Hvad er PCR-analysen for tuberkulose

En innovativ metode til påvisning af mikroorganismer, opfundet af forskeren Cary Mullis i slutningen af ​​det sidste århundrede - PCR analyse. Han modtog for hans skrifter Nobelprisen. Fuldt kaldes denne proces polymerasekædereaktion. Den består i genoprettelsen af ​​typen af ​​mikroorganisme i det tilvejebragte biomateriale ved anvendelse af korte DNA-fragmenter. Dette giver dig mulighed for at opdage infektion i et tidligt stadium og starte behandlingen straks uden at føre til alvorlige symptomer og komplikationer.

Hvad er analysen

Diagnose ved PCR er at opnå segmenter af patogen DNA fra biologisk materiale og justere dem i den korrekte kæde. Dette gør det muligt at identificere mikroorganismen, som cellerne hører til.

Proceduren udføres i tre faser:

1. Indsamling af biologisk materiale.
2. Identifikation og tilpasning af DNA.
3. Anerkendelse af infektion.

Denne undersøgelse kræver specielt medicinsk udstyr - amplificerende. Den er udstyret med et kamera, hvor det studerede materiale interagerer med høj temperatur og kemiske enzymer. Ved udgangen har laboratorietekniker en lang DNA-kæde af det forårsagende middel, hvis der er en i menneskekroppen.

Sådan forbereder du dig på diagnosen

PCR-analyse er en kompleks gentekniske proces, som kræver nøjagtighed og alvorlighed fra både laboratorieteknikere og patienter. En stor rolle i rigtigheden af ​​analyseresultaterne spilles af forberedelsen til proceduren, det vil sige den korrekte samling af materiale.

De vigtigste kilder til information om sygdommen er:

Andre valgmuligheder kan anvendes, væsker, om nødvendigt, tages til analyse fra forskellige organer.

For patienten er der visse regler, der skal følges før proceduren. Hvis der er en blodprøve, er det forbudt i 8 timer før indsamling:

• spise mad;
• at ryge
• drikke alkoholholdige drikkevarer;
• tag medicin indvendigt.

Om aftenen, inden samling af sputum, er stoffet beruset til at tynde det og lette ekspektorering. Om morgenen samles materialet efter grundig hygiejne i mundhulen.

Urin samles i en steril krukke om morgenen på tom mave efter vask, inden der tages medicin.

Hvis en person tager antibiotika, skal analysen af ​​polymerasekædereaktionen udskydes, ellers er resultatet af PCR ikke pålideligt. Sputum eller blod skal doneres to uger efter afslutningen af ​​behandlingsforløbet.

Hvordan virker processen med at identificere bakterier

Kort fortalt er processen at isolere en del af DNA'et. Anvendelsen af ​​moderne metoder til genteknologi giver os mulighed for at bestemme typen af ​​mikroorganismer. Desuden behøver materialet til analysen en lille mængde.

Teknisk set er dette en meget kompliceret procedure, men det tager mindre tid end klassiske bakteriologiske undersøgelser. Patogener behøver ikke at være isoleret fra biomaterialet, der er ikke behov for at dyrke dem i flere uger. På leveringsdagen kan patienten allerede vide resultatet af hans analyse.

Hele processen med PCR fortsætter i trin:

1. Arbejdet er i gang med den primære form for DNA, som ved høj temperatur tæt på 100 grader er opdelt i to kæder.
2. Temperaturen falder, trådene er forbundet til nukleinsyrefragmenterne - primeren.
3. Forlængelse forekommer - syntese af molekylær struktur.

Hele sessionen består af omkring tredive sådanne procedurer, idet man gentager en cyklus som en kædereaktion. Dette er nødvendigt for at skabe antallet af celler, hvor de resulterende bakterier bliver genkendelige.

Konklusion af undersøgelsen

Beskrivelse af resultatet af PCR (polymerasekædereaktion) giver en TB-læge, den er enkel eller implementeret. I det første tilfælde vil beskrivelsen kun indeholde oplysninger om tilstedeværelsen eller fraværet af Koch-pinde. Hvis dekodningen er detaljeret, kan du finde ud af sygdommens omfang, dets fokus. Ifølge disse kriterier er det muligt at bestemme den mest hensigtsmæssige behandling for tuberkulose i hvert enkelt tilfælde.

Polymeraseanalysen af ​​kædereaktionen skelner ikke mellem levende og døde patogener og taler kun om deres tilstedeværelse. Derfor er det fornuftigt at videregive en anden test for tuberkulose kun 3-4 uger efter behandlingsforløbet ordineret af lægen.

Hvis resultatet er positivt, er indskriften "Mycobacterium tuberculosis" sat til konklusion. Hvis der er et negativt resultat, er der ved siden af ​​bakteriens biologiske navn et mærke "ikke detekteret". Analyser kan være falske positive. Dette sker sjældent - i tilfælde af krænkelse af teknikken til udførelse af PCR-undersøgelser eller i nærvær af ikke-levedygtige mikroorganismer. Den endelige konklusion om sygdommen kan kun foretages af en TB-læge.

Fordele ved fremgangsmåden

PCR diagnostik af tuberkulose er blevet populær af mange grunde. Det har mange fordele, herunder:

1. Nøjagtighed af forskningen. Ved analyse af teknologi er det muligt at identificere bakterier, selvom de er til stede i små mængder.
2. Hurtigt resultat. Hele processen fra at samle materialet til den færdige konklusion tager cirka 5 timer. Sammenlignet med såning må det vente op til flere uger.
3. Fuld sikkerhed for personen, i modsætning til fluorografi med sin stråling.
4. Eventuelt flydende biomateriale anvendes. Til PCR ved lungtubberkulose giver sputum mest nøjagtige oplysninger; i tuberkuløs meningitis tages en prøve fra rygmarven. En blodprøve hjælper med at identificere lokale infektionsfokuser.
5. Sensibiliteten af ​​bakterier til antibiotika testes. Dette giver dig mulighed for at ordinere den korrekte behandling.
6. Tidlig diagnose. Du kan lære om sygdommens tilstedeværelse før symptomerne begynder.

Ud over de positive aspekter er der også ulemper. Den vigtigste er prisen. Analyse af PCR er ikke billig, hvilket er forbundet med brugen af ​​dyrt udstyr. En anden ulempe er behovet for at vente på tidspunktet for en retest efter et behandlingsforløb for tuberkulose. Nogle gange er testresultatet falskt positivt. Dette sker på grund af bakteriel mutation.

Når PCR er nødvendigt

PCR til pulmonal tuberkulose har ingen kontraindikationer og er helt sikkert. Derfor er der visse situationer og sygdomme, når dette er den eneste mulighed for forskning.

Disse omfatter:

• graviditet;
• kontakt med en tuberkuløs patient
• vanskeligheder med at bestemme diagnosen lungesygdom
• undersøgelse før operation
• allergisk reaktion;
• HIV infektion;
• ung alder.

Du kan bruge metoden til PCR i den retning, der udstedes i phthisiology, samt en børnelæge, læge eller pulmonologist.

Hvad kan erstatte PCR diagnosen af ​​tuberkulose

Andre typer undersøgelser er ikke blevet forældede, men bliver fortsat brugt. De anvendes i tilfælde, hvor det ikke er muligt at udføre PCR for tuberkulose. Desuden er den moderne metode ikke ideel, undertiden er dens indikatorer stillet spørgsmålstegn ved og kræver rechecking.

Følgende metoder hjælper med at bestemme forekomsten af ​​tuberkulose hos en person:

• tuberkulin diagnose (Mantoux);
• røntgenbillede af brystkassen;
• afprøvning af biologisk materiale til flora
• røntgen af ​​lungerne.

Disse undersøgelser er gratis og tilgængelige for alle. Men de har deres ulemper:

• Tuberkulose testen forårsager allergier. Kontraindiceret i hudsygdomme.
• Røntgenundersøgelser ledsages af stråling, som ikke gælder for børn, personer med immundefekt og gravide kvinder.
• Bakteriologiske analyser tager meget mere tid, resultatet kan ventes op til en måned.

Alternativer er ikke en garanti for et hundrede procent korrekt konklusion. De bruges oftest til forebyggende formål. Diagnose af tuberkulose ved hjælp af PCR giver den mest pålidelige information. Hvis det er muligt, er det bedre at bruge det.

Særlige egenskaber ved tuberkulose hos børn og behovet for PCR

Barnet skal være særligt beskyttet mod sygdommen - tuberkuloseinfektion kan forårsage alvorlig skade på kroppen med en endnu ikke dannet immunitet.

Efter at være kommet ind i Kochs snor i børns organisme går udviklingen af ​​sygdommen igennem følgende faser:

• Latent. Det varer op til et år uden at give nogen symptomer.
• Forgiftning. Påvirker den generelle sundhed. Synes svaghed, apati, mangel på appetit, døsighed og nedsat præstation. Konstant lidt forhøjet temperatur.
• Den primære form af sygdommen. Tuberkulose er lokaliseret og danner fokus for sygdommen. Barnet har hoste, åndenød, hovedpine, hævede lymfeknuder.
• Tuberkulær bronchoadenitis. Symptomer er smerter i skulderbladene, hoste med varierende tonehøjde, hvæsende vejrtrækning.

Normalt injiceres tuberkulin for at identificere infektionen under et barns hud. Hvis denne type undersøgelse er kontraindiceret, er PCR for tuberkulose en uundværlig mulighed for diagnose. Børn tager normalt en blodprøve, men sputum opsamles om nødvendigt. Ved den mindste mistanke om forekomsten af ​​tuberkulose udføres yderligere undersøgelser for at sikre et positivt resultat og straks begynde behandling på et tidligt tidspunkt, hvilket forhindrer sygdommens udvikling.

Moderne forskningsmetoder er altid hurtigere og mere pålidelige. Det er synd, at der på grund af det dyre udstyr til at lave sådanne tests er mulighed for ikke i alle medicinske institutioner og lokaliteter. Hvilken måde at gennemføre undersøgelsen vælges normalt af lægen, men patienten har ret til at vælge. Hvis du skulle tage en PCR-test, fortæl os om det i kommentarerne. Hvis artiklen var nyttig for dig, kan du dele den i sociale netværk - måske vil det hjælpe dine venner.

Hvad er PCR for tuberkulose og hvordan man laver en test?

PCR til tuberkulose er ordineret, når det er umuligt at foretage en diagnose, eller det er umuligt at foretage andre undersøgelser. Analysen gør det muligt at identificere Kochstaven i de tidligste stadier og starte behandlingen i tide.

Beskrivelse af PCR for tuberkulose

Indikationer for PCR-diagnostik

Typer af PCR til tuberkulose

Forberedelse til analysen

Hvordan er PCR for tuberkulose

Fortolkning af undersøgelsesresultater

Særlige egenskaber ved PCR for tuberkulose hos børn

Hvor meget koster PCR for tuberkulose?

Kommentarer og anmeldelser

Beskrivelse af PCR for tuberkulose

PCR (polymerasekædereaktion) for tuberkulose er en nøjagtig analyse, som kan opdage en Koch-stav om nogle få timer. Diagnostik er baseret på gentekniske metoder. Læger isolerer DNA-cellen ved hjælp af genmolekylære test for at bestemme typen af ​​patogener.

Fordele ved fremgangsmåden

• giver dig mulighed for at identificere patogenet i de tidlige stadier uden manifestation af synlige symptomer;
• diagnostik har ingen kontraindikationer og er tilladt for børn
• forskning kan udføres ved at tage den mindste mængde materiale.
• universel forskning af biomaterialer;
• Undersøgelsen er effektiv til bestemmelse af sygdommens gentagelse.

Ulemper ved metoden

Sammen med fordelene har PCR-undersøgelser også ulemper.

De vigtigste er:

1. Undersøgelsen er ikke overalt, du kan passere. Da udstyret til en sådan diagnose er dyrt, installeres den i betalt laboratorier.
2. PCR for tuberkulose kan give et positivt svar, hvis det detekterer døde mykobakterier, for eksempel efter behandling.
3. Mutationer af patogener reducerer signifikant effektiviteten af ​​PCR-metoden, da DNA-tråde ikke er i stand til sekventiel syntetisering.
4. Behovet for omhyggeligt at vælge biomateriale til analyse.

Indikationer for PCR-diagnostik

Send til undersøgelsen for følgende indikationer:

1. Hvis der var mindst en enkelt kontakt med en patient med tuberkulose, og det er svært at identificere sygdommen ved hjælp af standardprøver.
2. Der er situationer, hvor det ikke er muligt at bringe en person til røntgenstråler eller andre undersøgelser. I sådanne tilfælde er det meget lettere at levere sputummet.
3. Analysen er udpeget på tærsklen til den kommende operation, når det er nødvendigt at afgøre, om en person er syg eller ej.
4. Hvis patienten har et tvivlsomt resultat af Mantoux-reaktionen.
5. Tildel til gravide og børn for at undgå udsættelse for røntgenstråler.

Typer af PCR til tuberkulose

Valget af biomateriale til screening for tuberkulose bør udpeges individuelt.

For diagnosticering af PCR for tuberkulose kan der tages prøver:

Blodprøve

Funktioner af blodprøven for tuberkulose:

1. Udført i tilfælde, hvor anden diagnostik ikke er egnet eller kontraindiceret. For at foretage en korrekt diagnose skal du tage mere end et røntgenbillede. Overdreven eksponering er ikke sikker for kroppen, så det er meget lettere at tage blod fra en patient.
2. Lægen kan også give retning til blodet, når de modtager kontroversielle resultater efter fluorografi.

Spyt analyse

1. Analysen af ​​spyt er mindre populær og informativ end andre undersøgelser, da tuberkulose ikke påvirker spytkirtlerne. Derfor vil resultatet i de fleste tilfælde være negativt.
2. Metoden sigter mod at identificere pulmonale og ekstrapulmonale former.
3. Hvis prøvenes farve ikke ændres under reagensens virkemåde, betyder det, at der ikke er patogener. Hvis der opstår en mistanke om en sygdom, udføres der et yderligere kompleks af analyser.

Sputumanalyse

Sputumanalyse er den mest informative til detektion af tuberkulosepatogener. Prøver tages flere gange, som regel er tre gange tilstrækkeligt. Dette eliminerer muligheden for fejl ved at opnå materiale af dårlig kvalitet.

Hvis en person er inficeret med tuberkulose, frigøres sputum i små mængder sammen med hosten. Hos patienter i sygdommens avancerede stadium udskilles mucus med blodige pletter.

Det anbefales ikke at tage sputum til undersøgelse, hvis patienten har mistanke om knogler eller nerves tuberkulose.

Urinanalyse

Urinalyse er en af ​​måderne til at opdage ekstrapulmonale former for sygdommen: nyretuberkulose og urinveje.

I tilfælde af sygdomens pulmonale form er den generelle analyse af urin praktisk talt uinformativ, da der ikke observeres nogen udpræget patologiske ændringer.

Fra videoen finder du ud af hvilken læge diagnosen tuberkulose er. Filmet af kanal tuberkulum. ru.

Forberedelse til analysen

Når du tager en blodprøve, skal PCR følge nogle regler for at opnå et pålideligt resultat:

• Det anbefales at tage en analyse på en tom mave;
• bør udelukke alkohol på tærsklen til undersøgelsen
• du skal afslutte at tage antibiotika 15-20 dage før analysen;
• Det anbefales at afstå fra at ryge i en time før blodindsamling.

Når du tager en sputum til eksamen, anbefales det også at følge nogle regler:

• Materialet opsamles om morgenen, og derfor børler de deres tænder og skyller mundhulen grundigt.
• hvis sputum ikke bevæger sig godt, anbefales det at tage en ekspektorant om aftenen eller indånde;
• Det er nødvendigt at holde op med at tage antibiotika 15 dage før undersøgelsen.

For at opnå et pålideligt resultat af urinanalyse anbefales patienten at overholde følgende regler:

• Materialet skal indsamles om morgenen
• på tærsklen anbefales det ikke at spise mad, der kan ændre farven på væsken (rødbeder, blåbær og andre);
• Stop med at tage antibiotika i 15 dage før undersøgelsen.

Hvordan er PCR for tuberkulose

Egenskaber ved materialeindtaget:

1. En blodprøve tages fra en patient om morgenen fra en vene i laboratoriet.
2. Til levering af sputum på slim er det nødvendigt at nødvendigvis fra strubehovedet, og fortrinsvis uden en stor mængde spyt. Hendes patient skal spytte i en speciel steril beholder og derefter overlevere til studiet.
3. Læger tager et skrab med et specielt værktøj fra kindens slimhinder.
4. Urin lejes i en speciel beholder. Tag midtdelen af ​​morgendelen.

Molekylærgenetisk reaktion ved PCR udføres under anvendelse af en særlig anordning kaldet en forstærker. At studere de nødvendige DNA-segmenter, som begynder syntesen af ​​molekyler.

Teknikken består af fire faser:

1. Indledningsvis opsamles det krævede biomateriale til forskning (blod, sputum og spyt).
2. Derefter opvarmes prøven ved en temperatur på op til 98 grader og ikke mere end to minutter. Således ødelægges den primære form af DNA-genetik og to kæder dannes.
3. Herefter kommer annealing eller sænkning af temperaturen, som grunden binder til DNA-strengen.
4. Det sidste stadium kaldes forlængelse. Dette er syntesen af ​​molekyler, hvilket fører til det endelige resultat.

Du skal bruge 25-30 sådanne cyklusser for at få et bestemt antal kopier af virusets DNA. Sygdomsfremkaldende midler bestemmes af dem.

Informationsindholdet og pålideligheden af ​​PCR-diagnostik er 100%.

Fortolkning af undersøgelsesresultater

Produktionstiden for analysen er ca. 5-6 timer.

Diagnostik ved PCR-metoden giver 2 varianter af resultater:

1. Fundet. I det materiale, der blev undersøgt, blev DNA'en af ​​det tuberkuløse middel detekteret. Sandsynligheden for infektion er 97%. Sådanne patienter sendes hurtigt til en TB dispensary, hvor behandling vil blive udført.
2. Ikke fundet. Et negativt svar indikerer fraværet af det forårsagende middel.

Hvis resultatet er positivt, udfører lægen en detaljeret afkodning, som bestemmer sygdommens stadium og fokus.

Fotogalleri

Særlige egenskaber ved PCR for tuberkulose hos børn

PCR er foreskrevet, hvis resultatet af en Mantoux-test er usikkert eller i det mindste mistanke om infektion. At give proceduren er sikker for børn.

PCR diagnose af tuberkulose hos børn og voksne: indikationer for

Verdenssundhedsorganisationen anerkendte for 20 år siden, at udbredelsen af ​​tuberkulose var ude af kontrol og nåede omfanget af en epidemi. Siden da har situationen ikke forbedret sig. Mere end en million tilfælde af sygdommen diagnosticeres hvert år, hvoraf næsten en fjerdedel er dødelig. I løbet af det sidste årti er forekomsten blandt børn steget, de fleste former for sygdommen lænner ikke til standard antibiotikabehandling.

I dag er en af ​​de globale opgaver for medicin udviklingen af ​​sådanne diagnostiske metoder, som vil gøre det muligt at identificere patologi inden begyndelsen af ​​udprøvede kliniske symptomer. En af dem er polymerasekædereaktionen (PCR) til tuberkulose, som hjælper med at opdage Koch-sygdomsfremkaldende pinde i blod, sputum og andre biologiske væsker.

Diagnose af tuberkulose

Screeningstest er rettet mod at opdage patienter, bærere af tuberkulose og forebygge spredning af infektion i samfundet. For børn under 14 år er Mantoux testen massivt brugt. Dette er en immunologisk test, hvor en dosis tuberkulin injiceres subkutant - en kompleks blanding af det genetiske materiale af flere typer mycobakterier. Udseendet af en udtalt reaktion indikerer en aktivt forekommende infektiøs proces.

Til forebyggende undersøgelse hos voksne ved hjælp af fluorografi eller røntgenstråler. Disse metoder hjælper med at visualisere patologiske læsioner i lungevæv. Det forårsager imidlertid vanskeligheder med at differentiere tuberkulose fra en anden organisk patologi (maligne og godartede neoplasmer, inflammatoriske processer, parasitære invasioner, professionel lungeskader).

For at præcisere strukturen og størrelsen af ​​det patologiske fokus kan der være behov for yderligere instrumentelle undersøgelser:

• målrettet radiografi;
• computertomografi;
• magnetisk resonans billeddannelse.

Metoder til diagnose af tuberkulose

I tilfælde af tvivlsomme resultater og til udnævnelsen af ​​passende terapi er der behov for mere nøjagtige diagnostiske metoder, som gør det muligt at isolere patogenet. Mikroskopisk og bakteriologisk undersøgelse af sputum bruges til at bekræfte lungerformer af tuberkulose i lang tid.

I de seneste år er forekomsten af ​​mycobacterium i forskellige organer og systemer - nyrerne, knoglerne, tarmene, huden - blevet hyppigere. For at identificere disse former for tuberkulose kan ultralydundersøgelser, urin og fæceskultur, endoskopiske undersøgelser anvendes.

PCR-diagnostik til tuberkulose hjælper med at bekræfte tilstedeværelsen af ​​Koch-pinde i blodet samt dens følsomhed overfor visse lægemidler. Dette er en meget effektiv metode baseret på påvisning af det bakterielle genetiske materiale i forskellige biologiske væsker.

Specificitet og indikationer

Polymerasekædereaktion er en yderst følsom mikrobiologisk diagnostisk metode, der er baseret på genteknologiske principper. For at bekræfte tilstedeværelsen af ​​et patogen i et biologisk materiale er det tilstrækkeligt at detektere et unikt nukleinsyrefragment for det. PCR for tuberkulose kan detektere bakterier i blodet, sputum, urin.

I øjeblikket udviklede flere analysemetoder. De mest populære blandt dem er følgende:

• Real-time PCR;
• mikrofluidisk teknologi;
• sekventering og pyrosequencing.

Real-time PCR

Laboratorier bruger oftest realtids-polymerasekædereaktion, da det reducerer antallet af falsk-positive resultater, og analyseprocessen selv tager kort tid.

I betragtning af det store antal skjulte former for sygdommen og ineffektiviteten af ​​standarddiagnostiske metoder anvendes PCR i stigende grad. Formålet med denne analyse er vist på:

• identificere mistænkelige områder på røntgenstrålen;
• tvivlsomme resultater af tuberkulinprøve
• umuligheden af ​​at foretage mikroskopisk og bakteriologisk analyse af sputum hos personer i alvorlig tilstand
• udføre kirurgiske indgreb, når det er nødvendigt at hurtigt sikre, at der ikke er nogen infektion;
• afvisning af brugen af ​​fluorografi, røntgenstråler eller computertomografi (fx ved gravide kvinder og amning i tilfælde af overskydende strålingseksponering)
• mistanke om ekstrapulmonal tuberkulose (det anbefales at ikke kun blod, men også slim anvendes).

PCR-diagnostik af tuberkulose har vist sig i undersøgelsen af ​​børn på grund af manglende yderligere eksponering og hurtige resultater.

Forberedelses- og analyseprocedure

Særligt forberedelse til blod-PCR er ikke påkrævet. For at undgå komplikationer ved blodprøveudtagning og for at opnå materiale af høj kvalitet skal følgende generelle regler følges:

• analyse skal tages om morgenen ikke tidligere end 2 timer efter at være vågnet
• Det bør begrænse indtaget af fede og stegte fødevarer en dag før blodprøveudtagning;
• Afstå fra at spise, te og kaffe i 8-9 timer, det er tilladt at drikke rent vand
• Røg ikke i mindst 3-4 timer.

I tilfælde af permanent medicin (hormoner, antikoagulantia, antiinflammatoriske lægemidler, antibiotika, blodfortyndere), bør du underrette laboratorieassistenten om dette.

Ved levering af sputum bør du børste dine tænder godt og skylle munden flere gange. Saml materiale i en steril beholder. For bedre resultater kan der tages en slim eller mucolytisk middel om aftenen.

Diagnosen selv består af flere trin.

Hegn materiale. Det kan udføres i laboratoriet og eksternt. Nogle typer af materiale patienten indsamler uafhængigt (urin, slim).

Destruktionen af ​​strukturen af ​​nukleinsyrer (denaturering af DNA og RNA molekyler). For at gøre dette opvarmes testmaterialet til en temperatur på 98 grader og holdes i flere minutter. Som følge heraf dannes den dobbelte helix, enkeltstrengede molekyler.

Joke. Efter tilsætning af en primer (en kort del af nukleinsyre), falder temperaturen med flere grader, polymerase aktiveres.

Elognatsiya. Temperaturen bringes til det optimale niveau, enzymaktiviteten når et maksimum, og den anden kæde er afsluttet i overensstemmelse med Chargaff-komplementaritetsreglen.

For at afslutte undersøgelsen er det nødvendigt at syntetisere det krævede antal DNA-molekyler - ca. 50 cyklusser af den ovennævnte reaktion. Det tager ca. 2-3 timer. Et positivt resultat af reaktionen indikerer ikke altid det aktive stadium af sygdommen, men er en indikator for tilstedeværelsen af ​​en mikroorganisme i kroppen.

Fordele og ulemper ved fremgangsmåden

I sammenligning med andre mikrobiologiske metoder tager PCR ikke lang tid at opdage Mycobacterium tuberculosis ved hjælp af PCR, resultatet kan opnås på testdagen.

En anden fordel er analysens høje specificitet, som gør det muligt at påvise patogenens tilstedeværelse med en nøjagtighed på 90-95% i næsten ethvert biomateriale (blod, urin, afføring, cerebrospinalvæske, sputum, bronchusspyling).

Der er imidlertid flere ulemper med metoden:

• en temmelig høj procentdel falske positive resultater (op til 15%), der er forbundet med påvisning af ikke-levende mikroorganismer;
• i nogle tilfælde kan du springe over sygdommens kendsgerning, da Mycobacterium tuberculosis ofte udsættes for mutationer, og dets genetiske materiale ændres;
• lav effektivitet ved undersøgelse af personer med immundefekt
• høje omkostninger ved forskning, behovet for dyrt udstyr og reagenser.

Hvad kan erstattes?

I betragtning af de forskellige former for tuberkuloseinfektion, for en mere præcis diagnose og valg af behandling er det nødvendigt at kombinere flere diagnostiske undersøgelser:

Obligatorisk analyse for børn er Mantoux testen. Hvis indførelsen af ​​tuberkulin (genetisk materiale af mycobakterier) forekommer en udtalt reaktion, kan det antages infektion med en tuberkelbacillus.

Røntgenmetoder kan bruges til at visualisere det patologiske fokus. Ved diagnosen ekstrapulmonal tuberkulose anvendes endoskopiske metoder med samtidig biopsi:

• bronkoskopi hjælper med at identificere læsioner i strubehovedet, luftrøret, bronchi;
• koloskopi - tarm;
• cystourethroskopi - organer i urinsystemet
• hysteroskopi - kvindelige kønsorganer. Disse metoder er ikke specifikke, for at foretage en nøjagtig diagnose bør patogenet identificeres.

Generelle kliniske tests vil bidrage til mere specifikt at bestemme kroppens tilstand. En fuldstændig blodtælling med leukocytformel er påkrævet.

En stigning i antallet af neutrofiler med reduceret lymfocytniveau og en stigning i erythrocytsedimenteringshastigheden (ESR) indikerer en aktiv inflammatorisk proces med bakteriel etiologi. At udelukke skade på organerne i urinsystemet ved hjælp af en generel urinalyse og kultur for sterilitet.

PCR er i øjeblikket tilgængelig i de fleste private laboratorier. Dette kræver ikke kun højt kvalificerede specialister, men også dyrt udstyr, et stort antal reagenser. Derfor er brugen af ​​denne metode begrænset på trods af dens høje nøjagtighed og specificitet.

Polymerasekædereaktion (PCR) til tuberkulose

Tuberkulose er en af ​​de farligste sygdomme, som menneskeheden har lidt i hundreder af år. Selvom forskere var i stand til at identificere den forårsagende agent og opfinde antibiotika for at eliminere det, er behandlingen ikke altid vellykket. Hovedårsagen er en lang periode med latent eller latent sygdomsform, som kan vare i flere år. Sen diagnostik reducerer patientens chancer for genopretning og fuld levetid betydeligt.

Hvad er PCR?

Til påvisning af mycobacterium tuberkulose i kroppen i over hundrede år er Mantoux test blevet anvendt succesfuldt. Andre metoder har vist sig godt: bakteriologisk kultur i kunstigt medium, smearmikroskopi, ELISA. Et stort antal komplikationer og falskpositive resultater samt varigheden af ​​nogle metoder krævede imidlertid indførelsen af ​​nye teknologier i diagnosticeringsmetoden. Et stort gennembrud inden for mikrobiologi var fremkomsten af ​​PCR-analyse for tuberkulose. I adskillige årtier har det vist sin effektivitet og anvendes meget til differentialdiagnosen af ​​forskellige former for tuberkulose.

PCR-analyse for tuberkulose eller polymerasekædereaktion er en metode til at detektere DNA fra bakterier eller deres fragmenter, hvilket er baseret på en stigning i nukleinsyremolekyler under virkningen af ​​enzymet DNA-polymerase. Til et positivt resultat er kun et molekyle af det patogene DNA tilstrækkeligt, og derfor anses denne metode for at være meget følsom. Diagnose af OCP i tuberkulose er mere effektiv end at dyrke mykobakterier i et kunstigt miljø, da det i modsætning til kulturmetoden gør det muligt at skelne mellem vildt og vaccinestammer vaccineret med BCG. Dette undgår falske positive og gør diagnosen mere præcis.

Fordele ved PCR

PCR-diagnostik til tuberkulose gør det muligt at opdage en Koch bacillus i et biologisk miljø hos en organisme med bestemmelse af deres kvantitative sammensætning selv i sygdommens indledende fase, når mycobakterier er i dvaletilstand. Diagnose af sygdommen i latent fase gør det muligt at påbegynde profylaktisk behandling i tide for at forhindre udviklingen af ​​foki for betændelse i lungerne og udseendet af komplikationer i andre organer og systemer. Desuden har PCR-testen for tuberkulose flere fordele:

• høj specificitet - 90-100%;
• høj hastighed - fra 4 timer til 2 dage;
• høj følsomhed, især i immundefekt
• differentiel diagnose.

Den største fordel ved metoden er, at CRC-diagnosen af ​​tuberkulose hos børn gør det muligt at skelne den formidlede form af sygdommen fra det begrænsede brændpunkt, selv med negative resultater fra andre test. Differentiel test giver dig mulighed for at vælge det rigtige behandlingsregime og øge effektiviteten af ​​terapien.

Analysens høje specificitet opnås ved at eliminere krydsreaktioner med andre nukleinsyremolekyler, og høj følsomhed gør det muligt at detektere mycobakterier selv i et lille volumen af ​​det opsamlede materiale. PCR-metoden for sputum til tuberkulose har størst pålidelighed, dets specificitet når 100% sammenlignet med undersøgelsen af ​​andre biologiske materialer.

En særlig mekanisme af PCR giver rigelige muligheder for påvisning af Koch-pinde hos immunkompromitterede patienter. Ifølge analysemetoden registrerer reaktionen antigener, så det er ligegyldigt, om kroppen producerer antistoffer mod patogenet eller ej. Det er således muligt at diagnosticere ekstrapulmonale former for sygdommen og avancerede tilfælde hos patienter med unøjagtigheder i immunsystemet, hvilket ikke er muligt ved hjælp af andre metoder.

Ulemper ved metoden

På trods af analysens mange fordele og høj følsomhed kan PCR for tuberkulose give et falsk negativt resultat. Da der tages en meget lille mængde biomateriale til diagnose, er det ikke udelukket, at patogen "skjuler" i en celle eller et inflammatorisk fokus, og ikke udløses udenfor.

Sensibiliteten af ​​denne metode hos børn er 25-80%. I en randomiseret undersøgelse hos en gruppe patienter med klinisk dokumenteret diagnose gav en PCR-blodtest for tuberkulose et positivt resultat hos kun 50% af patienterne. I denne henseende er det ikke muligt at erstatte en diagnostisk metode med en anden, når der testes et barn for patogene mykobakterier. For fuldt ud at verificere fraværet af infektion er det nødvendigt at gennemføre en omfattende undersøgelse på flere måder på en gang.

Indsamling proces

Hovedbetingelsen for pålideligheden af ​​PCR-diagnostik er overholdelse af reglerne for indsamling af biologiske væsker til analyse. Forurenet eller ukorrekt opsamlet materiale kan forårsage ukorrekte resultater. Den mest almindelige er analysen af ​​sputum, blod og urin, men for en dybere differentialdiagnose kan du tage prøver fra indholdet i maven, synovialvæske, cerebrospinalvæske, bronchialspylingsvæske, sæd, prostataekstraktion.

Urin-PCR til tuberkulose tages om morgenen efter ekstern kønshygiejne ved at urinere i en steril beholder. Under proceduren er det vigtigt ikke at røre beholderens indre vægge for at forhindre indtrængen af ​​tredjeparts mikroorganismer. Kvinder, der lever regelmæssigt sexliv, bør helt sikkert lægge en tampon i vagina for at undgå udledning fra tredjepart.

En blodprøve tages om morgenen på tom mave, og PCR af sputum til tuberkulose kan foretages på ethvert tidspunkt af dagen med obligatorisk forudgående mundhygiejne. Dette er nødvendigt for at fjerne madrester, der kan komme ind i beholderen. Ved ekspektorering af sputum er det vigtigt at forhindre indtagelse af spyt og slim fra nasopharynx i beholderen, hvilket kan fordreje analysedataene.

Undersøgelsen af ​​indholdet i maven udføres på sygehuset om morgenen, mens sputumet sluger natten over er i maven. For at detektere mycobacterium tuberkulose gør denne metode tredobbelt såning, hvilket sandsynligvis gør det muligt at isolere en Koch bacillus.

Afkodningsresultater

Kvalitativ analyse af PCR giver 2 typer af resultater "detekteret" eller "ikke detekteret". De indikerer henholdsvis en positiv og en negativ dom. Svaret "detekteret" betyder, at DNA'et af det infektiøse middel er til stede i testprøven, og med 97% sandsynlighed er kroppen smittet med tuberkulose. Et negativt resultat indikerer fraværet af Koch sticks DNA i en prøve af biologisk materiale og giver en 97% chance for, at kroppen ikke har et stort antal mykobakterier og 60% at personen ikke er inficeret.

Den største specificitet for diagnosen tuberkulose har en blodprøve og sputum. Med et positivt resultat indikerer de infektion i kroppen, hvilket kræver akutte terapeutiske foranstaltninger. Undersøgelser af andre biomaterialer kan ikke angive sygdomsforløbet, men kun forekomsten af ​​fremmede bakterier. Dette sker, når en person er en bærer af sygdommen, men spred ikke infektionen i miljøet og inficerer ikke sunde mennesker.

Kvantitativ PCR-analyse udføres sjældnere, og den behandlende læge beskæftiger sig med at afkoda dens resultater. Forskningsindikatorerne bruges til at bestemme sygdommens aktivitet og graden af ​​skade på kroppen. Baseret på de opnåede data kan en specialist bestemme effektiviteten af ​​behandlingen og justere om nødvendigt den terapeutiske ordning.

Tuberkulose har altid været og er fortsat et af de alvorligste problemer for helheden for hele menneskeheden. Moderne diagnostiske metoder kan opdage sygdommen i et tidligt stadium for at starte behandlingen i tide. Tuberkulinprøve, smearmikroskopi, bakteriekultur på kunstige næringsmedier har vist sig inden for laboratoriediagnose af tuberkulose. Den lange ventetid på resultater og den øgede frekvens af falske positive aflæsninger gjorde dem imidlertid forældede og fremhævede mere avancerede teknologier. PCR-analyse er en meget specifik og meget effektiv metode til diagnosticering af tuberkulose. Hans resultater er de mest pålidelige blandt alle de foreslåede laboratoriemetoder til detektering af Koch-pinde. Det giver ikke blot mulighed for at lave den endelige dom, men også at udføre den nødvendige differentialdiagnose.

Polymerasekædereaktion for tuberkulose

PCR-analyse for tuberkulose giver dig mulighed for at identificere sygdommen i et hvilket som helst udviklingsstadium med et minimum antal mykobakterier eller endog hvis der er fragmenter i det menneskelige legeme af patogen DNA.

Hvad er PCR?

PCR syntes relativt nylig. I 1983 blev metoden skabt af den amerikanske mikrobiolog Carey Mullis, for hvilken han modtog Nobelprisen. Grundlaget for PCR er den gentagne fordobling af en bestemt region af DNA ved hjælp af enzymer in vitro. Som et resultat er patogen-DNA'et moderigtigt til at visualisere selv i dets tilstedeværelse i minimale mængder (spor af tilstedeværelse). Dette er guldstandarden for specificitet.

Tuberkulose-PCR (polymerkædeproces) er en diagnostisk fremgangsmåde til at detektere en infektion ved hjælp af genteknologi. Denne metode til forskning anvendes i mikrobiologiske, virologiske og immunologiske medicinske laboratorier i tvivlsom og praktisk talt upræstativ med hensyn til diagnosesager.

Hvad er der behov for analyse?

Analysen kræver 3 komponenter:

• DNA-prøve.
• Nukleotidforbindelser.
• Polymerase enzym.

Analysen sendes til laboratoriet som foreskrevet af behandlingslægen.

Hvad er grundlaget for metoden?

Ved undersøgelsens begyndelse ekstraheres et mikrobielt DNA-segment fra biofluidet.

PCR bestemmer typen af ​​patogen, 2-3 timer efter testen. Det behøver imidlertid ikke at være isoleret fra biologisk materiale eller vokse i lang tid i laboratoriet. Det vigtigste er, at prøven indeholdt et stykke inficeret DNA. Under analysen af ​​tuberkulose in vitro skabes kunstig syntese af ribonukleinsyreinfektion. På grund af den hurtige reaktion efter et par timer kan du få et pålideligt resultat.

Diagnostiske trin

Tuberkulose-PCR er en simpel diagnostisk metode, der giver dig mulighed for at få et svar på kort tid. For at bestemme tbc er det biologiske materiale af en inficeret person (blod, sputum, biologisk væske) taget.

Diagnosen finder sted i tre hovedfaser:

• Efter prøveudtagning i laboratoriet ødelægges den primære form for DNA. Ved en temperatur på 980 grader adskilles 1,5 kæder i 1,5 minutter.
• Ved næste fase udglødes lufttemperaturen med et par afdelinger, DNA er forbundet med primeren.
• Den sidste fase af undersøgelsen kaldes forlængelse. Det er molekylernes biosyntese.

For at identificere det ønskede DNA med en infektionspartikel kan diagnostik udføres 20-25 gange.

Er det nødvendigt at gøre PCR til tuberkulose?

PCR-analyse for tuberkulose udføres altid, når der er behov for det, det er inkluderet i kvalitetsstandarden for testning af en patient for tuberkulose. For at gennemføre det behøver du kun en henvisning fra din læge. Ofte i polyklinikker anvendes andre diagnostiske metoder til at bestemme tuberkulose.

Disse omfatter:

• Spørgsmål og indsamling af anamnese.
• Lægeundersøgelse.
• Mantoux tuberculin test.
• Røntgen eller fluorografi.
• USA.
• Mikroskopisk diagnose af sputumprøve.

På trods af det store antal diagnostiske værktøjer vokser antallet smittede hvert år. Desuden har patologien erhvervet nogle funktioner: procesens sværhedsgrad, en stigning i dødelige udfald og patogenens immunitet over for stoffer.

Læger anbefaler ikke at opgive den årlige inspektion og vaccination, da dette øger risikoen for infektion. PCR-analyse har mange fordele, så det anses for at være den mest nøjagtige og informative af alle instrumentelle metoder til detektering af tbc og anvendes meget i moderne klinikker.

Hvad er værdien af ​​metoden?

Polymerkædeprocessen anvendes ofte i forbindelse med yderligere metoder til at detektere tuberkuloseinfektion. Værdien af ​​metoden er som følger:

• Kort holdtid. Allerede efter 2-3 timer efter bloddonation er det muligt at påvise tilstedeværelsen af ​​en infektion i biologisk materiale. Dette er uundværligt i tilfælde hvor der er et spørgsmål om liv og død, og du skal identificere den nøjagtige diagnose for kirurgisk indgreb.
• Nogle diagnostiske metoder har deres egne kontraindikationer og viser ikke altid et komplet billede af diagnosen. Ved hjælp af PCR registreres patogenet straks, og det er muligt at udføre proceduren for mennesker i alle aldre.
• Som en prøve kan du tage et biologisk materiale inficeret. For at bestemme lungesyge af sygdommen tages urin eller spyt. En blodprøve hjælper med at identificere alle former for patologi. Spinalvæske er nødvendig for at bestemme tuberkuløs meningitis.
• Sikkerhedsmetode. Til forskning kræver kun patientens biologiske materiale. Derfor er det en helt sikker og harmløs procedure for både børn og voksne, i modsætning til fluorografi, som er lavet fra 18 år og Mantoux, hvilket forårsager negative reaktioner i kroppen.
• Meget følsom test. Det gør det muligt at identificere patologi selv i de tidlige udviklingsstadier, når viruset endnu ikke har ramt alle cellerne i kroppen.
• Effektiv metode til diagnosticering af patologisk gentagelse.
• En innovativ måde at identificere Koch-staven fra de første dage af dens udvikling. Dette giver dig mulighed for hurtigt at starte den korrekte behandling og redde en person fra døden. I de tidlige udviklingsstadier kan patologi helbredes fuldstændigt uden komplikationer.

Denne diagnosemetode har mange fordele og anvendes aktivt i forskellige medicinske institutioner. På trods af dens fordele har PCR også sine negative egenskaber.

Hvad er ulemperne?

Ulemperne ved polymerkædeprocessen indbefatter:

• De høje omkostninger ved proceduren.
• Metoden er ikke egnet til dem, der allerede har behandlet tbc, da døde infektionsceller kan give et falsk positivt resultat.
• Når mutation af celler af DNA kan være et falsk resultat.
• Specialisten skal korrekt tage det nødvendige biologiske materiale for at bestemme typen af ​​infektion og stedet for lokaliseringen.
• Ikke altid tilladt for patienter med lungesygdom.

Hvem viser analysen?

Ofte er sådan en analyse tildelt:

• • Hvis resultaterne fra Mantoux gav tvivlsomme data, bliver blod taget fra en vene for tuberkulose.
  • Patienten havde kontakt med en inficeret person, men en lægeundersøgelse hjalp ikke med at bestemme den korrekte diagnose.

• Under en nødoperation, hvor du skal vide på kortest tid, om patienten er inficeret.
• Under graviditet, når andre diagnostiske metoder ikke kan give et præcist resultat uden skade på fosteret.

Efter at have undersøgt alle fordele og ulemper ved diagnosticering af tbc, kan vi konkludere, at det er bedst at anvende flere diagnostiske metoder på en gang for at foretage en nøjagtig diagnose. Dette vil bidrage til at sikre, at der er en infektion i kroppen og på hvilket stadium af progression det er. Når diagnosen er korrekt defineret, vil det være muligt at starte en hurtig konservativ behandling og redde en person fra døden.

PCR diagnose af tuberkulose

Tuberkulose er en specifik infektion, dets fokus kan være i humane væv i årevis og spredes derefter i flere måneder. Dette er en kronisk sygdom, hvis optimale behandlingsregimer er vanskelige at vælge. En af grundene til dette er den sene diagnose, når mykobakterier, mens de er i menneskekroppen, allerede har tilpasset sig mange stoffer.

Hvilke moderne diagnosemetoder eksisterer? PCR diagnostik - hvad er det? Hvordan foregår denne forskning? I hvilke tilfælde er tuberkulose diagnosticeret af denne metode og hvad er dens essens?

Hvad er PCR-diagnostik

Dette er en af ​​de mest moderne metoder til diagnosticering af ikke kun sygdomme, men også påvisning af biologisk materiale. PCR-diagnostik blev opfundet relativt nylig. For cirka 30 år siden i 1983 foreslog en amerikansk biokemi, Carey Banks Mullis, et komplekst opsvingskema for det biologiske materiale af mikroorganismer i et kort segment. Takket være sin opdagelse blev forskeren tildelt den højeste pris - Nobelprisen.

Hvad er det - PCR diagnose af infektioner? Polymerasekædereaktion (PCR) er en diagnose af påvisning af virussygdomme, baseret på genteknologiske metoder. Det er meget udbredt inden for medicinsk mikrobiologi, immunologi og virologi. Metoden er universel og hjælper med at lave en diagnose med en lille mængde materiale. En infektion kan registreres bogstaveligt i de første timer med infektion med det, længe før de første symptomer på sygdommen optræder.

Metoden består i at opnå fra materialet fra en syg person, ikke selve patogenet, men fragmenter af genomet (DNA-partikler), dets biosyntese med efterfølgende bestemmelse til hvilken klasse af mikroorganismer det opnåede genetiske materiale tilhører ved hjælp af molekylære genetiske metoder.

På trods af at dette er en kompleks proces, tager det meget mindre tid end mange biologiske metoder til at detektere smitsomme stoffer. Inden for få timer kan en mikroorganisme detekteres ved hjælp af PCR. For at gøre dette er der ingen grund til at isolere det fra miljøet (blod, cerebrospinalvæske, sputum) og vokse det i lang tid på kunstige næringsmedier. Det er nok, at et lille fragment af DNA-strengen af ​​det infektiøse middel er til stede i det undersøgte materiale.

Reaktionsgrundlaget er muligheden under kunstige betingelser (in vitro) til at skabe syntese af nukleinsyremolekyler af det infektiøse middel.

Hvad er der brug for PCR?

1. Primers er de DNA-segmenter, hvorfra biosyntese eller skabelse begynder.
2. Nukleotider eller komplekse forbindelser, der er grundlaget for et DNA eller RNA molekyle.
3. Polymerasekædereaktion er umulig uden tilstedeværelse af polymerase, hvilket er et enzym, der accelererer PCR.

Trin af PCR-diagnostik

Hvordan udføres molekylær diagnose med PCR? Proceduren er enkel og tager kort tid under hensyntagen til indsamling af materiale.

1. Inden studiet påbegyndes, tager de det nødvendige biologiske materiale - det her er det bronkiske vaskevand, blod, maveindhold, sputum. Den type biologisk materiale afhænger af det formodede patogen.
2. Denaturering eller ødelæggelse af den primære struktur af DNA, som består af to kæder. Kernen i denne fase er at adskille de to kæder under påvirkning af høj temperatur (maksimum er 98 ºC, som ikke varer mere end to minutter).
3. Ved næste fase af PCR, kaldet annealing, reduceres temperaturen med flere grader, således at primeren vil binde til DNA-strengen.
4. Forlængelse, hvor syntesen af ​​de ønskede molekyler finder sted direkte.

Som følge heraf modtager kun 25-30 sådanne cyklusser det nødvendige antal kopier af mikroorganismer DNA, som er lette at genkende.

Kræver PCR diagnose af tuberkulose?

Det er ikke muligt for absolut alle mennesker med mistænkt tuberkulose at udføre PCR, da metoden kræver dyrt udstyr. Ikke alle offentlige klinikker har råd til at købe det. Derudover er det sket, at de sædvanlige metoder til diagnosticering af en infektion i de fleste tilfælde også retfærdiggør sig selv.

Disse omfatter:

• patientundersøgelse, historieoptagelse;
• fuld undersøgelse af personen
• en undersøgelse ved hjælp af Mantoux tuberculin testen;
• radiografi eller fluorografi;
• computerdiagnostik om nødvendigt;
• mikrobiologiske forskningsmetoder: smear mikroskopi og sputum bakteriologisk undersøgelse.

PCR til tuberkulose udføres i særlige tilfælde, når det er svært at foretage en diagnose, eller det er ikke muligt at udføre andre instrumentelle metoder.

På trods af overflod af diagnostiske metoder fortsætter forekomsten af ​​tuberkulose at vokse. I øjeblikket er der ikke kun vækst, men også andre funktioner:

• sygdommen opstår ofte i svær form;
• Antallet af dødelige tilfælde øges;
• mere modstandsdygtig over for moderne kemoterapi er diagnosticerede former for sygdommen.

Folks tilbageholdenhed med at gennemgå rutinemæssige medicinske undersøgelser årligt fører afvisningen af ​​vaccination til spredning af tuberkulose. Under sådanne forhold har vi brug for hurtige, informative og effektive forskningsmetoder, som bør være tilgængelige for børn og voksne. Alle ovennævnte diagnostiske metoder er meget ringere end PCR.

Fordele ved diagnosticering af tuberkulose med PCR

Denne forskning, men ny, har vist sig godt, især i kontroversielle tilfælde, hvor det er umuligt at foretage en diagnose af en række årsager.

Takket være PCR er det meget lettere at opdage det forårsagende middel af tuberkulose i testmaterialet.

Fordelene ved PCR-diagnostik er som følger.

1. Dette er en hurtig analyse. Et lille fragment af DNA-molekylet kan bruges til at diagnosticere om få timer (ca. fem), som med succes anvendes i nødsituationer, når for eksempel før en operation er det nødvendigt at afgøre, om en person er syg med tuberkulose.
2. PCR-analyse er tilladt i tilfælde af, at andre metoder ikke er tilgængelige eller forbudt (til påvisning af lungetuberkulose, nogle gange må du tage flere radiografiske billeder, hvilket vil være en stor dosis stråling).
3. Ved hjælp af PCR undersøges ethvert biologisk miljø for tilstedeværelsen af ​​et patogen i det. For eksempel kan du gennemføre en undersøgelse af cerebrospinalvæske, hvis der er en mistanke om tuberkuløs meningitis.
4. Tilladt PCR-diagnose af smitsomme sygdomme hos børn, fordi metoden er sikker.
5. Tillader dig at identificere patogenet på ethvert stadium af sygdommen.
6. PCR's høje følsomhed gør det muligt at opdage Mycobacterium tuberculosis, selvom der kun er få mikroorganismer i det biologiske materiale.
7. Det er godt at udføre for diagnosticering af sygdomsfornyelse.

Efter alt det læsede PCR virker næsten perfekt diagnostisk metode, som skal gøre alle mistænkt for tuberkulose. Men der er også ulemper her, de skal tages i betragtning.

Ulemper ved PCR ved diagnosen tuberkulose

I vores tid er sådan diagnostik mere sjælden end regelmæssighed. Og for dette er der grund.

1. Dette er en dyr forskningsmetode. På mange klinikker er udstyr til PCR fraværende på grund af dets høje omkostninger, men analysen kan stadig gøres i betalte laboratorier.
2. Umiddelbart efter behandling kan døde mykobakterier eller lever i små mængder stadig være til stede i kroppen (resultatet vil være positivt under PCR-diagnostik), så metoden vil være upålidelig på nuværende tidspunkt, det giver ingen mening at udføre det.
3. Mutationer af mykobakterier resulterer i ineffektiv PCR - en normal DNA-streng-sekvens kan ikke syntetiseres.
4. Det er nødvendigt at vælge det rigtige miljø for undersøgelsen. Blod er kun taget, hvis det mistænkes for at blive inficeret (sepsis). Der er ikke behov for at tage sputum, hvis der er et spørgsmål om tuberkulose i nervesystemets organer. I dette tilfælde vil PCR ikke være i stand til at detektere patogenet, og diagnosen vil være uninformativ.

Indikationer for at detektere tuberkulose ved hjælp af PCR-analyse

PCR-diagnose af tuberkulose udføres oftest i kontroversielle tilfælde. Hvornår refererer læger denne undersøgelse?

1. Hvis det er svært at foretage en diagnose ved hjælp af de sædvanlige tilgængelige metoder, men der var kontakt med en patient med tuberkulose.
2. I det tilfælde, hvor en person ikke kan leveres til en klinik for at gennemføre rutinemæssige rutinemæssige test for tuberkulose, er det lettere at undersøge ham ved anvendelse af PCR, da sputum til testen kan leveres i en krukke, og diagnosen er bekræftet inden for få timer.
3. Hvis en person skal have en nødoperation, og det er presserende at finde ud af om han er syg med tuberkulose.
4. Om nødvendigt er en gravid kvinde også bedre at undersøge for tuberkulose ved anvendelse af PCR, da metoden er sikker.
5. På en betalt basis er enhver, der ikke er blevet diagnosticeret med tuberkulose, blevet bekræftet ved hjælp af bakteriologiske metoder og fluoroskopi. Dette sker, når læsionen i lungerne er umærkelig i det direkte billede, og personen under levering af sputum til undersøgelsen kunne ikke følge anbefalingerne for korrekt samling af materiale. I dette tilfælde er personen bekymret for alle symptomer, der er karakteristiske for lungetuberkulose.
6. Når der er tvivl om resultaterne af Mantoux-testen.
7. Det er bedre at gøre PCR-diagnose af tuberkulose hos børn. Fremgangsmåden er sikker, skaber ikke yderligere strålingseksponering og er effektiv til at detektere vanskeligt at diagnosticere sygdomsformer.

Tidlig diagnose af tuberkulose er nøglen til ordentligt ordineret behandling og nedsættelse af sygdommens spredning. Ofte er velkendte sygdomsdetekteringsmetoder ikke altid effektive. Derfor er PCR i dag en af ​​de mest pålidelige og sikre måder at påvise infektion i de tidlige stadier af dens udvikling.