være både menneske og dyr.

    Efter indtrængen af ​​tuberkulosebakterier i kroppen kan sygdommen vare i lang tid i latent form.

    Afhængig af graden af ​​eksponering af en sygdom for andre er der 2 former for sygdommen:

    1. Lukket form for tuberkulose. Det er ikke farligt, fordi Manden kan ikke inficere andre. Selv i analyser, inkl. og PCR, er mycobacterium sygdomme ikke detekteret. Men faren er stadig til stede i denne form, da Når som helst kan en lukket form gå ind i det åbne. En sådan aktiv form for tuberkulose kan være farlig ikke kun for patienten selv, men også for dem omkring ham.
    2. En åben form for infektion. Når det er i biologiske væsker af en person, opdages Kochs pind. En patient med tuberkulose på dette stadium bærer en særlig trussel mod dem omkring ham. Du kan blive smittet, selvom luftfartsselskabet omhyggeligt overvåger sig med hensyn til hygiejne.

    De mest almindelige forskningsmetoder, der bruges til at identificere sygdommen, omfatter:

    1. Fluorografi.
    2. Tomografi af brystet eller andre berørte områder.
    3. Radiografisk undersøgelse.
    4. Undersøgelsen af ​​patientens biologiske materialer.
    5. Tuberkulinprøve (Mantoux).

    De mest effektive måder at identificere Koch bacillus på er den molekylære genetiske analyse af polymerasekædereaktionen - PCR-diagnose af tuberkulose.

    Tuberkuloseundersøgelse

    Polymerasekædereaktion er den mest nøjagtige molekylærgenetiske analyse. Hvis infektion med en tuberkuloseinfektion har fundet sted, giver polymertest i undersøgelsen dig mulighed for nøjagtigt at identificere patogenens DNA eller RNA. For at gøre dette skal du donere blod eller anden biologisk væske.

    For at bestemme forekomsten af ​​tuberkulose er en minimal mængde bakterier nok, selv 1 celle vil gøre.

    Andre fordele ved PCR-diagnostik omfatter følgende:

    1. Ved udførelsen af ​​denne analyse anvendes et særligt enzym, hvoraf den nøjagtige forekomst af tuberkuloseinfektion er påvist.
    2. PCR-analyse er særligt følsom overfor mycobacterium infektioner, så diagnosticeringsnøjagtigheden svarer til næsten 100%.
    3. Allerede efter 3,5-5,5 timer efter testen er det muligt at kende resultaterne af analyserne.

    Med en sygdom som tuberkulose er det meget vigtigt at identificere patologien i sine tidlige stadier. Derfor er testen for polymerasekædereaktion den mest informative i dette tilfælde. Når bakterier begynder at angribe, skal de opdages så tidligt som muligt, indtil deres virkninger har påvirket de indre organers livsvigtige funktioner.

    PCR-analyse har en anden fordel i forhold til andre typer forskning: Teknikken bestemmer mikroorganismernes følsomhed over for et bestemt lægemiddel, hvilket gør det muligt for terapi at være mest effektiv.

    Forberedelse til PCR-test

    Hvis spyt giver ind, er forberedelse til dette påkrævet. 12 timer før proceduren skal du opgive rygning, alkohol, medicin og mad. Børste dine tænder, skylle munden med forskellige fresheners, og selv tandtråd er forbudt. Du kan heller ikke bruge læbestift og leve sexliv. Det er nødvendigt at skylle mundhulen med kogt vand.

    Ikke kun tuberkulose detekteres ved PCR-metoden. På samme måde kan der ikke påvises mindre alvorlige sygdomme som herpes, klamydia, mononukleose, lungebetændelse, barolleose, HIV, hepatitis, rubella.

    Blod er oftest taget fra en vene, men i nogle tilfælde kan der kræves helt andet biologisk materiale:

    1. Spyt.
    2. Urinanalyse
    3. Skrabning fra enhver del af kroppen.
    4. Seksuel sekretion.
    5. Cal.
    6. Spinalvæske.
    7. Phlegm fra bronkierne under udsivning.
    8. Analyse af slim.

    Men den mest informative metode til PCR er stadig en blodprøve for tuberkulose.

    Indsamling af biomateriale

    På trods af at proceduren for at identificere patogenet ved PCR-metoden kun tager 4-4,5 timer, er det blandt de sværeste typer af diagnoser. Mange faktorer kan påvirke resultaternes nøjagtighed. For eksempel er det nødvendigt at indsamle prøver til forskning ved visse regler. Den vigtigste er øget sterilitet i samlingen af ​​biologisk materiale. Derfor er denne analyse vanskelig at udføre et lille barn.

    Hvis en prøve tages som blod fra en vene, udfører en specialist en blodprøve til PCR for tuberkulose, ikke kun med en steril sprøjte, men ifølge alle regler for generel hygiejne.

    Blodet opsamles i et specielt rør og i hele undersøgelsen opbevares under sådanne forhold, der forhindrer dets koagulering.

    Hvis dette er en PCR-analyse af urin til tuberkulose, samles væsken tidligt om morgenen, når personen er bare vågen. Inden toilettet tager patienten et bad og derefter tager en steril beholder til at samle urinen.

    I tilfælde af skrabning fra kønsorganerne, både kvinder og mænd, udføres hele proceduren i en lægeinstitution.

    Der er mere komplekse tests, såsom at tage væske fra rygmarven. I dette tilfælde udføres alle handlinger på hospitalet af erfarne læger.

    Ofte tildeles passagen af ​​analysen af ​​polymerkædereaktionen i sådanne tilfælde:

    1. At diagnosticere en sygdom i lungevæv.
    2. At identificere kilden til sygdommen.
    3. At identificere sygdommen uden for lungerne.
    4. For at diagnosticere sygdommens gentagelse.

    Sekvensen af ​​testen

    Diagnose af tuberkulose hos børn og voksne ved hjælp af en polymerkædereaktion går gennem følgende trin:

    1. I visse situationer er der taget forskellige materialer til forskning. Dette kan være blod, sputum eller bronkial vask.
    2. Derefter udsættes det biologiske materiale for høje temperaturer (op til + 97 ° C) i en vis tid (oftest er det flere minutter). Som følge heraf ødelægges den oprindelige struktur af mikroorganismens DNA, som består af 2 kæder.
    3. Efter dette begynder temperaturen at falde, denne handling kaldes glødning. På dette tidspunkt forbinder primeren med 1 af de afbrudte kredsløb.
    4. Ved udgangen af ​​forlængelsen udføres. Under det sker den nødvendige biologiske syntese af eksisterende molekyler.

    Det vil tage 25-30 cyklusser at få det krævede antal kopier af DNA på Mycobacterium tuberculosis.

    Proceduren kræver dyrt udstyr, så ikke alle medicinske institutioner har mulighed for at gennemføre en PCR-test for tuberkulose i stedet for Mantoux.

    Takket være vaccinationer og PCR-undersøgelser (i stedet for Mantoux) er det muligt at forhindre udviklingen af ​​en sådan farlig sygdom som tuberkulose. Nu behøver du ikke vente på sygdommens indtræden eller tage billeder på røntgenmaskinen. Hvis der er mistanke om infektion, for at fjerne de forfærdelige konsekvenser af sygdommen, kan du altid lave en PCR-test, som bestemmer kroppens tilstand med maksimal nøjagtighed. I realtidsbetingelser falder sådanne diagnostiske former som Mantoux-testen og fluorografien gradvist i baggrunden sammenlignet med PCR-metoden.

    Metoder til test af sputum for tuberkulose

    Sputumanalyse for tuberkulose indgår i det sæt diagnostiske foranstaltninger, der er nødvendige for at identificere og afklare diagnosen. Sputumindhold hjælper med at gøre et kompetent behandlingsregime.

    Hvordan bestå en sputum test for tuberkulose

    Læger har udviklet regler for at tage analysen. Spyt opsamles om morgenen, før personen har spist morgenmad. For det første udfører patienten hygiejneprocedurer:

    • tandemaljen rengøring;
    • grundig skylning med rent vand i mundhulen og svælget.

    Så begynder den øjeblikkelige levering af materiale til analyse. Hvordan bestå en sputum test? Krav til proceduren:

    1. Forberedelsen begynder på forhånd om aftenen. Patienten opfordres til at tage specielle lægemidler, der vil gøre lungsekretionen mere naturlig. Disse er ekspektorative og tyndere forbindelser. Hvis sådanne procedurer ikke hjælper, udføres indånding med en farmaceutisk sammensætning til ekspektorering.
    2. Forbered beholdere til sputum. Slim opsamles i steriliserede retter, lukker tæt, tæt.
    3. Før levering, hoste op og spytte i en beholder. Mængden af ​​spyt bør ikke være stor, det kræver sputum fra strubehovedet. Bakterier i mundhulen er udenfor i analysen.
    4. Saml spyt i et rum med fremragende ventilation. Analysen udføres ved at åbne transom, kører hætten. Det anbefales at åbne vinduerne eller gå ud i frisk luft.

    Under proceduren i rummet er det forbudt at komme ind. Udenstående kan bidrage til kontorets mikroflora og dermed til sputumet, patologiske formationer. Læger får analyse i en speciel maske (åndedrætsværn).

    Sputumanalyse for tuberkuloseudskrift

    Afkodning begynder med at se på udseendet af slim. Patologi karakteriserer ændringen i farve - det bliver mørkt, med synlige blodblandinger. Farve er ikke hovedindikatoren. Sputum bliver mørkt fra at drikke rødvin, kaffe passion. Nogle stoffer og farvede drikkevarer ændrer udseendet af slim.

    Det indsamlede materiale er dechifreret af to indikatorer, det vil sige, læger får to resultater:

    Positivt svar

    Analyse af det resulterende sputum bekræfter tilstedeværelsen af ​​sygdommen i kroppen. Hvilket bekræfter dette:

    • fremmedlegemer eller ukendte indeslutninger;
    • tilstedeværelsen af ​​slimklumper
    • synlige striber
    • ubehagelig purulent eller smitsom lugt;
    • pus.

    Makroskopisk forskningsmetode giver andre data:

    • fibrinøse svingninger;
    • Koch linseformationer
    • produkter fra nedbrydning af bakterielle stoffer;
    • rester af den patologiske proces i lungevæv.

    Et positivt resultat afslører en øget mængde proteinforbindelser. Det når 100-120g / l.

    En anden mikroskopisk metode gør det muligt at identificere andre farlige elementer:

    • alveolære makrofager;
    • overvurderet sammensætning af leukocytter
    • høj grad af lymfocytter.

    For tuberkulose forsøger en person ofte at spytte ud af munden. Hemoptysis øger dannelsen af ​​røde blodlegemer. Mængden af ​​spyt i munden er sådan, at en person ikke kan sluge det uden at bemærke. Dens mere end i en sund tilstand.

    Negativt svar

    Undersøgelsen viser, at antallet af leukocytter er lille, svarer til normen. Mikrobakterier opdages heller ikke. Hvis patienten ikke føler sig sund, vil specialisten ordinere en yderligere undersøgelse. Det er muligt, at sygdommen er forbundet med lungesygdom. Typer og metoder til yderligere diagnostik afhænger af patientens symptomer og tilstand.

    Hvordan er undersøgelsen af ​​slim

    Tuberkulose er en farlig patologisk virkning på lungevæv, deres opløsning observeres. Analysen udføres ved flere metoder. Den mest almindelige - ELISA (immunoassay). Essensen af ​​metoden:

    1. Antistoffer tilsættes til opløsningen, i hvilken del af sputumet placeres.
    2. Kontroller koncentrationen af ​​antigener, sammenlignet med normen for en sund krop.
    3. Bestem aktiviteten af ​​det patologiske miljø.
    4. Diagnosticeret.

    Den anden version af laboratorieundersøgelsen er affald. Til metoden tager specielt medicinsk udstyr. Essensen af ​​hardware forskning:

    1. I sputum injiceret mikro miljø for den tilsigtede type infektion.
    2. Apparatet begynder at vokse ved en bestemt temperaturstamme af bakterier.
    3. Kuldioxid produceres i processen, og sensorer henter det op.
    4. Gassen kombineres med farvestoffet.
    5. På fluorescensindekset får man konklusioner om typen af ​​sygdom.

    Den nemmeste måde er kulturel. Phlegm sået i et særligt miljø. Lægen undersøger typer af kolonier af mikrobielle formationer. Metoden er den længste, men giver dig mulighed for at bevise diagnosen. Det bruges meget sjældent, netop på grund af lang tid, hvilket ikke altid er passende for patienten.

    Analyse af sputum PCR til tuberkulose

    PCR er en forkortelse af den medicinske terminologi polymerasekædereaktion. Diagnostik er en af ​​de seneste udviklinger af forskere. Det blev åbnet i 1983, hvor vigtigheden af ​​opdagelsen er værdsat i verden, fik forskeren den højeste anerkendelse - Nobelprisen.

    Metoden er baseret på brug af genteknologi. Dens alsidighed i behovet for en lille mængde materiale til en præcis diagnose. Identificere infektion med tuberkulose er virkelig i de tidlige infektionsdage uden at vente på udviklingen af ​​sygdommen.

    Essensen af ​​metoden, der er polymerase:

    • en patient tager et fragment af DNA-partikler;
    • udføre biologisk syntese af materialet
    • bestemt af klassen af ​​mikroorganismer.

    Processen er teknisk kompleks, det involverer molekylærgenetisk undersøgelse. PCR for tuberkulose tager bogstaveligt talt et par timer. Den tid, der kræves for andre metoder, kan ikke sammenlignes med ham i hastighed. Efter at have passeret analysen venter patienten på detektionsmiddelets påvisning. Processen, der ligger til grund for en specialist, kan forstå. En almindelig person forstår ikke indviklingen i metoden.

    Hvordan er diagnosen af ​​tuberkulose test:

    1. Tag det nødvendige materiale til analyse. Hvad kunne det være: blod, mave, sputum, vand, vasket med bronkier.
    2. Materialetypen er valgt afhængigt af typen af ​​patogen mulig infektion.
    3. Det næste skridt er at studere kædeforbindelsen. To kæder udsættes for høje temperaturer op til 98 grader. Stadiet hedder denaturering (destruktion af strukturelle DNA-kæden). Temperatur eksponeringstid - op til 2 minutter.
    4. Næste fase er annealing. Temperaturen er reduceret, primeren får lov til at forbinde til DNA-strengen.
    5. Som følge heraf opstår forlængelse - syntesen af ​​molekyler, der er nødvendige for processen.

    Til en sådan analyse kræves der særligt udstyr. Det er dyrt, så det er ikke tilgængeligt på nogen sundhedsanlæg. PCR udføres i vanskelige tilfælde, når der ikke er noget eksakt resultat af konventionelle diagnostiske metoder, er det umuligt at udføre instrumentelle metoder til kontrol af patientens tilstand.

    Fordelene ved PCR-teknologi:

    1. Hastigheden for at få resultatet. Ca. 5 timer har en læge nøjagtige data. Denne hastighed giver dig mulighed for at hjælpe patienten i en nødsituation. Oftere er det den præoperative periode.
    2. Tilladt, når andre metoder ikke kan bruges. For eksempel fører den hyppige gentagelse af røntgenstråler til stråling. PCR er ikke farlig for patienten.
    3. Du kan undersøge ethvert biologisk miljø. Selv komplekse former for tuberkulose er identificeret.
    4. Metoden er derfor sikker til børn.
    5. Infektion opdages på ethvert tidspunkt.
    6. PCR tillader ikke at skjule selv et lille antal bakterielle mikroformationer.
    7. Velegnet til kontrol af mulig gentagelse af tuberkulose.

    Hvor meget sputumanalyse for tuberkulose

    Prøver tages mere end én gang. Gentagelser udelukker muligheden for fejl eller opnåelse af materiale af ringe kvalitet, der ikke afspejler patientens sande stilling og tilstand. Hvor mange gange at samle sputum, fortælle den behandlende læge. Den bedste mulighed er tre gange om dagen. Nogle gange kan der kræves yderligere prøver. Under hvilke tidspunkter samler de:

    1. Før du spiser om morgenen.
    2. 3-4 timer efter den første test.
    3. På den anden dag, også før måltider.

    Tuberkulose er en farlig sygdom, som kan påvirke en persons legeme. Der er mange infektionssituationer. Med nogen mistanke om muligheden for infektion, vent ikke på lyse symptomer. Det bør testes, undersøges og i tide for at påbegynde behandlingen.

    PCR diagnose af tuberkulose

    Tuberkulose er en specifik infektion, dets fokus kan være i humane væv i årevis og spredes derefter i flere måneder. Dette er en kronisk sygdom, hvis optimale behandlingsregimer er vanskelige at vælge. En af grundene til dette er den sene diagnose, når mykobakterier, mens de er i menneskekroppen, allerede har tilpasset sig mange stoffer.

    Hvilke moderne diagnosemetoder eksisterer? PCR diagnostik - hvad er det? Hvordan foregår denne forskning? I hvilke tilfælde er tuberkulose diagnosticeret af denne metode og hvad er dens essens?

    Hvad er PCR-diagnostik

    Dette er en af ​​de mest moderne metoder til diagnosticering af ikke kun sygdomme, men også påvisning af biologisk materiale. PCR-diagnostik blev opfundet relativt nylig. For cirka 30 år siden i 1983 foreslog en amerikansk biokemi, Carey Banks Mullis, et komplekst opsvingskema for det biologiske materiale af mikroorganismer i et kort segment. Takket være sin opdagelse blev forskeren tildelt den højeste pris - Nobelprisen.

    Hvad er det - PCR diagnose af infektioner? Polymerasekædereaktion (PCR) er en diagnose af påvisning af virussygdomme, baseret på genteknologiske metoder. Det er meget udbredt inden for medicinsk mikrobiologi, immunologi og virologi. Metoden er universel og hjælper med at lave en diagnose med en lille mængde materiale. En infektion kan registreres bogstaveligt i de første timer med infektion med det, længe før de første symptomer på sygdommen optræder.

    Metoden består i at opnå fra materialet fra en syg person, ikke selve patogenet, men fragmenter af genomet (DNA-partikler), dets biosyntese med efterfølgende bestemmelse til hvilken klasse af mikroorganismer det opnåede genetiske materiale tilhører ved hjælp af molekylære genetiske metoder.

    På trods af at dette er en kompleks proces, tager det meget mindre tid end mange biologiske metoder til at detektere smitsomme stoffer. Inden for få timer kan en mikroorganisme detekteres ved hjælp af PCR. For at gøre dette er der ingen grund til at isolere det fra miljøet (blod, cerebrospinalvæske, sputum) og vokse det i lang tid på kunstige næringsmedier. Det er nok, at et lille fragment af DNA-strengen af ​​det infektiøse middel er til stede i det undersøgte materiale.

    Reaktionsgrundlaget er muligheden under kunstige betingelser (in vitro) til at skabe syntese af nukleinsyremolekyler af det infektiøse middel.

    Hvad er der brug for PCR?

    1. Primers er de DNA-segmenter, hvorfra biosyntese eller skabelse begynder.
    2. Nukleotider eller komplekse forbindelser, der er grundlaget for et DNA eller RNA molekyle.
    3. Polymerasekædereaktion er umulig uden tilstedeværelse af polymerase, hvilket er et enzym, der accelererer PCR.

    Trin af PCR-diagnostik

    Hvordan udføres molekylær diagnose med PCR? Proceduren er enkel og tager kort tid under hensyntagen til indsamling af materiale.

    1. Inden studiet påbegyndes, tager de det nødvendige biologiske materiale - det her er det bronkiske vaskevand, blod, maveindhold, sputum. Den type biologisk materiale afhænger af det formodede patogen.
    2. Denaturering eller ødelæggelse af den primære struktur af DNA, som består af to kæder. Kernen i denne fase er at adskille de to kæder under påvirkning af høj temperatur (maksimum er 98 ºC, som ikke varer mere end to minutter).
    3. Ved næste fase af PCR, kaldet annealing, reduceres temperaturen med flere grader, således at primeren vil binde til DNA-strengen.
    4. Forlængelse, hvor syntesen af ​​de ønskede molekyler finder sted direkte.

    Som følge heraf modtager kun 25-30 sådanne cyklusser det nødvendige antal kopier af mikroorganismer DNA, som er lette at genkende.

    Kræver PCR diagnose af tuberkulose?

    Det er ikke muligt for absolut alle mennesker med mistænkt tuberkulose at udføre PCR, da metoden kræver dyrt udstyr. Ikke alle offentlige klinikker har råd til at købe det. Derudover er det sket, at de sædvanlige metoder til diagnosticering af en infektion i de fleste tilfælde også retfærdiggør sig selv.

    Disse omfatter:

    • patientundersøgelse, historieoptagelse;
    • fuld undersøgelse af personen
    • en undersøgelse ved hjælp af Mantoux tuberculin testen;
    • radiografi eller fluorografi;
    • computerdiagnostik om nødvendigt;
    • mikrobiologiske forskningsmetoder: smear mikroskopi og sputum bakteriologisk undersøgelse.

    PCR til tuberkulose udføres i særlige tilfælde, når det er svært at foretage en diagnose, eller det er ikke muligt at udføre andre instrumentelle metoder.

    På trods af overflod af diagnostiske metoder fortsætter forekomsten af ​​tuberkulose at vokse. I øjeblikket er der ikke kun vækst, men også andre funktioner:

    • sygdommen opstår ofte i svær form;
    • Antallet af dødelige tilfælde øges;
    • mere modstandsdygtig over for moderne kemoterapi er diagnosticerede former for sygdommen.

    Folks tilbageholdenhed med at gennemgå rutinemæssige medicinske undersøgelser årligt fører afvisningen af ​​vaccination til spredning af tuberkulose. Under sådanne forhold har vi brug for hurtige, informative og effektive forskningsmetoder, som bør være tilgængelige for børn og voksne. Alle ovennævnte diagnostiske metoder er meget ringere end PCR.

    Fordele ved diagnosticering af tuberkulose med PCR

    Denne forskning, men ny, har vist sig godt, især i kontroversielle tilfælde, hvor det er umuligt at foretage en diagnose af en række årsager.

    Takket være PCR er det meget lettere at opdage det forårsagende middel af tuberkulose i testmaterialet.

    Fordelene ved PCR-diagnostik er som følger.

    1. Dette er en hurtig analyse. Et lille fragment af DNA-molekylet kan bruges til at diagnosticere om få timer (ca. fem), som med succes anvendes i nødsituationer, når for eksempel før en operation er det nødvendigt at afgøre, om en person er syg med tuberkulose.
    2. PCR-analyse er tilladt i tilfælde af, at andre metoder ikke er tilgængelige eller forbudt (til påvisning af lungetuberkulose, nogle gange må du tage flere radiografiske billeder, hvilket vil være en stor dosis stråling).
    3. Ved hjælp af PCR undersøges ethvert biologisk miljø for tilstedeværelsen af ​​et patogen i det. For eksempel kan du gennemføre en undersøgelse af cerebrospinalvæske, hvis der er en mistanke om tuberkuløs meningitis.
    4. Tilladt PCR-diagnose af smitsomme sygdomme hos børn, fordi metoden er sikker.
    5. Tillader dig at identificere patogenet på ethvert stadium af sygdommen.
    6. PCR's høje følsomhed gør det muligt at opdage Mycobacterium tuberculosis, selvom der kun er få mikroorganismer i det biologiske materiale.
    7. Det er godt at udføre for diagnosticering af sygdomsfornyelse.

    Efter alt det læsede PCR virker næsten perfekt diagnostisk metode, som skal gøre alle mistænkt for tuberkulose. Men der er også ulemper her, de skal tages i betragtning.

    Ulemper ved PCR ved diagnosen tuberkulose

    I vores tid er sådan diagnostik mere sjælden end regelmæssighed. Og for dette er der grund.

    1. Dette er en dyr forskningsmetode. På mange klinikker er udstyr til PCR fraværende på grund af dets høje omkostninger, men analysen kan stadig gøres i betalte laboratorier.
    2. Umiddelbart efter behandling kan døde mykobakterier eller lever i små mængder stadig være til stede i kroppen (resultatet vil være positivt under PCR-diagnostik), så metoden vil være upålidelig på nuværende tidspunkt, det giver ingen mening at udføre det.
    3. Mutationer af mykobakterier resulterer i ineffektiv PCR - en normal DNA-streng-sekvens kan ikke syntetiseres.
    4. Det er nødvendigt at vælge det rigtige miljø for undersøgelsen. Blod er kun taget, hvis det mistænkes for at blive inficeret (sepsis). Der er ikke behov for at tage sputum, hvis der er et spørgsmål om tuberkulose i nervesystemets organer. I dette tilfælde vil PCR ikke være i stand til at detektere patogenet, og diagnosen vil være uninformativ.

    Indikationer for at detektere tuberkulose ved hjælp af PCR-analyse

    PCR-diagnose af tuberkulose udføres oftest i kontroversielle tilfælde. Hvornår refererer læger denne undersøgelse?

    1. Hvis det er svært at foretage en diagnose ved hjælp af de sædvanlige tilgængelige metoder, men der var kontakt med en patient med tuberkulose.
    2. I det tilfælde, hvor en person ikke kan leveres til en klinik for at gennemføre rutinemæssige rutinemæssige test for tuberkulose, er det lettere at undersøge ham ved anvendelse af PCR, da sputum til testen kan leveres i en krukke, og diagnosen er bekræftet inden for få timer.
    3. Hvis en person skal have en nødoperation, og det er presserende at finde ud af om han er syg med tuberkulose.
    4. Om nødvendigt er en gravid kvinde også bedre at undersøge for tuberkulose ved anvendelse af PCR, da metoden er sikker.
    5. På en betalt basis er enhver, der ikke er blevet diagnosticeret med tuberkulose, blevet bekræftet ved hjælp af bakteriologiske metoder og fluoroskopi. Dette sker, når læsionen i lungerne er umærkelig i det direkte billede, og personen under levering af sputum til undersøgelsen kunne ikke følge anbefalingerne for korrekt samling af materiale. I dette tilfælde er personen bekymret for alle symptomer, der er karakteristiske for lungetuberkulose.
    6. Når der er tvivl om resultaterne af Mantoux-testen.
    7. Det er bedre at gøre PCR-diagnose af tuberkulose hos børn. Fremgangsmåden er sikker, skaber ikke yderligere strålingseksponering og er effektiv til at detektere vanskeligt at diagnosticere sygdomsformer.

    Tidlig diagnose af tuberkulose er nøglen til ordentligt ordineret behandling og nedsættelse af sygdommens spredning. Ofte er velkendte sygdomsdetekteringsmetoder ikke altid effektive. Derfor er PCR i dag en af ​​de mest pålidelige og sikre måder at påvise infektion i de tidlige stadier af dens udvikling.

    PCR-analyse

    PCR (polymerasekædereaktion) er langt den hurtigste og mest pålidelige metode til diagnosticering af infektionssygdomme.

    Princippet om polymerasekædereaktionsmetoden blev udviklet af Kary Mullis i 1983. Til sin opdagelse modtog K. Mullis i 1993 Nobelprisen i kemi.

    PCR-metoden gør det muligt at opnå en signifikant stigning i små koncentrationer af visse nukleinsyrefragmenter (DNA) i det biologiske materiale (prøve). Metoden er baseret på multipel selektiv kopiering (amplifikation) af en bestemt sektion af DNA ved anvendelse af enzymer under kunstige betingelser.

    Fordelene ved PCR-diagnostikmetoden som en diagnostisk metode til infektionssygdomme

    Direkte påvisning af patogener

    Mange traditionelle diagnostiske metoder, såsom enzymimmunoassay, detekterer proteinmarkører, der er produkter af vital aktivitet af smitsomme stoffer, hvilket kun giver indirekte tegn på forekomsten af ​​infektion. Identifikation af et specifikt DNA-område af et patogen ved PCR-metoden giver en direkte indikation af tilstedeværelsen af ​​patogenet.

    Høj specificitet

    Den høje specificitet af PCR-metoden skyldes det faktum, at et unikt DNA-fragment er påvist i det undersøgte materiale. Specificiteten bestemmes af primers nukleotidsekvens, som udelukker muligheden for at opnå falske resultater i modsætning til immunologiske analysemetoder, hvor fejl i forbindelse med krydsreagerende antigener er hyppige.

    Høj følsomhed

    PCR-metoden gør det muligt at opdage enslige celler af bakterier eller vira. PCR-analyse afslører tilstedeværelsen af ​​patogener af infektionssygdomme i tilfælde, hvor andre metoder (immunologiske, bakteriologiske, mikroskopiske) ikke kan gøre dette. Sensibiliteten af ​​PCR-analysen er 10-100 celler pr. Prøve (følsomheden af ​​immunologiske og mikroskopiske test er 103-105 celler).

    Universalitet af proceduren for påvisning af forskellige patogener

    Materialet til undersøgelsen ved PCR er patogenens DNA. Metoden er baseret på påvisning af et DNA-fragment eller RNA, som er specifikt for en bestemt organisme. Ligheden af ​​den kemiske sammensætning af alle nukleinsyrer muliggør anvendelse af ensartede metoder til laboratorieforskning. Dette gør det muligt at diagnosticere flere patogener fra et enkelt bioassay.

    Høj analysehastighed

    Til PCR-analyse er isolering og dyrkning af patogenens kultur ikke nødvendig, hvilket kræver meget tid. Den samlede metode til behandling af biomaterialet og påvisning af reaktionsprodukter og automatisering af amplifikationsprocessen gør det muligt at gennemføre en komplet analyse i 4-5 timer.

    Evnen til at diagnosticere ikke kun akutte men også latente infektioner

    PCR-metoden er særlig effektiv til diagnosticering af vanskelige at dyrke, uudviklede og vedvarende former for mikroorganismer, som ofte opstår i latente og kroniske infektioner, da denne metode undgår de vanskeligheder, der er forbundet med at dyrke sådanne mikroorganismer i laboratoriet. Anvendelsen af ​​PCR-diagnostik er også meget effektiv mod patogener med høj antigenvariation og intracellulære parasitter.

    Hvor effektiv er sputumprøve for tuberkulose ved hjælp af PCR?

    For at identificere Koch-pinde hos mennesker anvendes forskellige diagnostiske metoder. Takket være ham kan patologien detekteres selv i begyndelsen, hvilket øger patientens chancer for genopretning. Sputumanalyse for tuberkulose er en teknik, der er mest værdsat og er ret effektiv. Hvad er det, og hvor meget koster en sådan analyse?

    Hvad er analysen af ​​sputum med PCR?

    PCR står for polymerasekædereaktion. Denne metode er effektiv mod infektionssygdomme. For at etablere en klar diagnose behøver du ikke at samle en stor mængde biomateriale og vente længe, ​​som i tilfælde af sputumsåning.

    Fremgangsmåden er baseret på opnåelse af DNA af mikroorganismepartikler. Endvidere vil molekylærgenetisk forskning bestemme, hvilken type mikroorganismer der skal indeholde det tilgængelige materiale. Under testrørsforhold syntetiserer en specialist bakteriemolekyler og træffer de relevante konklusioner om nogle få timer.

    effektivitet

    Sputumanalyse for Mycobacterium tuberculosis er effektiv, når Kochs snor har ramt åndedrætssystemet. I dette tilfælde kan sygdommen let identificeres, selv i de første timer med infektion.

    Men sputumanalyse vil ikke vise et pålideligt resultat, hvis tuberkulose er til stede:

    • knogler;
    • hjerne, rygmarv
    • nervesystem
    • ledd osv.

    Fysiater vil kunne bestemme sygdommens art under hensyntagen til de nuværende symptomer og basere sig på resultaterne af generelle og andre analyser.

    Det er også uhensigtsmæssigt for en sådan metode til forskning i tilfælde, hvor du skal foretage en kontrolanalyse efter terapeutisk behandling af sygdommen. Resultatet vil være positivt, som i kroppen, under alle omstændigheder er der stadig levende eller død IBC. Det er bedre at give præference til en anden diagnostisk procedure.

    Kontraindikationer til metoden

    Som sådan er der ingen kontraindikationer for sputumprøvning for tuberkulose under anvendelse af PCR. Der er begrænsninger. Som nævnt ovenfor er der ikke behov for at gennemføre det efter behandling af tuberkulose. Resultaterne vil ikke være nyttige. Her er det ønskeligt at ty til en anden diagnose.

    Derudover er der ingen andre hindringer for denne diagnose. Sputum kan undersøges i enhver aldersgruppe og for eventuelle tilknyttede sygdomme. Selv om der ikke er rigelig frigivelse af sputum, kan analysen udføres ved at tage slim ved brug af bronkoskopi.

    fordele

    I denne metode omfatter massen af ​​plusser disse:

    1. Høj specificitet og følsomhed. Kun den forårsagende middel til tuberkulose detekteres. Der kan ikke være noget falsk svar, hvis alle nyheder i proceduren tages i betragtning. Mykobakterier opdages selv når deres mindste antal. Selv hvis der er 10 unormale celler i det indsamlede materiale, vil infektionen blive detekteret.
    2. Hastigheden for at få et svar. Hvor meget analyse er gjort? Efter 3-5 timer kan du få resultatet. Der er ikke behov for at lave sputumkultur for tuberkulose, og det reducerer tiden.
    3. Du kan identificere som en skjult infektion, og den der er i akut form.
    4. Der er ingen absolutte kontraindikationer. Dette gør det muligt at gennemføre proceduren for alle uden undtagelse (selv for små børn), og især når andre metoder ikke er løst.
    5. Ved hjælp af PCR-diagnostik studeres forskellige biomaterialer (urin, afføring, blod, spyt, cerebrospinalvæske osv.).
    6. Metoden afslører tuberkulose i de tidlige stadier, i de første timer efter infektion.
    til indhold ↑

    mangler

    Udover de positive sider er der også negative. Dette er:

    1. PCR-analyse er en dyr "fornøjelse". Desuden er det udstyr, der er nødvendigt for dets gennemførelse, ikke tilgængeligt i alle lægecentre. I klinikker er det sjældent til stede, da dets værdi også er stor. Hvis vi taler om private klinikker, så ja, du kan finde denne slags diagnose. Tillad selv, desværre kan ikke alle.
    2. Det viser et falsk positivt resultat hos de mennesker, der for nylig har gennemgået en behandling med tuberkulose.
    3. Hvis MBC er muteret, kan metoden også give falske resultater.
    4. Hvis materialet opsamles forkert, eller den specialist, der udfører undersøgelsen, har utilstrækkeligt kvalifikationsniveau, så er en fejl også mulig. I nogle tilfælde skal proceduren gentages flere gange, og hver gang betalingen gentages.
    til indhold ↑

    Forberedelse til analyse

    For at materialet skal være af høj kvalitet, skal det samles korrekt og være forberedt på det korrekt.

    Der er visse regler for indsamling af sputum til tuberkulose. Handlingsalgoritmen er som følger:

    1. Selv om aftenen, om aftenen har en person brug for at drikke en ekspektorant (hvis sputum flytter væk dårligt). Selv om det ikke hjalp, skal indånding udføres på grundlag af et lægemiddelfortyndende og sprængstof. I fravær af sputum er patienten målrettet mod bronchoskopi. Det er under denne procedure, at materialet til undersøgelsen er taget.
    2. Køb en speciel container på forhånd. Det er sterilt og lufttæt, så intet ekstra kan placeres der, såvel som åbnet på forhånd.
    3. Værelset, hvor sputumet skal opsamles, skal være godt ventileret. Det er nødvendigt at åbne vinduer, døre, tænde hooden. En anden god mulighed er at få frisk luft (for eksempel til balkonen eller til gården).
    4. Umiddelbart før proceduren skal du advare alle, så ingen kommer ind i lokalet, hvor alting vil ske. Der bør ikke være ekstra mikropartikler i biomaterialet - dette er vigtigt.
    5. Spise før du vælger, anbefales ikke.
    6. Mund og hals skylles.
    7. Spyt er spyttet ud. Dens kapacitet bør falde minimum.
    8. Ved hoste tager en person slimmen ud og spytter den i en forberedt beholder. Efter proceduren lukkes låget tæt og tager prøven til laboratoriet.

    Hvordan man samler sputum skal fortælle lægen. Hvis patienten ikke tør at gøre det alene, så kommer sundhedsarbejdere til undsætning. Under manipulationen lægger de på en speciel beskyttelsesmaske. Samle sputum vil være i et specielt rum, hvor der ikke er nogen måde for fremmede. Hvis patienten ikke kan komme til klinikken, kommer specialisten til sit hus og hjælper med at indsamle slim.

    Hvis bronchoskopi er udført, injiceres patienten i luftrøret med en enhed - et bronchoskop. Det er med hans hjælp at materialet er taget.

    For pålidelighed er det tilrådeligt at bestå analysen tre gange, nemlig:

    • om morgenen på tom mave
    • efter første gang efter 4-5 timer;
    • 24 timer efter den første undersøgelse og også før måltider.
    til indhold ↑

    Hvordan er denne analyse gjort?

    At passere en sputumtest for tuberkulose er kun en del af jobbet. Hoved foran. Meget afhænger af, hvordan man forberedte en specialist.

    Studiens forløb er som følger:

    1. Specialisten fortsætter med ødelæggelsen af ​​den primære struktur af DNA (denaturering). Der er to kæder her. Ved høje temperaturer adskilles de.
    2. Ved næste trin reduceres temperaturen (annealed). Dette er nødvendigt for forbindelsen af ​​DNA-strengen med primeren.
    3. Den tredje fase er forlængelse. Her syntetiseres de nødvendige molekyler.
    til indhold ↑

    Afkodningsresultater

    Mycobacterium tuberculosis i sputum ved PCR kan detekteres eller ej. Et positivt resultat er baseret på det faktum, at Koch stikker DNA i biomaterialet. Dette tyder på, at personen er smittet. Med en negativ - 98% af det faktum, at emnet ikke er inficeret.

    Indikatorer kan bedømmes på:

    • hvilken fase af patologi (latent eller aktiv);
    • hvor meget kroppen påvirkes
    • om den valgte behandling er effektiv i en bestemt sag.

    Husk at intet er grundigt. Derfor kan der være et falsk-positivt eller falsk-negativt resultat. For at sikre dets rigtighed anbefales andre diagnostiske procedurer, eller PCR udføres to gange (tre gange).

    Omkostningsanalyse i forskellige centre

    Du kan give sputum til PCR i forskellige klinikker. Lad os give eksempler på flere populære Moskva-centre med prispolitik.

    PCR-sputumanalyse for tuberkulose

    Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis), DNA (PCR), høj kvalitet, sputum

    Særlig studie forberedelse er ikke påkrævet.

    Testmateriale: Sputum

    Tuberkulose (fra latin tuberculum - "tubercle") er en specifik infektionssygdom hos mennesker og dyr, som hovedsageligt overføres af luftbårne dråber. Risikoen for infektion stiger på grund af et fald i immunitet forårsaget af hiv / aids, kronisk nyresygdom, diabetes, graviditet, aldring, organtransplantation og de tilhørende immunundertrykkende stoffer. Hertil kommer, at børn under 5 år efter tuberkulinprøven vendes, og de, der har kontakt med patienter med tuberkulose, er mere modtagelige for sygdommen. De mest udsatte grupper omfatter de hjemløse, fanger, narkomaner og ældre.

    Tuberkulose hos mennesker og dyr forårsager flere nært beslægtede arter af mykobakterier. Det mest almindelige årsagsmiddel for tuberkulose hos mennesker er arten Mycobacterium tuberculosis.

    Efter at have identificeret tuberkulosens forårsagende middel, er det nødvendigt at foretage en undersøgelse af følsomheden af ​​mykobakterier, der er opdaget for anti-tuberkulosemediciner. Denne procedure er meget vigtig for udnævnelsen af ​​en passende behandling af sygdommen.

    Denne analyse gør det muligt at bestemme forekomsten af ​​det genetiske materiale (DNA) af mycobacterium tuberculosis i sputum. Analysen hjælper med diagnosticering af pulmonal tuberkulose.

    PCR-metoden er en polymerasekædereaktion, som tillader identifikation af tilstedeværelsen af ​​det genetiske materiale i det biologiske materiale.
    Flere oplysninger om PCR-metoden - dets sorter, fordele og anvendelser inden for medicinsk diagnostik.

    Referenceværdier - Norm
    (Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis), DNA (PCR), kvalitativ, sputum)

    Oplysninger om indikatorernes referenceværdier samt sammensætningen af ​​indikatorerne i analysen kan afvige lidt afhængigt af laboratoriet!

    Normalt er mycobacterium tuberculosis DNA fraværende i sputummet.

    Nr. 341MK, Mycobacterium tuberculosis, DNA-bestemmelse (Mycobacterium tuberculosis, DNA) i sputum, vasker, skyllevæske

    Bestemmelse af DNA fra tuberkulosepatogener: Mycobacterium-kompleks: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum i sputum, vaskninger fra bronchi, skyllevæske ved PCR-detektion med reel tilstand af tid.

    Tuberkulose (fra latin. Tuberkulum - tuberkel) - en fælles, socialt afhængig human sygdom. De er syge og dyr. Den forårsagende middel til tuberkulose blev opdaget af R. Koch i 1882. Disse er syrefaste aerobe bakterier (74 arter) af slægten mycobacterium, som er udbredt i jord, vand og hos dyr. Hos mennesker er det mest almindelige patogen Mycobacterium tuberculosis. Den næst hyppigste er Mycobacterium bovis. Begge arter er meget meget resistente over for mange miljømæssige faktorer og forbliver levedygtige i kroppen i meget lang tid og kan forårsage sygdom mange år efter infektion. Det er meget vigtigt, at mycobacterium tuberculosis kan danne såkaldte L-former. Vedvarende i kroppen skaber de en tuberkuloseimmunitet. I lang tid kan tuberkulose opstå længe og kan detekteres ved en tilfældighed, selv om symptomer som svaghed, træthed, svag feber, nattesvigt og anæmi og leukopeni ofte er manifesteret.

    På nuværende tidspunkt truer tuberkulose fremtiden for nationen på trods af alle resultaterne af antimikrobiel terapi. Derfor er alle diagnostiske metoder, især dets latente former, yderst vigtige.

    Der findes mange metoder til laboratoriediagnosticering af tuberkulose: smearmikroskopi (oftest anvendt til dette formål sputum), den klassiske kulturmetode, ELISA. De har alle fordele, men også visse ulemper, især detektering af mykobakterier kun i tilfælde af et tilstrækkeligt antal af dem.

    I de senere år er polymerasekædereaktion (PCR) blevet anvendt til diagnose. Dens høje følsomhed gør det muligt at detektere enkeltceller og lige DNA-fragmenter i det undersøgte materiale. Metoden eliminerer krydsreaktioner og specificitet når 100%. PCR muliggør differentiering af begrænsede og formidlede former for tuberkulose, især hos børn, selv med negative resultater af mikrobiologiske undersøgelser.

    Analytiske indikatorer:

    • detekterbare fragment-specifikke sektioner af mycobakterielt DNA;
    • bestemmelsesspecificitet - 100%;
    • detektionsfølsomhed - 100 kopier af mykobakterielt DNA i prøven.
    • Bronkitis, bronchopneumoni ledsaget af en kraftig stigning i de basale lymfeknuder.
    • Hemoptysis på baggrund af en fælles asthenisk tilstand.
    • Akut betændelse i øvre og nedre luftveje ledsaget af en produktiv hoste i nærvær af langvarig kontakt med en patient med tuberkulose i historie

    Fortolkning af forskningsresultater indeholder oplysninger til den behandlende læge og er ikke en diagnose. Oplysningerne i dette afsnit kan ikke bruges til selvdiagnose og selvbehandling. En nøjagtig diagnose foretages af lægen ved hjælp af både resultaterne af denne undersøgelse og de nødvendige oplysninger fra andre kilder: anamnese, resultater af andre undersøgelser mv.

    Testkvalitet. Resultatet er givet i form af "detekteret" eller "ikke detekteret".

    "Detekteret": Mycobacterium-specifikke DNA-fragmenter specifikke for mycobakterier blev fundet i prøven, som skulle analyseres.

    "Ikke detekteret": I den analyserede prøve blev mycobacteriumspecifikke DNA-fragmenter eller koncentrationen af ​​patogenet i prøven ikke fundet under følsomhedsgrænsen for testen.

    Vær opmærksom, at timingen af ​​PCR-undersøgelser kan øges, når der udføres bekræftende tests.

    1. Makarevich A.E. Respiratoriske sygdomme - M. Højere skole, 2000. - 368 s.
    2. Jacobs D. et al. Laboratorieprøvehåndbog / Lexi-Comp./2002 - pp. 828 - 829.
    • Generelle oplysninger

    * Den angivne periode inkluderer ikke dagen for at tage biomaterialet

    Sputum, vatpind, skyllevæske

    Real-time PCR detektion.

    I dette afsnit kan du finde ud af, hvor meget det koster at afslutte denne undersøgelse i din by, se beskrivelse af testen og tabellen med resultater fortolkning. Vælge hvor man skal passere analysen af ​​"Mycobacterium tuberculosis, DNA-bestemmelse (Mycobacterium tuberculosis, DNA) i sputum, vasker, skyllevæske" i Moskva og andre byer i Rusland Regionale lægehuse kan variere.

    Metoder til test af sputum for tuberkulose

    Sputumanalyse for tuberkulose indgår i det sæt diagnostiske foranstaltninger, der er nødvendige for at identificere og afklare diagnosen. Sputumindhold hjælper med at gøre et kompetent behandlingsregime.

    Hvordan bestå en sputum test for tuberkulose

    Læger har udviklet regler for at tage analysen. Spyt opsamles om morgenen, før personen har spist morgenmad. For det første udfører patienten hygiejneprocedurer:

    • tandemaljen rengøring;
    • grundig skylning med rent vand i mundhulen og svælget.

    Så begynder den øjeblikkelige levering af materiale til analyse. Hvordan bestå en sputum test? Krav til proceduren:

    1. Forberedelsen begynder på forhånd om aftenen. Patienten opfordres til at tage specielle lægemidler, der vil gøre lungsekretionen mere naturlig. Disse er ekspektorative og tyndere forbindelser. Hvis sådanne procedurer ikke hjælper, udføres indånding med en farmaceutisk sammensætning til ekspektorering.
    2. Forbered beholdere til sputum. Slim opsamles i steriliserede retter, lukker tæt, tæt.
    3. Før levering, hoste op og spytte i en beholder. Mængden af ​​spyt bør ikke være stor, det kræver sputum fra strubehovedet. Bakterier i mundhulen er udenfor i analysen.
    4. Saml spyt i et rum med fremragende ventilation. Analysen udføres ved at åbne transom, kører hætten. Det anbefales at åbne vinduerne eller gå ud i frisk luft.

    Under proceduren i rummet er det forbudt at komme ind. Udenstående kan bidrage til kontorets mikroflora og dermed til sputumet, patologiske formationer. Læger får analyse i en speciel maske (åndedrætsværn).

    Sputumanalyse for tuberkuloseudskrift

    Afkodning begynder med at se på udseendet af slim. Patologi karakteriserer ændringen i farve - det bliver mørkt, med synlige blodblandinger. Farve er ikke hovedindikatoren. Sputum bliver mørkt fra at drikke rødvin, kaffe passion. Nogle stoffer og farvede drikkevarer ændrer udseendet af slim.

    Det indsamlede materiale er dechifreret af to indikatorer, det vil sige, læger får to resultater:

    Positivt svar

    Analyse af det resulterende sputum bekræfter tilstedeværelsen af ​​sygdommen i kroppen. Hvilket bekræfter dette:

    • fremmedlegemer eller ukendte indeslutninger;
    • tilstedeværelsen af ​​slimklumper
    • synlige striber
    • ubehagelig purulent eller smitsom lugt;
    • pus.

    Makroskopisk forskningsmetode giver andre data:

    • fibrinøse svingninger;
    • Koch linseformationer
    • produkter fra nedbrydning af bakterielle stoffer;
    • rester af den patologiske proces i lungevæv.

    Et positivt resultat afslører en øget mængde proteinforbindelser. Det når 100-120g / l.

    En anden mikroskopisk metode gør det muligt at identificere andre farlige elementer:

    • alveolære makrofager;
    • overvurderet sammensætning af leukocytter
    • høj grad af lymfocytter.

    For tuberkulose forsøger en person ofte at spytte ud af munden. Hemoptysis øger dannelsen af ​​røde blodlegemer. Mængden af ​​spyt i munden er sådan, at en person ikke kan sluge det uden at bemærke. Dens mere end i en sund tilstand.

    Negativt svar

    Undersøgelsen viser, at antallet af leukocytter er lille, svarer til normen. Mikrobakterier opdages heller ikke. Hvis patienten ikke føler sig sund, vil specialisten ordinere en yderligere undersøgelse. Det er muligt, at sygdommen er forbundet med lungesygdom. Typer og metoder til yderligere diagnostik afhænger af patientens symptomer og tilstand.

    Hvordan er undersøgelsen af ​​slim

    Tuberkulose er en farlig patologisk virkning på lungevæv, deres opløsning observeres. Analysen udføres ved flere metoder. Den mest almindelige - ELISA (immunoassay). Essensen af ​​metoden:

    1. Antistoffer tilsættes til opløsningen, i hvilken del af sputumet placeres.
    2. Kontroller koncentrationen af ​​antigener, sammenlignet med normen for en sund krop.
    3. Bestem aktiviteten af ​​det patologiske miljø.
    4. Diagnosticeret.

    Den anden version af laboratorieundersøgelsen er affald. Til metoden tager specielt medicinsk udstyr. Essensen af ​​hardware forskning:

    1. I sputum injiceret mikro miljø for den tilsigtede type infektion.
    2. Apparatet begynder at vokse ved en bestemt temperaturstamme af bakterier.
    3. Kuldioxid produceres i processen, og sensorer henter det op.
    4. Gassen kombineres med farvestoffet.
    5. På fluorescensindekset får man konklusioner om typen af ​​sygdom.

    Den nemmeste måde er kulturel. Phlegm sået i et særligt miljø. Lægen undersøger typer af kolonier af mikrobielle formationer. Metoden er den længste, men giver dig mulighed for at bevise diagnosen. Det bruges meget sjældent, netop på grund af lang tid, hvilket ikke altid er passende for patienten.

    Analyse af sputum PCR til tuberkulose

    PCR er en forkortelse af den medicinske terminologi polymerasekædereaktion. Diagnostik er en af ​​de seneste udviklinger af forskere. Det blev åbnet i 1983, hvor vigtigheden af ​​opdagelsen er værdsat i verden, fik forskeren den højeste anerkendelse - Nobelprisen.

    Metoden er baseret på brug af genteknologi. Dens alsidighed i behovet for en lille mængde materiale til en præcis diagnose. Identificere infektion med tuberkulose er virkelig i de tidlige infektionsdage uden at vente på udviklingen af ​​sygdommen.

    Essensen af ​​metoden, der er polymerase:

    • en patient tager et fragment af DNA-partikler;
    • udføre biologisk syntese af materialet
    • bestemt af klassen af ​​mikroorganismer.

    Processen er teknisk kompleks, det involverer molekylærgenetisk undersøgelse. PCR for tuberkulose tager bogstaveligt talt et par timer. Den tid, der kræves for andre metoder, kan ikke sammenlignes med ham i hastighed. Efter at have passeret analysen venter patienten på detektionsmiddelets påvisning. Processen, der ligger til grund for en specialist, kan forstå. En almindelig person forstår ikke indviklingen i metoden.

    Hvordan er diagnosen af ​​tuberkulose test:

    1. Tag det nødvendige materiale til analyse. Hvad kunne det være: blod, mave, sputum, vand, vasket med bronkier.
    2. Materialetypen er valgt afhængigt af typen af ​​patogen mulig infektion.
    3. Det næste skridt er at studere kædeforbindelsen. To kæder udsættes for høje temperaturer op til 98 grader. Stadiet hedder denaturering (destruktion af strukturelle DNA-kæden). Temperatur eksponeringstid - op til 2 minutter.
    4. Næste fase er annealing. Temperaturen er reduceret, primeren får lov til at forbinde til DNA-strengen.
    5. Som følge heraf opstår forlængelse - syntesen af ​​molekyler, der er nødvendige for processen.

    Til en sådan analyse kræves der særligt udstyr. Det er dyrt, så det er ikke tilgængeligt på nogen sundhedsanlæg. PCR udføres i vanskelige tilfælde, når der ikke er noget eksakt resultat af konventionelle diagnostiske metoder, er det umuligt at udføre instrumentelle metoder til kontrol af patientens tilstand.

    Fordelene ved PCR-teknologi:

    1. Hastigheden for at få resultatet. Ca. 5 timer har en læge nøjagtige data. Denne hastighed giver dig mulighed for at hjælpe patienten i en nødsituation. Oftere er det den præoperative periode.
    2. Tilladt, når andre metoder ikke kan bruges. For eksempel fører den hyppige gentagelse af røntgenstråler til stråling. PCR er ikke farlig for patienten.
    3. Du kan undersøge ethvert biologisk miljø. Selv komplekse former for tuberkulose er identificeret.
    4. Metoden er derfor sikker til børn.
    5. Infektion opdages på ethvert tidspunkt.
    6. PCR tillader ikke at skjule selv et lille antal bakterielle mikroformationer.
    7. Velegnet til kontrol af mulig gentagelse af tuberkulose.

    Hvor meget sputumanalyse for tuberkulose

    Prøver tages mere end én gang. Gentagelser udelukker muligheden for fejl eller opnåelse af materiale af ringe kvalitet, der ikke afspejler patientens sande stilling og tilstand. Hvor mange gange at samle sputum, fortælle den behandlende læge. Den bedste mulighed er tre gange om dagen. Nogle gange kan der kræves yderligere prøver. Under hvilke tidspunkter samler de:

    1. Før du spiser om morgenen.
    2. 3-4 timer efter den første test.
    3. På den anden dag, også før måltider.

    Tuberkulose er en farlig sygdom, som kan påvirke en persons legeme. Der er mange infektionssituationer. Med nogen mistanke om muligheden for infektion, vent ikke på lyse symptomer. Det bør testes, undersøges og i tide for at påbegynde behandlingen.

    PCR diagnose af tuberkulose

    Tuberkulose er en specifik infektion, dets fokus kan være i humane væv i årevis og spredes derefter i flere måneder. Dette er en kronisk sygdom, hvis optimale behandlingsregimer er vanskelige at vælge. En af grundene til dette er den sene diagnose, når mykobakterier, mens de er i menneskekroppen, allerede har tilpasset sig mange stoffer.

    Hvilke moderne diagnosemetoder eksisterer? PCR diagnostik - hvad er det? Hvordan foregår denne forskning? I hvilke tilfælde er tuberkulose diagnosticeret af denne metode og hvad er dens essens?

    Hvad er PCR-diagnostik

    Dette er en af ​​de mest moderne metoder til diagnosticering af ikke kun sygdomme, men også påvisning af biologisk materiale. PCR-diagnostik blev opfundet relativt nylig. For cirka 30 år siden i 1983 foreslog en amerikansk biokemi, Carey Banks Mullis, et komplekst opsvingskema for det biologiske materiale af mikroorganismer i et kort segment. Takket være sin opdagelse blev forskeren tildelt den højeste pris - Nobelprisen.

    Hvad er det - PCR diagnose af infektioner? Polymerasekædereaktion (PCR) er en diagnose af påvisning af virussygdomme, baseret på genteknologiske metoder. Det er meget udbredt inden for medicinsk mikrobiologi, immunologi og virologi. Metoden er universel og hjælper med at lave en diagnose med en lille mængde materiale. En infektion kan registreres bogstaveligt i de første timer med infektion med det, længe før de første symptomer på sygdommen optræder.

    Metoden består i at opnå fra materialet fra en syg person, ikke selve patogenet, men fragmenter af genomet (DNA-partikler), dets biosyntese med efterfølgende bestemmelse til hvilken klasse af mikroorganismer det opnåede genetiske materiale tilhører ved hjælp af molekylære genetiske metoder.

    På trods af at dette er en kompleks proces, tager det meget mindre tid end mange biologiske metoder til at detektere smitsomme stoffer. Inden for få timer kan en mikroorganisme detekteres ved hjælp af PCR. For at gøre dette er der ingen grund til at isolere det fra miljøet (blod, cerebrospinalvæske, sputum) og vokse det i lang tid på kunstige næringsmedier. Det er nok, at et lille fragment af DNA-strengen af ​​det infektiøse middel er til stede i det undersøgte materiale.

    Reaktionsgrundlaget er muligheden under kunstige betingelser (in vitro) til at skabe syntese af nukleinsyremolekyler af det infektiøse middel.

    Hvad er der brug for PCR?

    1. Primers er de DNA-segmenter, hvorfra biosyntese eller skabelse begynder.
    2. Nukleotider eller komplekse forbindelser, der er grundlaget for et DNA eller RNA molekyle.
    3. Polymerasekædereaktion er umulig uden tilstedeværelse af polymerase, hvilket er et enzym, der accelererer PCR.

    Trin af PCR-diagnostik

    Hvordan udføres molekylær diagnose med PCR? Proceduren er enkel og tager kort tid under hensyntagen til indsamling af materiale.

    1. Inden studiet påbegyndes, tager de det nødvendige biologiske materiale - det her er det bronkiske vaskevand, blod, maveindhold, sputum. Den type biologisk materiale afhænger af det formodede patogen.
    2. Denaturering eller ødelæggelse af den primære struktur af DNA, som består af to kæder. Kernen i denne fase er at adskille de to kæder under påvirkning af høj temperatur (maksimum er 98 ºC, som ikke varer mere end to minutter).
    3. Ved næste fase af PCR, kaldet annealing, reduceres temperaturen med flere grader, således at primeren vil binde til DNA-strengen.
    4. Forlængelse, hvor syntesen af ​​de ønskede molekyler finder sted direkte.

    Som følge heraf modtager kun 25-30 sådanne cyklusser det nødvendige antal kopier af mikroorganismer DNA, som er lette at genkende.

    Kræver PCR diagnose af tuberkulose?

    Det er ikke muligt for absolut alle mennesker med mistænkt tuberkulose at udføre PCR, da metoden kræver dyrt udstyr. Ikke alle offentlige klinikker har råd til at købe det. Derudover er det sket, at de sædvanlige metoder til diagnosticering af en infektion i de fleste tilfælde også retfærdiggør sig selv.

    Disse omfatter:

    • patientundersøgelse, historieoptagelse;
    • fuld undersøgelse af personen
    • en undersøgelse ved hjælp af Mantoux tuberculin testen;
    • radiografi eller fluorografi;
    • computerdiagnostik om nødvendigt;
    • mikrobiologiske forskningsmetoder: smear mikroskopi og sputum bakteriologisk undersøgelse.

    PCR til tuberkulose udføres i særlige tilfælde, når det er svært at foretage en diagnose, eller det er ikke muligt at udføre andre instrumentelle metoder.

    På trods af overflod af diagnostiske metoder fortsætter forekomsten af ​​tuberkulose at vokse. I øjeblikket er der ikke kun vækst, men også andre funktioner:

    • sygdommen opstår ofte i svær form;
    • Antallet af dødelige tilfælde øges;
    • mere modstandsdygtig over for moderne kemoterapi er diagnosticerede former for sygdommen.

    Folks tilbageholdenhed med at gennemgå rutinemæssige medicinske undersøgelser årligt fører afvisningen af ​​vaccination til spredning af tuberkulose. Under sådanne forhold har vi brug for hurtige, informative og effektive forskningsmetoder, som bør være tilgængelige for børn og voksne. Alle ovennævnte diagnostiske metoder er meget ringere end PCR.

    Fordele ved diagnosticering af tuberkulose med PCR

    Denne forskning, men ny, har vist sig godt, især i kontroversielle tilfælde, hvor det er umuligt at foretage en diagnose af en række årsager.

    Takket være PCR er det meget lettere at opdage det forårsagende middel af tuberkulose i testmaterialet.

    Fordelene ved PCR-diagnostik er som følger.

    1. Dette er en hurtig analyse. Et lille fragment af DNA-molekylet kan bruges til at diagnosticere om få timer (ca. fem), som med succes anvendes i nødsituationer, når for eksempel før en operation er det nødvendigt at afgøre, om en person er syg med tuberkulose.
    2. PCR-analyse er tilladt i tilfælde af, at andre metoder ikke er tilgængelige eller forbudt (til påvisning af lungetuberkulose, nogle gange må du tage flere radiografiske billeder, hvilket vil være en stor dosis stråling).
    3. Ved hjælp af PCR undersøges ethvert biologisk miljø for tilstedeværelsen af ​​et patogen i det. For eksempel kan du gennemføre en undersøgelse af cerebrospinalvæske, hvis der er en mistanke om tuberkuløs meningitis.
    4. Tilladt PCR-diagnose af smitsomme sygdomme hos børn, fordi metoden er sikker.
    5. Tillader dig at identificere patogenet på ethvert stadium af sygdommen.
    6. PCR's høje følsomhed gør det muligt at opdage Mycobacterium tuberculosis, selvom der kun er få mikroorganismer i det biologiske materiale.
    7. Det er godt at udføre for diagnosticering af sygdomsfornyelse.

    Efter alt det læsede PCR virker næsten perfekt diagnostisk metode, som skal gøre alle mistænkt for tuberkulose. Men der er også ulemper her, de skal tages i betragtning.

    Ulemper ved PCR ved diagnosen tuberkulose

    I vores tid er sådan diagnostik mere sjælden end regelmæssighed. Og for dette er der grund.

    1. Dette er en dyr forskningsmetode. På mange klinikker er udstyr til PCR fraværende på grund af dets høje omkostninger, men analysen kan stadig gøres i betalte laboratorier.
    2. Umiddelbart efter behandling kan døde mykobakterier eller lever i små mængder stadig være til stede i kroppen (resultatet vil være positivt under PCR-diagnostik), så metoden vil være upålidelig på nuværende tidspunkt, det giver ingen mening at udføre det.
    3. Mutationer af mykobakterier resulterer i ineffektiv PCR - en normal DNA-streng-sekvens kan ikke syntetiseres.
    4. Det er nødvendigt at vælge det rigtige miljø for undersøgelsen. Blod er kun taget, hvis det mistænkes for at blive inficeret (sepsis). Der er ikke behov for at tage sputum, hvis der er et spørgsmål om tuberkulose i nervesystemets organer. I dette tilfælde vil PCR ikke være i stand til at detektere patogenet, og diagnosen vil være uninformativ.

    Indikationer for at detektere tuberkulose ved hjælp af PCR-analyse

    PCR-diagnose af tuberkulose udføres oftest i kontroversielle tilfælde. Hvornår refererer læger denne undersøgelse?

    1. Hvis det er svært at foretage en diagnose ved hjælp af de sædvanlige tilgængelige metoder, men der var kontakt med en patient med tuberkulose.
    2. I det tilfælde, hvor en person ikke kan leveres til en klinik for at gennemføre rutinemæssige rutinemæssige test for tuberkulose, er det lettere at undersøge ham ved anvendelse af PCR, da sputum til testen kan leveres i en krukke, og diagnosen er bekræftet inden for få timer.
    3. Hvis en person skal have en nødoperation, og det er presserende at finde ud af om han er syg med tuberkulose.
    4. Om nødvendigt er en gravid kvinde også bedre at undersøge for tuberkulose ved anvendelse af PCR, da metoden er sikker.
    5. På en betalt basis er enhver, der ikke er blevet diagnosticeret med tuberkulose, blevet bekræftet ved hjælp af bakteriologiske metoder og fluoroskopi. Dette sker, når læsionen i lungerne er umærkelig i det direkte billede, og personen under levering af sputum til undersøgelsen kunne ikke følge anbefalingerne for korrekt samling af materiale. I dette tilfælde er personen bekymret for alle symptomer, der er karakteristiske for lungetuberkulose.
    6. Når der er tvivl om resultaterne af Mantoux-testen.
    7. Det er bedre at gøre PCR-diagnose af tuberkulose hos børn. Fremgangsmåden er sikker, skaber ikke yderligere strålingseksponering og er effektiv til at detektere vanskeligt at diagnosticere sygdomsformer.

    Tidlig diagnose af tuberkulose er nøglen til ordentligt ordineret behandling og nedsættelse af sygdommens spredning. Ofte er velkendte sygdomsdetekteringsmetoder ikke altid effektive. Derfor er PCR i dag en af ​​de mest pålidelige og sikre måder at påvise infektion i de tidlige stadier af dens udvikling.

    Mycobacterium tuberculosis, DNA [realtids PCR]

    En undersøgelse for at identificere tuberkulose-årsagsmidlet (Mycobacterium tuberculosis), under hvilket mycobacteriumets genetiske materiale (DNA) i en biomaterialeprøve bestemmes ved anvendelse af realtids-polymerasekædereaktion (RT-PCR) -metoden.

    Russiske synonymer

    Tuberkulose, Mycobacterium tuberculosis, Koch sticks.

    Engelske synonymer

    Tuberkulose, Tubercle bacillus, Kochs bacillus.

    Forskningsmetode

    Realtids-polymerasekædereaktion.

    Hvilket biomateriale kan bruges til forskning?

    Venøst ​​blod, biopsi, livmoder endometrieceller, cerebrospinalvæske, urogenitalt smear (med prostatsekretion), sputum, pleurvæske, den første del af morgenurin, ejakulering.

    Hvordan forbereder man sig på undersøgelsen?

    Ingen uddannelse kræves.

    Generelle oplysninger om undersøgelsen

    Tuberkulose (fra latin. Tuberkulum - "tuberkel") - en smitsom sygdom hos mennesker og dyr, der hovedsageligt overføres af luftbårne dråber. Risikoen for infektion øger immunosuppression forårsaget af hiv / aids, diabetes, nyresygdom, organtransplantation og brug af immunosuppressive midler, graviditet, aldring. Desuden er de, der er i kontakt med patienter med tuberkulose, såvel som børn under 5 år efter tuberkulinprøven, mest udsatte for det. De mest udsatte befolkningsgrupper omfatter hjemløse, fanger, indvandrere fra lande med høj forekomst af tuberkulose, stofmisbrugere og ældre.

    Til dette studie anvendes et testsystem baseret på detektering af genomisk DNA af det forårsagende middel af tuberkulose ved anvendelse af realtids-polymerasekædereaktion (PCR) (realtids-PCR). I moderne diagnostik er det en af ​​de hurtigste, mest alsidige og meget følsomme metoder.

    Standardmetoder til påvisning af mycobacterium tuberkulose er baseret på dyrkning af patogene mikroorganismer i et næringsmedium. Vanskeligheder forbundet med lav vækst i kolonier af Mycobacterium tuberculosis - må forventes op til 1,5 måneder efter at have taget materialet.

    Molekylære biologiske metoder baseret på påvisningen af ​​genetisk materiale af mycobacterium tuberculosis har høj følsomhed og specificitet. Deres vigtigste fordel er den hurtige opnåelse af resultater. Ved hjælp af PCR-realtid kan du identificere tuberkulosens årsagsmiddel på dagen for modtagelsen af ​​den kliniske prøve.

    Bacteremia (mycobacterium, der kommer ind i patientens blodbanen) kan forekomme i de tidlige stadier af tuberkuloseinfektion, såvel som i udviklingen af ​​generaliseret eller ekstrapulmonal tuberkulose. Det er farligt, fordi immunresponset på bakterier vil forårsage sepsis og septisk chok, som er fyldt med døden. Risikoen for udvikling af generaliseret tuberkulose er højest hos patienter med hiv i de senere stadier, blandt dem, der har afbrudt anti-tuberkulosebehandling, og også blandt dem, der ikke søgte lægehjælp i tide til udbrud af symptomer på tuberkulose.

    Diagnose af tuberkulose hos HIV-inficerede mennesker er vanskelig på grund af kroppens immunundertrykte tilstand, som ofte manifesterer sig i falsk-negative resultater af tuberkulinreaktioner og mikrobiologiske test. I denne henseende er testning af Mycobacterium tuberculosis ved PCR i realtid af stor betydning.

    Hvad bruges forskning til?

    • Til diagnosticering af pulmonal tuberkulose (især dens generaliserede og ekstrapulmonale, associeret med bakteriæmi, former) og overvågning af dets behandling.

    Hvornår er en undersøgelse planlagt?

    • Når mistænkt ekstrapulmonær tuberkulose.
    • Med symptomer på bakteriæmi på baggrund af en tuberkuloseinfektion: øget kropstemperatur, sved osv. (Med et lille antal bakterier i blodet kan bakteriæmi være asymptomatisk).
    • Hvis patienten har haft langvarig kontakt med en patient med tuberkulose.
    • Med en unormal reaktion på tuberkulinprøven hos børn.
    • Når en patient har HIV-infektion.

    Hvad betyder resultaterne?

    Referenceværdier: negativ.

    • Tilstedeværelsen af ​​patogenet i det studerede biomateriale. Det sker normalt med aktiv tuberkulose, der kræver behandling. Identifikation af et stort antal mykobakterier indikerer ofte en ekstrapulmonær form for tuberkulose eller generalisering af infektionen.
    • Det forårsagende middel til tuberkulose blev ikke påvist. Bakterier er fraværende.

    Hvad kan påvirke resultatet?

    Effektiv anti-tuberkulosebehandling over tid fører til, at mykobakterier forsvinder i klinisk materiale.

    Vigtige noter

    For at ordinere det korrekte behandlingsregime, når en patient diagnosticeres med tuberkulose, er det nødvendigt at afprøve mycobakteriernes følsomhed over for anti-TB-lægemidler.

    Anbefales også

    Hvem laver studiet?

    Praktiserende læge, terapeut, phthisiolog, urolog, gynækolog, specialist i smitsomme sygdomme.