Polymerasekædereaktion (PCR) til tuberkulose

Tuberkulose er en af ​​de farligste sygdomme, som menneskeheden har lidt i hundreder af år. Selvom forskere var i stand til at identificere den forårsagende agent og opfinde antibiotika for at eliminere det, er behandlingen ikke altid vellykket. Hovedårsagen er en lang periode med latent eller latent sygdomsform, som kan vare i flere år. Sen diagnostik reducerer patientens chancer for genopretning og fuld levetid betydeligt.

Hvad er PCR?

Til påvisning af mycobacterium tuberkulose i kroppen i over hundrede år er Mantoux test blevet anvendt succesfuldt. Andre metoder har vist sig godt: bakteriologisk kultur i kunstigt medium, smearmikroskopi, ELISA. Et stort antal komplikationer og falskpositive resultater samt varigheden af ​​nogle metoder krævede imidlertid indførelsen af ​​nye teknologier i diagnosticeringsmetoden. Et stort gennembrud inden for mikrobiologi var fremkomsten af ​​PCR-analyse for tuberkulose. I adskillige årtier har det vist sin effektivitet og anvendes meget til differentialdiagnosen af ​​forskellige former for tuberkulose.

PCR-analyse for tuberkulose eller polymerasekædereaktion er en metode til at detektere DNA fra bakterier eller deres fragmenter, hvilket er baseret på en stigning i nukleinsyremolekyler under virkningen af ​​enzymet DNA-polymerase. Til et positivt resultat er kun et molekyle af det patogene DNA tilstrækkeligt, og derfor anses denne metode for at være meget følsom. Diagnose af OCP i tuberkulose er mere effektiv end at dyrke mykobakterier i et kunstigt miljø, da det i modsætning til kulturmetoden gør det muligt at skelne mellem vildt og vaccinestammer vaccineret med BCG. Dette undgår falske positive og gør diagnosen mere præcis.

Fordele ved PCR

PCR-diagnostik til tuberkulose gør det muligt at opdage en Koch bacillus i et biologisk miljø hos en organisme med bestemmelse af deres kvantitative sammensætning selv i sygdommens indledende fase, når mycobakterier er i dvaletilstand. Diagnose af sygdommen i latent fase gør det muligt at påbegynde profylaktisk behandling i tide for at forhindre udviklingen af ​​foki for betændelse i lungerne og udseendet af komplikationer i andre organer og systemer. Desuden har PCR-testen for tuberkulose flere fordele:

• høj specificitet - 90-100%;
• høj hastighed - fra 4 timer til 2 dage;
• høj følsomhed, især i immundefekt
• differentiel diagnose.

Den største fordel ved metoden er, at CRC-diagnosen af ​​tuberkulose hos børn gør det muligt at skelne den formidlede form af sygdommen fra det begrænsede brændpunkt, selv med negative resultater fra andre test. Differentiel test giver dig mulighed for at vælge det rigtige behandlingsregime og øge effektiviteten af ​​terapien.

Analysens høje specificitet opnås ved at eliminere krydsreaktioner med andre nukleinsyremolekyler, og høj følsomhed gør det muligt at detektere mycobakterier selv i et lille volumen af ​​det opsamlede materiale. PCR-metoden for sputum til tuberkulose har størst pålidelighed, dets specificitet når 100% sammenlignet med undersøgelsen af ​​andre biologiske materialer.

En særlig mekanisme af PCR giver rigelige muligheder for påvisning af Koch-pinde hos immunkompromitterede patienter. Ifølge analysemetoden registrerer reaktionen antigener, så det er ligegyldigt, om kroppen producerer antistoffer mod patogenet eller ej. Det er således muligt at diagnosticere ekstrapulmonale former for sygdommen og avancerede tilfælde hos patienter med unøjagtigheder i immunsystemet, hvilket ikke er muligt ved hjælp af andre metoder.

Ulemper ved metoden

På trods af analysens mange fordele og høj følsomhed kan PCR for tuberkulose give et falsk negativt resultat. Da der tages en meget lille mængde biomateriale til diagnose, er det ikke udelukket, at patogen "skjuler" i en celle eller et inflammatorisk fokus, og ikke udløses udenfor.

Sensibiliteten af ​​denne metode hos børn er 25-80%. I en randomiseret undersøgelse hos en gruppe patienter med klinisk dokumenteret diagnose gav en PCR-blodtest for tuberkulose et positivt resultat hos kun 50% af patienterne. I denne henseende er det ikke muligt at erstatte en diagnostisk metode med en anden, når der testes et barn for patogene mykobakterier. For fuldt ud at verificere fraværet af infektion er det nødvendigt at gennemføre en omfattende undersøgelse på flere måder på en gang.

Indsamling proces

Hovedbetingelsen for pålideligheden af ​​PCR-diagnostik er overholdelse af reglerne for indsamling af biologiske væsker til analyse. Forurenet eller ukorrekt opsamlet materiale kan forårsage ukorrekte resultater. Den mest almindelige er analysen af ​​sputum, blod og urin, men for en dybere differentialdiagnose kan du tage prøver fra indholdet i maven, synovialvæske, cerebrospinalvæske, bronchialspylingsvæske, sæd, prostataekstraktion.

Urin-PCR til tuberkulose tages om morgenen efter ekstern kønshygiejne ved at urinere i en steril beholder. Under proceduren er det vigtigt ikke at røre beholderens indre vægge for at forhindre indtrængen af ​​tredjeparts mikroorganismer. Kvinder, der lever regelmæssigt sexliv, bør helt sikkert lægge en tampon i vagina for at undgå udledning fra tredjepart.

En blodprøve tages om morgenen på tom mave, og PCR af sputum til tuberkulose kan foretages på ethvert tidspunkt af dagen med obligatorisk forudgående mundhygiejne. Dette er nødvendigt for at fjerne madrester, der kan komme ind i beholderen. Ved ekspektorering af sputum er det vigtigt at forhindre indtagelse af spyt og slim fra nasopharynx i beholderen, hvilket kan fordreje analysedataene.

Undersøgelsen af ​​indholdet i maven udføres på sygehuset om morgenen, mens sputumet sluger natten over er i maven. For at detektere mycobacterium tuberkulose gør denne metode tredobbelt såning, hvilket sandsynligvis gør det muligt at isolere en Koch bacillus.

Afkodningsresultater

Kvalitativ analyse af PCR giver 2 typer af resultater "detekteret" eller "ikke detekteret". De indikerer henholdsvis en positiv og en negativ dom. Svaret "detekteret" betyder, at DNA'et af det infektiøse middel er til stede i testprøven, og med 97% sandsynlighed er kroppen smittet med tuberkulose. Et negativt resultat indikerer fraværet af Koch sticks DNA i en prøve af biologisk materiale og giver en 97% chance for, at kroppen ikke har et stort antal mykobakterier og 60% at personen ikke er inficeret.

Den største specificitet for diagnosen tuberkulose har en blodprøve og sputum. Med et positivt resultat indikerer de infektion i kroppen, hvilket kræver akutte terapeutiske foranstaltninger. Undersøgelser af andre biomaterialer kan ikke angive sygdomsforløbet, men kun forekomsten af ​​fremmede bakterier. Dette sker, når en person er en bærer af sygdommen, men spred ikke infektionen i miljøet og inficerer ikke sunde mennesker.

Kvantitativ PCR-analyse udføres sjældnere, og den behandlende læge beskæftiger sig med at afkoda dens resultater. Forskningsindikatorerne bruges til at bestemme sygdommens aktivitet og graden af ​​skade på kroppen. Baseret på de opnåede data kan en specialist bestemme effektiviteten af ​​behandlingen og justere om nødvendigt den terapeutiske ordning.

Tuberkulose har altid været og er fortsat et af de alvorligste problemer for helheden for hele menneskeheden. Moderne diagnostiske metoder kan opdage sygdommen i et tidligt stadium for at starte behandlingen i tide. Tuberkulinprøve, smearmikroskopi, bakteriekultur på kunstige næringsmedier har vist sig inden for laboratoriediagnose af tuberkulose. Den lange ventetid på resultater og den øgede frekvens af falske positive aflæsninger gjorde dem imidlertid forældede og fremhævede mere avancerede teknologier. PCR-analyse er en meget specifik og meget effektiv metode til diagnosticering af tuberkulose. Hans resultater er de mest pålidelige blandt alle de foreslåede laboratoriemetoder til detektering af Koch-pinde. Det giver ikke blot mulighed for at lave den endelige dom, men også at udføre den nødvendige differentialdiagnose.

PCR diagnose af tuberkulose hos børn og voksne: indikationer for

Verdenssundhedsorganisationen anerkendte for 20 år siden, at udbredelsen af ​​tuberkulose var ude af kontrol og nåede omfanget af en epidemi. Siden da har situationen ikke forbedret sig. Mere end en million tilfælde af sygdommen diagnosticeres hvert år, hvoraf næsten en fjerdedel er dødelig. I løbet af det sidste årti er forekomsten blandt børn steget, de fleste former for sygdommen lænner ikke til standard antibiotikabehandling.

I dag er en af ​​de globale opgaver for medicin udviklingen af ​​sådanne diagnostiske metoder, som vil gøre det muligt at identificere patologi inden begyndelsen af ​​udprøvede kliniske symptomer. En af dem er polymerasekædereaktionen (PCR) til tuberkulose, som hjælper med at opdage Koch-sygdomsfremkaldende pinde i blod, sputum og andre biologiske væsker.

Diagnose af tuberkulose

Screeningstest er rettet mod at opdage patienter, bærere af tuberkulose og forebygge spredning af infektion i samfundet. For børn under 14 år er Mantoux testen massivt brugt. Dette er en immunologisk test, hvor en dosis tuberkulin injiceres subkutant - en kompleks blanding af det genetiske materiale af flere typer mycobakterier. Udseendet af en udtalt reaktion indikerer en aktivt forekommende infektiøs proces.

Til forebyggende undersøgelse hos voksne ved hjælp af fluorografi eller røntgenstråler. Disse metoder hjælper med at visualisere patologiske læsioner i lungevæv. Det forårsager imidlertid vanskeligheder med at differentiere tuberkulose fra en anden organisk patologi (maligne og godartede neoplasmer, inflammatoriske processer, parasitære invasioner, professionel lungeskader).

For at præcisere strukturen og størrelsen af ​​det patologiske fokus kan der være behov for yderligere instrumentelle undersøgelser:

• målrettet radiografi;
• computertomografi;
• magnetisk resonans billeddannelse.

Metoder til diagnose af tuberkulose

I tilfælde af tvivlsomme resultater og til udnævnelsen af ​​passende terapi er der behov for mere nøjagtige diagnostiske metoder, som gør det muligt at isolere patogenet. Mikroskopisk og bakteriologisk undersøgelse af sputum bruges til at bekræfte lungerformer af tuberkulose i lang tid.

I de seneste år er forekomsten af ​​mycobacterium i forskellige organer og systemer - nyrerne, knoglerne, tarmene, huden - blevet hyppigere. For at identificere disse former for tuberkulose kan ultralydundersøgelser, urin og fæceskultur, endoskopiske undersøgelser anvendes.

PCR-diagnostik til tuberkulose hjælper med at bekræfte tilstedeværelsen af ​​Koch-pinde i blodet samt dens følsomhed overfor visse lægemidler. Dette er en meget effektiv metode baseret på påvisning af det bakterielle genetiske materiale i forskellige biologiske væsker.

Specificitet og indikationer

Polymerasekædereaktion er en yderst følsom mikrobiologisk diagnostisk metode, der er baseret på genteknologiske principper. For at bekræfte tilstedeværelsen af ​​et patogen i et biologisk materiale er det tilstrækkeligt at detektere et unikt nukleinsyrefragment for det. PCR for tuberkulose kan detektere bakterier i blodet, sputum, urin.

I øjeblikket udviklede flere analysemetoder. De mest populære blandt dem er følgende:

• Real-time PCR;
• mikrofluidisk teknologi;
• sekventering og pyrosequencing.

Real-time PCR

Laboratorier bruger oftest realtids-polymerasekædereaktion, da det reducerer antallet af falsk-positive resultater, og analyseprocessen selv tager kort tid.

I betragtning af det store antal skjulte former for sygdommen og ineffektiviteten af ​​standarddiagnostiske metoder anvendes PCR i stigende grad. Formålet med denne analyse er vist på:

• identificere mistænkelige områder på røntgenstrålen;
• tvivlsomme resultater af tuberkulinprøve
• umuligheden af ​​at foretage mikroskopisk og bakteriologisk analyse af sputum hos personer i alvorlig tilstand
• udføre kirurgiske indgreb, når det er nødvendigt at hurtigt sikre, at der ikke er nogen infektion;
• afvisning af brugen af ​​fluorografi, røntgenstråler eller computertomografi (fx ved gravide kvinder og amning i tilfælde af overskydende strålingseksponering)
• mistanke om ekstrapulmonal tuberkulose (det anbefales at ikke kun blod, men også slim anvendes).

PCR-diagnostik af tuberkulose har vist sig i undersøgelsen af ​​børn på grund af manglende yderligere eksponering og hurtige resultater.

Forberedelses- og analyseprocedure

Særligt forberedelse til blod-PCR er ikke påkrævet. For at undgå komplikationer ved blodprøveudtagning og for at opnå materiale af høj kvalitet skal følgende generelle regler følges:

• analyse skal tages om morgenen ikke tidligere end 2 timer efter at være vågnet
• Det bør begrænse indtaget af fede og stegte fødevarer en dag før blodprøveudtagning;
• Afstå fra at spise, te og kaffe i 8-9 timer, det er tilladt at drikke rent vand
• Røg ikke i mindst 3-4 timer.

I tilfælde af permanent medicin (hormoner, antikoagulantia, antiinflammatoriske lægemidler, antibiotika, blodfortyndere), bør du underrette laboratorieassistenten om dette.

Ved levering af sputum bør du børste dine tænder godt og skylle munden flere gange. Saml materiale i en steril beholder. For bedre resultater kan der tages en slim eller mucolytisk middel om aftenen.

Diagnosen selv består af flere trin.

Hegn materiale. Det kan udføres i laboratoriet og eksternt. Nogle typer af materiale patienten indsamler uafhængigt (urin, slim).

Destruktionen af ​​strukturen af ​​nukleinsyrer (denaturering af DNA og RNA molekyler). For at gøre dette opvarmes testmaterialet til en temperatur på 98 grader og holdes i flere minutter. Som følge heraf dannes den dobbelte helix, enkeltstrengede molekyler.

Joke. Efter tilsætning af en primer (en kort del af nukleinsyre), falder temperaturen med flere grader, polymerase aktiveres.

Elognatsiya. Temperaturen bringes til det optimale niveau, enzymaktiviteten når et maksimum, og den anden kæde er afsluttet i overensstemmelse med Chargaff-komplementaritetsreglen.

For at afslutte undersøgelsen er det nødvendigt at syntetisere det krævede antal DNA-molekyler - ca. 50 cyklusser af den ovennævnte reaktion. Det tager ca. 2-3 timer. Et positivt resultat af reaktionen indikerer ikke altid det aktive stadium af sygdommen, men er en indikator for tilstedeværelsen af ​​en mikroorganisme i kroppen.

Fordele og ulemper ved fremgangsmåden

I sammenligning med andre mikrobiologiske metoder tager PCR ikke lang tid at opdage Mycobacterium tuberculosis ved hjælp af PCR, resultatet kan opnås på testdagen.

En anden fordel er analysens høje specificitet, som gør det muligt at påvise patogenens tilstedeværelse med en nøjagtighed på 90-95% i næsten ethvert biomateriale (blod, urin, afføring, cerebrospinalvæske, sputum, bronchusspyling).

Der er imidlertid flere ulemper med metoden:

• en temmelig høj procentdel falske positive resultater (op til 15%), der er forbundet med påvisning af ikke-levende mikroorganismer;
• i nogle tilfælde kan du springe over sygdommens kendsgerning, da Mycobacterium tuberculosis ofte udsættes for mutationer, og dets genetiske materiale ændres;
• lav effektivitet ved undersøgelse af personer med immundefekt
• høje omkostninger ved forskning, behovet for dyrt udstyr og reagenser.

Hvad kan erstattes?

I betragtning af de forskellige former for tuberkuloseinfektion, for en mere præcis diagnose og valg af behandling er det nødvendigt at kombinere flere diagnostiske undersøgelser:

Obligatorisk analyse for børn er Mantoux testen. Hvis indførelsen af ​​tuberkulin (genetisk materiale af mycobakterier) forekommer en udtalt reaktion, kan det antages infektion med en tuberkelbacillus.

Røntgenmetoder kan bruges til at visualisere det patologiske fokus. Ved diagnosen ekstrapulmonal tuberkulose anvendes endoskopiske metoder med samtidig biopsi:

• bronkoskopi hjælper med at identificere læsioner i strubehovedet, luftrøret, bronchi;
• koloskopi - tarm;
• cystourethroskopi - organer i urinsystemet
• hysteroskopi - kvindelige kønsorganer. Disse metoder er ikke specifikke, for at foretage en nøjagtig diagnose bør patogenet identificeres.

Generelle kliniske tests vil bidrage til mere specifikt at bestemme kroppens tilstand. En fuldstændig blodtælling med leukocytformel er påkrævet.

En stigning i antallet af neutrofiler med reduceret lymfocytniveau og en stigning i erythrocytsedimenteringshastigheden (ESR) indikerer en aktiv inflammatorisk proces med bakteriel etiologi. At udelukke skade på organerne i urinsystemet ved hjælp af en generel urinalyse og kultur for sterilitet.

PCR er i øjeblikket tilgængelig i de fleste private laboratorier. Dette kræver ikke kun højt kvalificerede specialister, men også dyrt udstyr, et stort antal reagenser. Derfor er brugen af ​​denne metode begrænset på trods af dens høje nøjagtighed og specificitet.

PCR-analyse til diagnose af tuberkulose

Medicin står aldrig stille, og hidtil har fremskridt inden for sundhedssektoren mulighed for at diagnosticere og helbrede mange tidligere upåvirkede lidelser. Der er også sygdomme, der ikke kan påvises ved visuel inspektion. Tuberkulose har altid været blandt dem. Det er en farlig smitsom sygdom, der påvirker lungerne, leddene og knoglerne, og fører ofte til døden selv i vores dage. Diagnostiske metoder til denne sygdom er blevet forbedret, hvilket gør det muligt at opdage sygdommen i tidligere stadier, når det kan behandles. Blandt dem er ikke kun røntgen- og Mantoux-test, men også PCR for tuberkulose.

Tuberkulose - hvad er det

Tidligere blev tuberkulose kaldet en tør sygdom eller phthisis. Dette er en bakteriel infektion, der oftest påvirker lungerne. Dens ekstrapulmonale former - tuberkulose af knogler og led, tuberkulær meningitis - er mindre almindelige og mere avancerede stadier. Den forårsagende middel til denne smitsomme sygdom er mykobakterier. Tuberculosis bacillus kaldes også Kochs stav.

TB infektion er meget smitsom, den overføres af luftbårne dråber, når de hoster og nyser patienten. Den eneste beskyttelse mod denne lidelse er den rettidigt leverede vaccine. Det beskytter ikke mod infektion, men tillader ikke baciller at komme ind i kroppen for at forårsage tuberkulose.

Former for tuberkulose

Sygdommen kan forekomme i både åben og lukket form. Forskellene er som følger:

• lukket tuberkulose er asymptomatisk. Under sådanne omstændigheder er kochstaven i sputumet umuligt at opdage, hvorfor den inficerede ikke er farlig for miljøet. Et sådant sygdomsforløb truer normalt ikke de mest inficerede, men der er undtagelser - i et tilfælde af ti er lukket tuberkulose i stand til at gå i åben form;
• med en åben form findes de mykobakterier, der forårsager tuberkulose, i patientens spyt og spyt. En inficeret organisme udgør en stor fare for samfundet, selv i isolation. Som regel påvirker sygdommen først lungerne. Hvis det ikke diagnosticeres tidligt, kan det tage andre former, såsom knogler eller leddets tuberkulose.

Den åbne form for tuberkulose diagnosticeres på forskellige måder. Patienten gennemgår røntgenrøntgen eller bryst røntgen, analyser af hans biologiske materiale eller Mantoux hudtest. For nylig er der fundet en anden metode, der anses for at være lige effektiv - analysen af ​​polymerasekædereaktionen (PCR).

Hvad betyder PCR

I medicinsk praksis er metoder til diagnosticering af denne eller den pågældende sygdom ved at påvise dets DNA eller RNA i menneskekroppen længe blevet anvendt. Dette er netop PCR for tuberkulose. Dette er en højpræcisionsanalyse af blod eller anden biologisk væske, som giver dig mulighed for at identificere bakterier med et minimum af koncentration i det valgte materiale, en enkelt celle er nok. Undersøgelsen udføres ved anvendelse af et særligt polymeraseenzym.

Fordele ved fremgangsmåden

PCR er en diagnostisk metode, der har vist sig fra den bedste side, så den bruges ganske ofte, både i kombination med andre metoder og uafhængigt. Dens fordele:

• de korteste produktionsbetingelser. Undersøgelsen udføres hurtigt, om cirka 5 timer ved anvendelse af PCR kan detekteres tilstedeværelsen af ​​tuberkulose bacillus i patientens biologiske væske. Dette gælder især, hvis du skal udføre øjeblikkelig kirurgisk indgreb, og før det får en præcis diagnose;
• Det sker, at andre diagnostiske metoder er kontraindiceret til patienten. For eksempel kan røntgenbilleder gøres på ingen måde alle. Desuden er billedet ikke altid muligt at foretage en diagnose, især hvis sygdommen er på et tidligt stadium. Ved hjælp af PCR-metoden påvises patogenet straks;
• Enhver patients biologiske væske er egnet til analyse. PCR af urin og spyt til tuberkulose udføres for at identificere pulmonale og ekstrapulmonale former. Undersøgelsen udføres også under anvendelse af patientens spinalvæske for at detektere tuberkuløs meningitis.
• Metoden er helt sikker. For at gennemføre det er det nok at opnå en biologisk væske fra patienten. PCR-diagnostik af tuberkulose hos børn er praktisk og harmløs, da røntgenundersøgelsen kun er tilladt fra 18 år, og Mantoux-testen forårsager undertiden bivirkninger;
• PCR er en meget følsom analyse. Det giver dig mulighed for at identificere Koch-pinde med en minimal koncentration af mykobakterier;
• Ved hjælp af et specielt polymeraseenzym diagnostiseres en lidelse på ethvert stadium, fra tidlig til avanceret;
• denne metode er effektiv til diagnosticering af sygdommens tilbagefald
• Denne metode er et gennembrud i at foretage nøjagtige diagnoser i de tidlige stadier af sygdommen. Dette giver dig mulighed for at starte behandlingen på kortest mulig tid og ødelægge patogener, når de endnu ikke har haft en irreversibel negativ indvirkning på kroppens organer og systemer.

Hvor skal man lave PCR-analyse for tuberkulose

Selv om PCR-analysen for tuberkulose er en yderst effektiv metode til diagnosticering af denne lidelse, anvendes den sjældent alene. Dette er som regel en yderligere metode til at detektere tuberkulose, og den anvendes sjældent. Faktum er, at denne metode er ret dyr.

Offentlige klinikker har ikke mulighed for at købe specielt udstyr til udførelse af PCR-analyse, og regeringen ser ikke punktet i finansieringen af ​​denne artikel, da tuberkulose kan diagnostiseres på andre måder. En sådan undersøgelse udføres oftest i private klinikker, der har råd til at købe det nødvendige udstyr.

Ulemper ved metoden

Den høje pris er ikke den eneste ulempe ved PCR. Ud over de høje omkostninger har metoden andre ulemper og mangler, for eksempel:

• PCR for tuberkulose giver et positivt resultat selv efter behandling, da det tager døde celler som levende bakterier, er denne metode derfor ikke egnet som en kontrolundersøgelse af patienten for at bekræfte hans genopretning;
• tuberkulose baciller muterer, og deres DNA er modificeret, hvilket kan påvirke pålideligheden af ​​resultatet;
• PCR-blodprøver for tuberkulose udføres sjældent, da tilstedeværelsen af ​​Koch-pinde i disse biologiske væsker er yderst vanskeligt at påvise. Dette er kun muligt i de sidste faser eller i sepsis. Normalt tages patientens sputum til diagnose;

Det er værd at bemærke, at det mest nøjagtige resultat er netop indsamlingen af ​​indholdet i patientens mave. Hvis der er mistanke om lungetuberkulose, vil sputumkulturen være den mest effektive måde at diagnosticere sygdommen på. Hvis patienten har en ekstrapulmonær form, så kan der ikke være bakterier i dette bio-miljø. For at bestemme tuberkulose af knogler, ledd osv. Ved hjælp af PCR, er der brug for en anden biologisk væske, for eksempel rygsvæske.

Hvordan er PCR for tuberkulose

Som beskrevet tidligere er essensen af ​​PCR-analyse at detektere patogenens DNA i patientens biologiske væske ved polymerase-reaktionen. De vigtigste faser af metoden:

1. Biologisk materialeudtagning. PCR er ikke kun en hæmostest - den studerede biomasse kan være spyt, urin, cerebrospinalvæske, bronkialvaskvæske, maveindhold, sputum.
2. Derefter udsættes biomassen for høje temperaturer for at ødelægge patogenes DNA struktur.
3. Derefter falder temperaturen gradvist, og en primer er fastgjort til det ødelagte DNA-element.
4. Ifølge resultaterne af molekylær syntese, som tager ca. 30 cyklusser, påvises stammen af ​​en bestemt patogen bakterie eller dets fravær.

Denne analyse kræver god finansiering, så PCR er ikke gjort meget ofte. Denne metode er imidlertid ikke lige, når andre diagnostiske muligheder er forbudte, eller i nødstilfælde, når der ikke er tid til at vente på resultatet.

Sammenfatning

Afslutningsvis kan vi drage følgende konklusioner:

• PCR er en meget præcis analyse, som kan opdage tuberkulose et par dage efter infektion;
• denne analyse er lavet i 3,5 - 5 timer, så i tilfælde af at regningen går døgnet rundt, er det uerstatteligt;
• det er en sikker metode, der ikke har nogen bivirkninger;
• Det anvendes, når andre diagnostiske metoder har vist inkonsekvente resultater, eller deres anvendelse er kontraindiceret.

Men PCR gøres sjældent, da det er en dyr analyse, der kræver installation af specialudstyr. Derudover er det ikke altid informativt, så eksperter bruger denne metode til at opdage tuberkulose som en ekstra.

PCR-analyse (diagnose) af tuberkulose

Tuberkulose eller forbrug - en af ​​de mest populære smitsomme sygdomme i det 21. århundrede. Dets patogener er specielle mikrobakterier - Koch-pinde.

Sygdommen spredes ikke kun til lungerne, men også til hjernen, fordøjelsen, leddene eller rygsøjlen, urinsystemet og huden.

Ifølge WHO lider 10 millioner mennesker hvert år af tuberkulose, hvoraf 3 millioner er dødelige.

Situationen er særligt trist på CIS-landets område, hvor der forekommer tuberkuløse epidemier med jævne mellemrum. Rusland, Kasakhstan, Ukraine er ledet af en trist vurdering af spredningen af ​​denne infektion.

Infektionen overføres let af luftbårne dråber eller gennem fordøjelsessystemet, påvirker vitale organer og kan også hurtigt tilpasse sig polymere stoffer og kemoterapi.

En af de vigtigste faktorer for succesfuld behandling af tuberkulose er rettidig påvisning af infektion.

Diagnostiske metoder

Mennesket har opfundet mange metoder til at genkende en farlig sygdom. Diagnose af tuberkulose er opdelt i instrumental og laboratorium.

I det første tilfælde, en blodprøve for tuberkulose, samt sputum, urin.

Den anden gruppe er en undersøgelse, der bruger røntgen og endoskopi. Instrumentale metoder til diagnosticering af tuberkulose er igen stråling og kirurgi.

Typer af strålingsmetoder til at finde sygdommen

• Fluorografi er en metode til diagnosticering af en sygdom, der er velkendt for alle indbyggere i CIS. Ved hjælp af røntgenstråler undersøges lungerne og hilarlymfeknuderne.
• Bryst røntgen - ligner fluorografi, men en bedre metode til at detektere infektion. Billedet er opnået mere detaljeret og i to fremskrivninger, men denne procedure er cirka seks gange dyrere. Normalt bruges den efter alvorlige mistanker om sygdommen er opstået.
• Beregnet tomografi udføres som en yderligere diagnose, der også anvendes efter en god grund til forekomsten af ​​infektion.

Kirurgiske metoder til diagnose omfatter bronchial endoskopi, samt mediastinoskopi og thorakokopi.

Den første metode er at studere lungens bronchiale træ ved hjælp af en "probe" i dette organ. De resterende to metoder gør det muligt at studere lungens pleural del ved punktering af brystet.

Alle tre metoder er et alvorligt kirurgisk indgreb og bruges oftest i sygdomsprogression.

Laboratorieundersøgelser omfatter:

• Sputumanalyse for tuberkelbacillus.
• Mikroskopisk undersøgelse.
• PCR diagnose af tuberkulose

Hvad er PCR diagnose?

En af de mest avancerede metoder til laboratoriediagnose af infektionsspecialister kalder polymerasekædereaktion.

Denne metode blev udviklet af den berømte amerikanske videnskabsmand Carrie Mullis i 1983, hvor han vandt Nobelprisen.

PCR-analyse er isoleringen af ​​DNA-partikler fra sputum, blod, cerebrospinalvæske, afføring osv. til deres efterfølgende biosyntese.

Ved hjælp af et komplekst molekylærgenetisk studie bestemmes naturen af ​​mikroberne i patientens krop.

Denne form for analyse for tuberkulose udføres i flere faser:

• For det første tages biologiske prøver. Materialer placeres i specielle beholdere og sendes til laboratoriet.
• I forskningscentret opvarmes analyserne til 97 grader. Dette gør det muligt at ødelægge strukturen af ​​genomet af DNA'et af mikroorganismer, som består af flere kæder.
• Temperaturen sænkes specifikt, således at primere (DNA-deltagere, hvorfra biosynteseprocessen begynder) kan forbinde til en hvilken som helst deoxyribonukleinsyrekæde.
• Derefter udføres biosyntesen af ​​molekyler, der kræves til påvisning.

Efter 25-30 gentagne cykler i laboratorieforskningen har lægerne mulighed for at genkende om infektiøse mikroorganismer er til stede i patientens krop eller ej.

Fordele og ulemper

PCR for tuberkulose er den mest moderne diagnostiske teknik. Metoden gør det muligt at opdage infektionen på ethvert tidspunkt med høj pålidelighed. fordele:

• Hastighed - studiet tager ikke mere end fem timer. Resultaterne af testen for tuberkulose-mikrober kan findes inden for 24 timer.
• Sikkerhed - PCR-metoden har ingen alderskontraindikationer.
• Aktualitet - denne teknik giver dig mulighed for at opdage tuberkulose på disse stadier, når sygdommen ikke har nogen symptomer.
• Høj grad af nøjagtighed - hvis der kun er nogle få mikroorganismer i analyserne, vil de blive fundet ved hjælp af en polymerasekædereaktion. Denne teknik gør det også muligt at identificere tuberkulose forårsagende middel.
• Allsidighed - diagnostik bruges ikke kun til påvisning af forbrug, men også til andre sygdomme som chlamydia, gonoré, etc.

På trods af de mange fordele er brugen af ​​denne teknik i den indenlandske lægepraksis undtagelsen snarere end reglen. Der er en række grunde til dette.

Ulemperne ved denne metode er:

• De høje omkostninger ved undersøgelsen.
• Metoden er ikke egnet til dem, der har undergået behandling, da tilstedeværelsen af ​​døde Koch-bakterier kan føre til et falsk positivt resultat.
• I tilfælde af mutation af infektiøse mikroorganismer kan deres genom ikke genkendes ved at foretage en falsk konklusion.
• Det er vigtigt at vælge det rigtige detektionsmiljø. For eksempel vil resultatet af en blodprøve for PCR for tuberkulose (fortyndingsindgang) være negativ, hvis nervesystemet er inficeret.
• Det er ikke altid muligt at anvende denne metode til patienter diagnosticeret med lunge læsioner.

Desuden kræver en sådan analyse for tuberkulose moderne udstyr, som 90 procent af hospitalerne ikke har. I CIS kan sådan analyse udføres af netværket af Invitro-klinikker.

Vilkår for analyse

Anbefalinger til patienter, der gennemgår en sådan test for tuberkulose, varierer afhængigt af den type analyse, de passerer.

Når du tager blod til PCR, er det nødvendigt at afstå fra at ryge en time før proceduren, i to timer - for at udelukke alkohol og fedtholdige fødevarer.

Det anbefales også at afstå fra fysisk anstrengelse, det er også umuligt at tage blod til tuberkulose på tom mave.

Når du tager en vatpind fra munden og næsehulen, kan du ikke spise 2-4 timer før proceduren, ellers vil det ikke være informativt. Også, ikke drik alkohol.

For nøjagtig aflæsning er analysen forbudt at ryge tidligere end en time før proceduren. På aftenen skal du afstå fra at børste tænderne og bruge sprøjter og mundsprayer.

Hvis du har mistanke om tuberkulose i det urogenitale system, skal patienten i 2-3 dage før fødslen udelukke køn, i 2-3 timer før proceduren, ikke gå på toilettet "på en lille måde". Genital organer skal vaskes med rent vand uden særlige midler.

Kvinder rådes til ikke at anvende vaginale tabletter, stearinlys, bolde og også afholde sig fra at teste på kritiske dage.

5 dage før levering, er resultatet nødvendigt at opgive proceduren for kolposkopi, såvel som transvaginal ultralyd,

Hvornår anvendes PCR-diagnostik?

Ikke alle klinikker har en så kompleks diagnose, men læger anvender i stigende grad sådanne forskningsmetoder. Normalt udføres denne form for analyse i særlige situationer.

• I tilfælde af tvivlsomme resultater af manta kan en blodprøve for tuberkulose anvendes.
• I tilfælde hvor patienten har været i kontakt med en inficeret person, men den behandlende læge ikke korrekt kan bestemme diagnosen.
• I tilfælde af akut operation, når det er nødvendigt at finde ud af om det er kort tid, om patienten har denne infektion.
• Når en patient er gravid, når andre forskningsmetoder ikke er sikre nok til en nyfødt baby.

Det skal bemærkes, at denne diagnose anbefales til børn på grund af dens sikkerhed.

Hvis en studerende har kontraindikationer mod en tuberkulinprøve, kan han tage en blodprøve for tuberkulose i stedet for manty ved hjælp af PCR.

PCR analyse for tuberkulose

PCR-analyse for tuberkulose er den mest populære blandt medicinsk forskning inden for denne sygdom.

Men hvordan man advarer dig selv og dine kære fra denne forfærdelige sygdom? Hvordan overføres de nødvendige test til PCR?

Symptomer på tuberkulose og dens forebyggelse

Eksperter siger, at omkring 30% af den samlede befolkning lider af tuberkulose.

Den højeste procentdel af sygdommen er udviklet i uudviklede lande. Dette forekommer oftest som følge af nedsat immunitet hos mennesker.

Sygdommen er en af ​​de ældste. Denne sygdom kan findes i foringen af ​​hjernen, i fordøjelseskanalen, på leddene og rygsøjlen, i urinsystemet og i små områder på menneskets hud.

Eksperter bedst bestemmer den berørte hud. På stedet er der små sæler, som i løbet af tiden stiger i størrelse, bryder ud med hvidlig væske.

Den forårsagende middel til tuberkulose kan oftest afhentes, når man taler til en syg person, når de hoster eller nyser. Sygdommen går som regel uden symptomer eller har en åben form, men PCR-diagnose af tuberkulose gør det muligt at opdage det i de tidlige stadier og i nødsituationer.

Symptomer på sygdommen: langvarig våd hoste, feber, kulderystelser, overdreven svedtendens om natten, et kraftigt vægttab, træthed og svaghed.

Den åbne form af sygdommen er den farligste. En person, der lider af tuberkulose, er i stand til at inficere raske mennesker.

Det vigtigste symptom på lungesygdom er hæmoptyse. Det forekommer i enhver form af sygdommen.

I nogle situationer kan dette føre til blødning fra en persons lunger. Det er meget farligt og kræver akut lægeintervention.

Til forebyggelse og anerkendelse af tuberkulose foreskriver eksperter: en prøve - en tuberkulinprøve, en undersøgelse af biologisk materiale, fluorografi, røntgenstråler og en blodprøve, sputum eller spyt.

Diagnose af sygdommen

Forbedret diagnose af sygdommen - dette er det rigtige og under behandlingen startet. I de fleste tilfælde har de sædvanlige metoder til at påvise patogener ikke altid en effekt og er allerede forældede.

Den vigtigste måde at identificere og diagnosticere lungesygdom på er medicinsk undersøgelse. Brug normalt PCR-diagnostik. Denne undersøgelse blev opdaget ganske nylig i 1983 af den amerikanske biokemist Mullis.

Prøven hos en patient med lungtubberkulose udføres udelukkende i særlige tilfælde, når det er svært at fastslå diagnosen, eller det er umuligt at opdage sygdommen på en instrumental måde.

Polymerasekædereaktion er en pålidelig PCR-metode. Denne analyse gør det muligt at bestemme årsagsagenten for, hvor meget det er i blod-, urin- og rygmarvsvæsker. En sådan lægeundersøgelse er den sikreste.

PCR-analyse giver 100% resultat.

Det har en høj følsomhed, som hjælper med at genkende sygdommen for første gang timer efter infektion, før symptomer på sygdommen optræder. Denne analysemetode giver resultatet inden for få timer efter levering af biologisk materiale. Såning af denne analyse udføres tre gange, men aspiration af den syge mave udføres kun på hospitalet.

Tre kriterier blev udviklet til at bestemme resultaterne: høj nøjagtighed, følsomhed op til 90%, specificitet.

Prøven til PCR anvendes i nogle tilfælde:

1. at diagnosticere lungetuberkulose;
2. bestemme kilden til sygdommen
3. definition af ekstrapulmonal lokalisering
4. diagnose af gentagelse.

Evaluer resultatet, og ordiner den korrekte medicinsk behandling, kan kun en specialist. Det er meget vigtigt for korrekt tildeling arrangement med medicinsk behandling for tuberkulose er opdaget, er det nødvendigt at teste følsomheden af ​​patogenet til anti-hjælpemidler.

En række forskellige tuberkulose medicinske tests

Du kan tage den nødvendige analyse på to måder: Tag blod eller spyt fra en person eller tag en sputum.

Blodprøver ved hjælp af PCR kan være af to typer: ELISA og PCR. En sådan undersøgelse hjælper med at overvåge effektiviteten af ​​medicinsk behandling.

En ELISA hjælper med at finde antistoffer i den menneskelige krop, der modstår tuberkulosemikrober. Denne undersøgelse udføres en gang dagligt. Den største ulempe er dens lave følsomhed, som gør det muligt kun at bestemme en sygdom med lavt infektionsniveau.

Den mest populære og effektive forskning er analysen af ​​mycobacterium tuberculosis. Med hende kan læger let finde DNA fra bakterier i humant blod. Denne metode bruges også til at bestemme antallet af bakterier til at kontrollere patientens behandling for at detektere tidlig tilbagevenden.

PCR spyt er en af ​​de mest avancerede forskningsmetoder. En sådan analyse vil hjælpe med at identificere infektiøse bakterier i spyt. Ved anvendelse af PCR øges antallet af DNA-fragmenter af skadelige mikrober.

Kulturmetoden er beregnet til undersøgelse af humant sputum til påvisning af mikrobakterier.

Forberedelse til PCR-test

Opmærksomhed, du har brug for korrekt forberedelse af spyt til PCR. Hvis alle recepter ikke følges, kan analysen være falsk positiv.

Før du tager testen, er det forbudt at ryge, tage mad og medicin samt at drikke alkohol i 12 timer. Det er forbudt at børste dine tænder, du kan ikke bruge skyllemiddel, mundforfrisker og tandtråd.

Det er forbudt at bruge læbestift og indgå i intime forhold. Tilladt at skylle munden med almindeligt kogt vand;

Denne undersøgelse vil hjælpe med at identificere: herpes, chlamydia, tuberkulose, patogener af lungebetændelse, onkovirus, barolleose, mononukleose, HIV, hepatitis af enhver art, rubella.

Analyse af mycobakterier udføres generelt i de omstridte tilfælde, nemlig hvis vanskeligt at foretage en diagnose, eller havde kontakt med TB-patienter før operationen, for at opdage sygdom. Bruges til undersøgelse af en gravid kvinde, da denne metode er den sikreste for moderen og fosteret.

Nogle gange udføres analysen i en privat klinik, da patienten ikke overholdt reglerne for testning, men samtidig er han bekymret for alle symptomerne. Analysen kan udføres, når specialister ikke er sikre efter at have udført en Mantoux test eller patienten er et barn.

Fordele og ulemper ved medicinsk test til bestemmelse af tuberkulose

PCR er den mest populære og effektive måde at bestemme sygdommen på.

Den største forskel fra andre undersøgelser er et hurtigt og præcist resultat.

Fordelen med denne lægeundersøgelse er, at den kan udføres til urologisk, gynækologisk, onkologisk, infektiøs, hæmatologisk, pulmonal, gastroenterologisk og anden undersøgelse.

Den største fordel ved en sådan medicinsk undersøgelse er, at blodprøver, sputum og spyt er klare på kort tid (det vil tage 5 timer at opdage sygdommen). En sådan lægeundersøgelse tillader, at test udføres, når visse metoder til at studere en sygdom er forbudte eller utilgængelige. Perfekt til at detektere gentagelse hos mennesker.

Takket være denne analyse blev det muligt at foretage forskning for ethvert biologisk miljø. Det er tilladt at tage materiale fra børn. PCR gør det muligt at identificere årsagsmidlet på ethvert stadium af sygdommen. På grund af sin høje følsomhed kan der findes mikrober, selv om kun få bakterier er til stede.

PCR-metoden udvider sine evner. Det bruges også til at bestemme faderskab, til fremstilling af nye gener, mutationer, til krydsning af DNA-elementer og så videre.

Ulemperne ved denne undersøgelse er en dyr undersøgelsesmetode.

Efter medicinsk behandling kan en blodprøve vise tilstedeværelsen af ​​levende eller døde patogener i små mængder, efter en lægeundersøgelse vil det give et positivt resultat.

Bakterier og mikrober kan undergå mutation, hvorefter PCR ikke kan identificere og identificere dem. Derfor kan kun en specialist ordinere en undersøgelse af det krævede miljø, ellers vil en sådan lægeundersøgelse være ineffektiv.

Efter test er der et negativt resultat, men dette udelukker ikke muligheden for, at en person bliver smittet med tuberkulose. En sådan lægeundersøgelse udføres for patienter med svær lungesygdom, når andre undersøgelser ikke giver præcise resultater. PCR vil være nyttig for personer med lunge- og ekstrapulmonal tuberkulose.

Desværre er medicinsk udstyr til at opdage tuberkulosepatogener meget dyrt.

Offentlige hospitaler og klinikker har ikke råd til det, men betalte klinikker tager patienttest og giver klare resultater på kort tid.

PCR diagnose af tuberkulose

Tuberkulose er en specifik infektion, dets fokus kan være i humane væv i årevis og spredes derefter i flere måneder. Dette er en kronisk sygdom, hvis optimale behandlingsregimer er vanskelige at vælge. En af grundene til dette er den sene diagnose, når mykobakterier, mens de er i menneskekroppen, allerede har tilpasset sig mange stoffer.

Hvilke moderne diagnosemetoder eksisterer? PCR diagnostik - hvad er det? Hvordan foregår denne forskning? I hvilke tilfælde er tuberkulose diagnosticeret af denne metode og hvad er dens essens?

Hvad er PCR-diagnostik

Dette er en af ​​de mest moderne metoder til diagnosticering af ikke kun sygdomme, men også påvisning af biologisk materiale. PCR-diagnostik blev opfundet relativt nylig. For cirka 30 år siden i 1983 foreslog en amerikansk biokemi, Carey Banks Mullis, et komplekst opsvingskema for det biologiske materiale af mikroorganismer i et kort segment. Takket være sin opdagelse blev forskeren tildelt den højeste pris - Nobelprisen.

Hvad er det - PCR diagnose af infektioner? Polymerasekædereaktion (PCR) er en diagnose af påvisning af virussygdomme, baseret på genteknologiske metoder. Det er meget udbredt inden for medicinsk mikrobiologi, immunologi og virologi. Metoden er universel og hjælper med at lave en diagnose med en lille mængde materiale. En infektion kan registreres bogstaveligt i de første timer med infektion med det, længe før de første symptomer på sygdommen optræder.

Metoden består i at opnå fra materialet fra en syg person, ikke selve patogenet, men fragmenter af genomet (DNA-partikler), dets biosyntese med efterfølgende bestemmelse til hvilken klasse af mikroorganismer det opnåede genetiske materiale tilhører ved hjælp af molekylære genetiske metoder.

På trods af at dette er en kompleks proces, tager det meget mindre tid end mange biologiske metoder til at detektere smitsomme stoffer. Inden for få timer kan en mikroorganisme detekteres ved hjælp af PCR. For at gøre dette er der ingen grund til at isolere det fra miljøet (blod, cerebrospinalvæske, sputum) og vokse det i lang tid på kunstige næringsmedier. Det er nok, at et lille fragment af DNA-strengen af ​​det infektiøse middel er til stede i det undersøgte materiale.

Reaktionsgrundlaget er muligheden under kunstige betingelser (in vitro) til at skabe syntese af nukleinsyremolekyler af det infektiøse middel.

Hvad er der brug for PCR?

1. Primers er de DNA-segmenter, hvorfra biosyntese eller skabelse begynder.
2. Nukleotider eller komplekse forbindelser, der er grundlaget for et DNA eller RNA molekyle.
3. Polymerasekædereaktion er umulig uden tilstedeværelse af polymerase, hvilket er et enzym, der accelererer PCR.

Trin af PCR-diagnostik

Hvordan udføres molekylær diagnose med PCR? Proceduren er enkel og tager kort tid under hensyntagen til indsamling af materiale.

1. Inden studiet påbegyndes, tager de det nødvendige biologiske materiale - det her er det bronkiske vaskevand, blod, maveindhold, sputum. Den type biologisk materiale afhænger af det formodede patogen.
2. Denaturering eller ødelæggelse af den primære struktur af DNA, som består af to kæder. Kernen i denne fase er at adskille de to kæder under påvirkning af høj temperatur (maksimum er 98 ºC, som ikke varer mere end to minutter).
3. Ved næste fase af PCR, kaldet annealing, reduceres temperaturen med flere grader, således at primeren vil binde til DNA-strengen.
4. Forlængelse, hvor syntesen af ​​de ønskede molekyler finder sted direkte.

Som følge heraf modtager kun 25-30 sådanne cyklusser det nødvendige antal kopier af mikroorganismer DNA, som er lette at genkende.

Kræver PCR diagnose af tuberkulose?

Det er ikke muligt for absolut alle mennesker med mistænkt tuberkulose at udføre PCR, da metoden kræver dyrt udstyr. Ikke alle offentlige klinikker har råd til at købe det. Derudover er det sket, at de sædvanlige metoder til diagnosticering af en infektion i de fleste tilfælde også retfærdiggør sig selv.

Disse omfatter:

• patientundersøgelse, historieoptagelse;
• fuld undersøgelse af personen
• en undersøgelse ved hjælp af Mantoux tuberculin testen;
• radiografi eller fluorografi;
• computerdiagnostik om nødvendigt;
• mikrobiologiske forskningsmetoder: smear mikroskopi og sputum bakteriologisk undersøgelse.

PCR til tuberkulose udføres i særlige tilfælde, når det er svært at foretage en diagnose, eller det er ikke muligt at udføre andre instrumentelle metoder.

På trods af overflod af diagnostiske metoder fortsætter forekomsten af ​​tuberkulose at vokse. I øjeblikket er der ikke kun vækst, men også andre funktioner:

• sygdommen opstår ofte i svær form;
• Antallet af dødelige tilfælde øges;
• mere modstandsdygtig over for moderne kemoterapi er diagnosticerede former for sygdommen.

Folks tilbageholdenhed med at gennemgå rutinemæssige medicinske undersøgelser årligt fører afvisningen af ​​vaccination til spredning af tuberkulose. Under sådanne forhold har vi brug for hurtige, informative og effektive forskningsmetoder, som bør være tilgængelige for børn og voksne. Alle ovennævnte diagnostiske metoder er meget ringere end PCR.

Fordele ved diagnosticering af tuberkulose med PCR

Denne forskning, men ny, har vist sig godt, især i kontroversielle tilfælde, hvor det er umuligt at foretage en diagnose af en række årsager.

Takket være PCR er det meget lettere at opdage det forårsagende middel af tuberkulose i testmaterialet.

Fordelene ved PCR-diagnostik er som følger.

1. Dette er en hurtig analyse. Et lille fragment af DNA-molekylet kan bruges til at diagnosticere om få timer (ca. fem), som med succes anvendes i nødsituationer, når for eksempel før en operation er det nødvendigt at afgøre, om en person er syg med tuberkulose.
2. PCR-analyse er tilladt i tilfælde af, at andre metoder ikke er tilgængelige eller forbudt (til påvisning af lungetuberkulose, nogle gange må du tage flere radiografiske billeder, hvilket vil være en stor dosis stråling).
3. Ved hjælp af PCR undersøges ethvert biologisk miljø for tilstedeværelsen af ​​et patogen i det. For eksempel kan du gennemføre en undersøgelse af cerebrospinalvæske, hvis der er en mistanke om tuberkuløs meningitis.
4. Tilladt PCR-diagnose af smitsomme sygdomme hos børn, fordi metoden er sikker.
5. Tillader dig at identificere patogenet på ethvert stadium af sygdommen.
6. PCR's høje følsomhed gør det muligt at opdage Mycobacterium tuberculosis, selvom der kun er få mikroorganismer i det biologiske materiale.
7. Det er godt at udføre for diagnosticering af sygdomsfornyelse.

Efter alt det læsede PCR virker næsten perfekt diagnostisk metode, som skal gøre alle mistænkt for tuberkulose. Men der er også ulemper her, de skal tages i betragtning.

Ulemper ved PCR ved diagnosen tuberkulose

I vores tid er sådan diagnostik mere sjælden end regelmæssighed. Og for dette er der grund.

1. Dette er en dyr forskningsmetode. På mange klinikker er udstyr til PCR fraværende på grund af dets høje omkostninger, men analysen kan stadig gøres i betalte laboratorier.
2. Umiddelbart efter behandling kan døde mykobakterier eller lever i små mængder stadig være til stede i kroppen (resultatet vil være positivt under PCR-diagnostik), så metoden vil være upålidelig på nuværende tidspunkt, det giver ingen mening at udføre det.
3. Mutationer af mykobakterier resulterer i ineffektiv PCR - en normal DNA-streng-sekvens kan ikke syntetiseres.
4. Det er nødvendigt at vælge det rigtige miljø for undersøgelsen. Blod er kun taget, hvis det mistænkes for at blive inficeret (sepsis). Der er ikke behov for at tage sputum, hvis der er et spørgsmål om tuberkulose i nervesystemets organer. I dette tilfælde vil PCR ikke være i stand til at detektere patogenet, og diagnosen vil være uninformativ.

Indikationer for at detektere tuberkulose ved hjælp af PCR-analyse

PCR-diagnose af tuberkulose udføres oftest i kontroversielle tilfælde. Hvornår refererer læger denne undersøgelse?

1. Hvis det er svært at foretage en diagnose ved hjælp af de sædvanlige tilgængelige metoder, men der var kontakt med en patient med tuberkulose.
2. I det tilfælde, hvor en person ikke kan leveres til en klinik for at gennemføre rutinemæssige rutinemæssige test for tuberkulose, er det lettere at undersøge ham ved anvendelse af PCR, da sputum til testen kan leveres i en krukke, og diagnosen er bekræftet inden for få timer.
3. Hvis en person skal have en nødoperation, og det er presserende at finde ud af om han er syg med tuberkulose.
4. Om nødvendigt er en gravid kvinde også bedre at undersøge for tuberkulose ved anvendelse af PCR, da metoden er sikker.
5. På en betalt basis er enhver, der ikke er blevet diagnosticeret med tuberkulose, blevet bekræftet ved hjælp af bakteriologiske metoder og fluoroskopi. Dette sker, når læsionen i lungerne er umærkelig i det direkte billede, og personen under levering af sputum til undersøgelsen kunne ikke følge anbefalingerne for korrekt samling af materiale. I dette tilfælde er personen bekymret for alle symptomer, der er karakteristiske for lungetuberkulose.
6. Når der er tvivl om resultaterne af Mantoux-testen.
7. Det er bedre at gøre PCR-diagnose af tuberkulose hos børn. Fremgangsmåden er sikker, skaber ikke yderligere strålingseksponering og er effektiv til at detektere vanskeligt at diagnosticere sygdomsformer.

Tidlig diagnose af tuberkulose er nøglen til ordentligt ordineret behandling og nedsættelse af sygdommens spredning. Ofte er velkendte sygdomsdetekteringsmetoder ikke altid effektive. Derfor er PCR i dag en af ​​de mest pålidelige og sikre måder at påvise infektion i de tidlige stadier af dens udvikling.